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人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的O-糖链的比较分析 被引量:2
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作者 潘丽英 顾笑 +4 位作者 王承健 强珊 黄琳娟 张英 王仲孚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1275-1281,共7页
以培养的原发性肝细胞癌Hep G2细胞和正常肝细胞L02为研究对象,用细胞裂解液提取总蛋白,然后采用Carlson还原性β-消除法释放O-糖链,以阳离子交换柱结合C18柱纯化分离O-糖链,用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对O-糖链进行序... 以培养的原发性肝细胞癌Hep G2细胞和正常肝细胞L02为研究对象,用细胞裂解液提取总蛋白,然后采用Carlson还原性β-消除法释放O-糖链,以阳离子交换柱结合C18柱纯化分离O-糖链,用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对O-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的O-糖链进行定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系Hep G2中检测到10种O-糖链,正常细胞系L02中检测到9种O-糖链,其中9种O-糖链是2种细胞系中共有的,但Hep G2中存在癌细胞中特有的缩短的O-糖链N1A1(Neu Ac-Gal NAc,sialyl Tn抗原).t检验结果表明,Hep G2与L02相比,在检测到的10种O-糖链中有5种的含量具有极显著性差异(P<0.01),2种的含量具有显著性差异(P<0.05). 展开更多
关键词 原发性细胞HepG2 正常人细胞l02 O-糖链 电喷雾电离质谱
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藻毒素冈田酸致肝毒性及通过微小RNA调控转录的分子机制
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作者 罗志强 章笑甜 +5 位作者 孙皓迪 林伟 郭若凡 李婧铭 崔悦 于国华 《生态毒理学报》 北大核心 2025年第5期149-157,共9页
冈田酸是一种常见于贝类中的强效藻类毒素,已被证实可诱发肝脏损伤。然而,关于其肝毒性作用的具体分子机制目前尚未完全阐明。本研究首先采用细胞自动计数法、Ki67和EdU染色实验评估冈田酸对正常人肝细胞系L02的毒性作用,随后提取细胞样... 冈田酸是一种常见于贝类中的强效藻类毒素,已被证实可诱发肝脏损伤。然而,关于其肝毒性作用的具体分子机制目前尚未完全阐明。本研究首先采用细胞自动计数法、Ki67和EdU染色实验评估冈田酸对正常人肝细胞系L02的毒性作用,随后提取细胞样本miRNA进行测序分析,最后,通过RT-qPCR实验检测关键miRNA的表达。结果表明,经0.5μmol·L^(-1)和1μmol·L^(-1)冈田酸处理24 h后,L02细胞数量较对照组显著减少。Ki67和EdU染色实验表明冈田酸能通过抑制L02细胞增殖而发挥肝毒性的作用。通过miRNA测序分析,鉴定出96个差异表达的miRNA。通路富集分析结果表明,MAPK信号通路在这些miRNA调控的靶基因中高度富集。这些差异表达的miRNA主要通过调控关键基因,如MAP3K14、MAP2K3和MAP3K8等,影响MAPK信号通路的活性,进而诱发肝毒性反应。RT-qPCR结果显示,L02细胞中这些差异miRNA的表达趋势与miRNA测序结果一致,证明了测序结果的可靠性。综上所述,本研究评估了冈田酸的肝毒性作用,并构建了冈田酸对肝细胞作用的miRNA表达谱,揭示了冈田酸可通过调控miRNA表达干预MAPK通路,进而抑制细胞增殖,诱导肝毒性。 展开更多
关键词 冈田酸 正常人肝细胞系l02 急性毒性 微小RNA
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三氯生和三氯卡班对人体肝细胞DNA损伤的研究 被引量:44
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作者 李林朋 马慧敏 +4 位作者 胡俊杰 黎玉华 王艺陪 盛国英 傅家谟 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2010年第12期2897-2901,共5页
三氯生(TCS)和三氯卡班(TCC)作为优良的抗菌和消毒剂,在药物和个人护理用品中广泛使用。近几年来,TCS和TCC在各种环境介质和生物体中被频繁检出,并引起国内外环境科学工作者的重点关注。目前,有关TCS和TCC对水生生物的毒性研究已有大量... 三氯生(TCS)和三氯卡班(TCC)作为优良的抗菌和消毒剂,在药物和个人护理用品中广泛使用。近几年来,TCS和TCC在各种环境介质和生物体中被频繁检出,并引起国内外环境科学工作者的重点关注。目前,有关TCS和TCC对水生生物的毒性研究已有大量的报道,其对人体健康危害的报道仍较少。为了评估TCS和TCC对人体的遗传毒性,利用彗星实验研究两种污染物对正常人肝细胞(L02)DNA的损伤效应。结果发现:三氯生和三氯卡班皆能引起人体肝细胞的DNA损伤,并呈现显著的剂量-效应关系和时间效应关系。相比于TCS而言,L02细胞对TCC更为敏感,在低暴露剂量(2.38μmol.L-1)下就可以引起DNA断裂损伤。该结果有助于进一步揭示TCS和TCC对人体毒害的机制,更全面的评估两种污染物对人体健康的风险。 展开更多
关键词 三氯生 三氯卡班 彗星实验 正常人细胞(l02) DNA损伤
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