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砂梨ACC合酶cDNA全长克隆及其反义与正义表达载体构建: 1; 作者乔玉山宋长年 +4 位作者王新卫李志强熊爱生姚泉洪章镇《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期25-31,共7页; 为构建干扰砂梨(Pyrus pyrifolia Nakai)ACC合酶基因表达的遗传转化载体,利用RACE技术从'早生新水'成熟果实cDNA中克隆了ACC合酶的cDNA,该cDNA全长为1939bp,命名为Pyp-ACS,GenBank登录号为EF566865。Pyp-ACS核苷酸序列含有5′... 展开更多; 关键词砂梨 ACC合酶 CDNA 反义/正义表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

马尾松GGPPS基因cDNA序列克隆及正义、反义植物表达载体的构建被引量：1: 2; 作者陈博雯覃子海 +3 位作者王鹏良贾婕陈虎刘海龙《山西农业科学》 2015年第9期1102-1105,共4页; 以马尾松幼苗针叶组织为材料,依据Genbank中已报道的GGPPS基因CDS区序列设计特异引物,经RT-PCR技术克隆得到GGPPS基因cDNA序列。克隆片段经酶解后分别正向、反向插入植物表达载体p-GFP,构建成GGPPS基因正义、反义植物表达载体。采用冻... 展开更多; 关键词马尾松牻牛儿牻牛儿基焦磷酸合酶正义表达载体反义表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

ZmPti1基因正义和RNAi表达载体的构建及其转化玉米的研究被引量：5: 3; 作者张森燕吴忠义 +3 位作者张秀海刘占磊王永勤黄丛林《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期1-5,共5页; 构建了ZmPti1基因的正义表达载体和RNAi载体,以bar基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将构建的两个表达载体分别转化到玉米自交系178。收获的种子播种于营养钵中,出苗后,经0.1%的草丁膦筛选得到40株草丁膦抗性植株,进一步用PCR鉴定与P... 展开更多; 关键词 ZmPti1基因正义表达载体 RNAI载体花粉管通道法转基因植株; 在线阅读下载PDF 职称材料

玉米ZmPT6基因的克隆及RNAi表达载体的构建被引量：2: 4; 作者朱先灿宋凤斌《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第5期11-15,共5页; 采用PCR方法分别从玉米郑单958基因组DNA及RNA中克隆了菌根共生磷酸盐转运蛋白基因ZmPT6,序列分析表明,ZmPT6基因全长cDNA 1665 bp,包括一个长97 bp的内含子;编码554个氨基酸,属于Pht1家族成员,由12个疏水的跨膜结构域组成。并构建了35... 展开更多; 关键词 ZmPT6基因正义表达载体反义表达载体 RNAI载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建: 5; 作者田红梅樊继德于喜艳《山东农业科学》 2007年第3期5-7,共3页; 为了改善甜瓜果实的品质及研究甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的生物学功能,本试验分别构建了甜瓜果实SPS基因的正义及反义表达载体。用PCR方法将克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用带有KpnⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物扩增,然后将该扩增片... 展开更多; 关键词甜瓜 SPS基因正义表达载体反义表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

黄瓜硝酸还原酶基因(CsNR)序列分析及正反义表达载体的构建: 6; 作者潘玲玲王秀峰 +3 位作者李强杨凤娟魏珉史庆华《天津农业科学》 CAS 2017年第7期1-5,共5页; 为进一步研究CsNR的作用机制,从黄瓜幼叶中克隆获得硝酸还原酶基因编码区序列(CDS)全长和片段(CsNR;EC1.6.6.1),并运用生物学软件对该基因进行序列分析。其中CDS全长2 748 bp,编码915个氨基酸;CDS片段360 bp。CDS全长和p ROKⅡ经Kpn I... 展开更多; 关键词黄瓜硝酸还原酶生物信息学正义表达载体反义表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名砂梨ACC合酶cDNA全长克隆及其反义与正义表达载体构建: 1; 作者乔玉山宋长年王新卫李志强熊爱生姚泉洪章镇; 机构南京农业大学园艺学院上海市农业科学院生物技术研究所; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期25-31,共7页; 基金江苏省高新技术研究项目(BG2006313); 文摘为构建干扰砂梨(Pyrus pyrifolia Nakai)ACC合酶基因表达的遗传转化载体,利用RACE技术从'早生新水'成熟果实cDNA中克隆了ACC合酶的cDNA,该cDNA全长为1939bp,命名为Pyp-ACS,GenBank登录号为EF566865。Pyp-ACS核苷酸序列含有5′末端非翻译区109bp、1488bp完整的开放阅读框和3′末端非翻译区342bp(含25bp的Ploy+(A))。Pyp-ACS编码495个氨基酸,与白梨(Pyrus×bretschneideri Rehd.)、西洋梨(Pyrus communisL.)、中国李(Prunus salicina Lindl.)、桃(Prunus persica(L.)Batsch)、梅(Prunus mume Seib.et Zucc.)、苹果(Malus×domestica Borkh.)和柿(Diospyros kaki Thunb.)有较高的同源性。该氨基酸序列具备ACC合酶7个保守区和组成该酶活性中心的12个氨基酸残基,即SLSKDMGFPGLR,进一步验证了克隆的正确性。以pYPX145载体为基础,分别将Pyp-ACS编码区序列反向和正向插入相应位点构建反义和正义表达载体,并分别命名为pPyp-ACS(-)和pPyp-ACS(+),目的基因由双35S启动子所控制。分别将这2个表达载体导入根癌农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)EHA105,为耐贮藏转基因梨的遗传转化提供载体。; 关键词砂梨 ACC合酶 CDNA 反义/正义表达载体; Keywords Pyrus pyrifolia Nakai 1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase cDNA antisense/sense expression vector; 分类号 S661.2 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马尾松GGPPS基因cDNA序列克隆及正义、反义植物表达载体的构建被引量：1: 2; 作者陈博雯覃子海王鹏良贾婕陈虎刘海龙; 机构广西林业科学研究院广西优良用材林资源培育重点实验室; 出处《山西农业科学》 2015年第9期1102-1105,共4页; 基金广西自然科学基金项目(2014GXNSFBA118106) 广西林业科学研究院基本科研业务费项目(林科201419号); 文摘以马尾松幼苗针叶组织为材料,依据Genbank中已报道的GGPPS基因CDS区序列设计特异引物,经RT-PCR技术克隆得到GGPPS基因cDNA序列。克隆片段经酶解后分别正向、反向插入植物表达载体p-GFP,构建成GGPPS基因正义、反义植物表达载体。采用冻融法将重组质粒导入农杆菌菌株LBA4404,建立植物表达载体系统,为下一步植物转化研究过表达、抑制表达GGPPS基因对萜烯类物质合成的影响建立研究基础。; 关键词马尾松牻牛儿牻牛儿基焦磷酸合酶正义表达载体反义表达载体; Keywords Pinus massoniana Geranylgeranyl diphosphate synthetase sense expression vector antisense expression vector; 分类号 S791.248 [农业科学—林木遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ZmPti1基因正义和RNAi表达载体的构建及其转化玉米的研究被引量：5: 3; 作者张森燕吴忠义张秀海刘占磊王永勤黄丛林; 机构首都师范大学生命科学学院北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期1-5,共5页; 基金国家“973”项目(2003CB114302) 北京市科玉米创新平台项目(YZPT02-06); 文摘构建了ZmPti1基因的正义表达载体和RNAi载体,以bar基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将构建的两个表达载体分别转化到玉米自交系178。收获的种子播种于营养钵中,出苗后,经0.1%的草丁膦筛选得到40株草丁膦抗性植株,进一步用PCR鉴定与PCR-Southern检测得到33株转基因植株,其中15株是转化正义表达载体的转基因植株,18株是转化RNAi表达载体的转基因植株。并对转化方法和ZmPti1基因的功能进行了讨论。; 关键词 ZmPti1基因正义表达载体 RNAI载体花粉管通道法转基因植株; Keywords ZmPtil gene Sense expression vector RNAi vector Pollen tube pathway Transgenic plants; 分类号 S513.035.3 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名玉米ZmPT6基因的克隆及RNAi表达载体的构建被引量：2: 4; 作者朱先灿宋凤斌; 机构中国科学院东北地理与农业生态研究所中国科学院研究生院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第5期11-15,共5页; 基金国家高技术研究发展计划"863"资助项目(2006AA10Z227); 文摘采用PCR方法分别从玉米郑单958基因组DNA及RNA中克隆了菌根共生磷酸盐转运蛋白基因ZmPT6,序列分析表明,ZmPT6基因全长cDNA 1665 bp,包括一个长97 bp的内含子;编码554个氨基酸,属于Pht1家族成员,由12个疏水的跨膜结构域组成。并构建了35S启动子驱动的植物正义、反义及RNAi表达载体,为下一步玉米的遗传转化及ZmPT6基因的功能研究奠定了基础。; 关键词 ZmPT6基因正义表达载体反义表达载体 RNAI载体; Keywords ZmPT6 gene Sense expression vector Antisense expression vector RNAi vector; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建: 5; 作者田红梅樊继德于喜艳; 机构山东农业大学园艺科学与工程学院; 出处《山东农业科学》 2007年第3期5-7,共3页; 基金国家自然科学基金项目(编号30471191) 山东农业大学博士后基金项目; 文摘为了改善甜瓜果实的品质及研究甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的生物学功能,本试验分别构建了甜瓜果实SPS基因的正义及反义表达载体。用PCR方法将克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用带有KpnⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物扩增,然后将该扩增片段克隆到pMD19-T Simple载体上,再用KpnⅠ和XbaⅠ双酶切,得到该基因编码区3.37 kb的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的KpnⅠ/XbaⅠ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的正义表达载体。将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用KpnⅠ和HincⅡ双酶切,得到该基因编码区830 bp的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的KpnⅠ/SmaⅠ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的反义表达载体。; 关键词甜瓜 SPS基因正义表达载体反义表达载体构建; Keywords Muskmelon Sucrose phosphate synthase gene Sense expression vector Antisense expression vector Construction; 分类号 S652 [农业科学—果树学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名黄瓜硝酸还原酶基因(CsNR)序列分析及正反义表达载体的构建: 6; 作者潘玲玲王秀峰李强杨凤娟魏珉史庆华; 机构山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室农业部黄淮海设施农业工程科学观测实验站; 出处《天津农业科学》 CAS 2017年第7期1-5,共5页; 基金国家现代农业产业技术体系建设专项资助(CARS-25); 文摘为进一步研究CsNR的作用机制,从黄瓜幼叶中克隆获得硝酸还原酶基因编码区序列(CDS)全长和片段(CsNR;EC1.6.6.1),并运用生物学软件对该基因进行序列分析。其中CDS全长2 748 bp,编码915个氨基酸;CDS片段360 bp。CDS全长和p ROKⅡ经Kpn I单酶切和连接,构建了CsNR正义表达载体;CDS片段和p ROKⅡ经Kpn I和Sac I双酶切,构建了CsNR反义表达载体。通过与其他高等植物NR蛋白进行同源性比对分析,结果发现,CsNR基因的氨基酸序列与甜瓜、烟草、拟南芥、油菜NR基因编码的氨基酸序列高度同源,其中与甜瓜NR蛋白之间同源性最高,为98.25%。; 关键词黄瓜硝酸还原酶生物信息学正义表达载体反义表达载体; Keywords Cucumis satinus L. nitrate reduatase bioinformatics sense expressing vector antisense expression vector; 分类号 S642.2 [农业科学—蔬菜学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	砂梨ACC合酶cDNA全长克隆及其反义与正义表达载体构建	乔玉山宋长年王新卫李志强熊爱生姚泉洪章镇	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马尾松GGPPS基因cDNA序列克隆及正义、反义植物表达载体的构建	陈博雯覃子海王鹏良贾婕陈虎刘海龙	《山西农业科学》	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	ZmPti1基因正义和RNAi表达载体的构建及其转化玉米的研究	张森燕吴忠义张秀海刘占磊王永勤黄丛林	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	玉米ZmPT6基因的克隆及RNAi表达载体的构建	朱先灿宋凤斌	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建	田红梅樊继德于喜艳	《山东农业科学》	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	黄瓜硝酸还原酶基因(CsNR)序列分析及正反义表达载体的构建	潘玲玲王秀峰李强杨凤娟魏珉史庆华	《天津农业科学》 CAS	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料