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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GD2022株的分离鉴定及遗传进化分析 被引量:1
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作者 邓可辉 王修武 +3 位作者 郭智轩 韩淑杰 孙守湖 贺东生 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期34-41,共8页
为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-... 为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-1和PRRSV-2参考毒株序列进行同源性及遗传进化分析。结果显示,成功分离1株PRRSV-1,命名为GD2022株,其接种PAMs可引起典型的细胞病变,从出现病变的F5细胞中提取核酸,用PCR分段扩增出PRRSV-1 GD2022株10个基因组片段,分别连接到pCE2 TA/Blunt-Zero载体进行测序,拼接后获得PRRSV-1 GD2022株全基因组长15058个核苷酸(不包含polyA尾)。同源性分析显示,该分离株全基因组序列与PRRSV-1参考毒株(LV株)和PRRSV-2参考毒株(VR2333株)核苷酸序列同源性分别为87%和59.7%。遗传进化树分析显示,全基因序列和ORF5基因与国内外PRRSV-1毒株为同一进化分支,且与疫苗毒分支较远,推断分离株为1株PRRSV-1,属于基因亚型1。氨基酸序列比对分析显示,ORF3和ORF4重叠区域缺失3个核苷酸,导致GP3蛋白和GP4蛋白分别在第245和第65氨基酸位点缺失了1个氨基酸,且与LV株比对,GD2022毒株GP5的氨基酸序列在中和抗原表位第33氨基酸位点(D→A)出现点突变,在高变区第56氨基酸位点(D→A)和第63氨基酸位点(G→D)出现两处突变。重组分析显示,GD2022毒株未发生重组事件。成功分离鉴定1株PRRSV-1毒株,为国内PRRSV-1生物学特性研究提供了材料,也为了解广东省内PRRSV-1流行情况及变异特点提供参考依据。 展开更多
关键词 欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 全基因组测序 遗传进化分析
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2016年我国3株欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及其全基因组特征分析 被引量:13
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作者 张洪亮 张晶 +13 位作者 张文立 相丽润 宋帅杰 刘春晓 李真 彭金美 陈家锃 冷超粮 王倩 白云 安同庆 童光志 蔡雪辉 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期513-517,共5页
2016年,本实验室共检测到3株基因1型(欧洲型)猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),分别命名为ZD1株、WK14株和WG9株,本研究对3株PRRSV进行了全基因组序列分析。遗传演化分析显示,3株PRRSV均属于基因1型I亚型,与基因1型代表株LV的核苷酸同源性... 2016年,本实验室共检测到3株基因1型(欧洲型)猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),分别命名为ZD1株、WK14株和WG9株,本研究对3株PRRSV进行了全基因组序列分析。遗传演化分析显示,3株PRRSV均属于基因1型I亚型,与基因1型代表株LV的核苷酸同源性为88.7%~88.9%,与基因2型代表株VR2332的核苷酸同源性为60.7%~60.8%。ORF3与ORF4推导氨基酸序列比对结果显示,ZD1株的ORF3提前26个氨基酸(aa)终止,这是首次报道基因1型PRRSV编码的结构蛋白存在提前终止现象,WK14株与WG9株在ORF3的245位存在1个氨基酸的缺失;3株PRRSV在ORF4的66位皆存在1个氨基酸的缺失。Simplot生物学重组软件分析表明,WK14株为重组病毒,供体病毒株为BJEU06-1,提供重组片段的病毒株为NVDC-FJ,重组位置位于第931~3 379位碱基处。ZD1株和WG9株未发现重组现象。本研究发现我国欧洲型PRRSV基因组在缺失、重组等方面正发生一些新的变化,有必要对该类病毒进行持续监测和深入研究。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因1型 缺失 重组
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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪病理学特征及其组织内病毒分布 被引量:3
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作者 李冰 刘丽颖 +1 位作者 王辉暖 周铁忠 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期67-70,共4页
为了研究仔猪感染欧洲型猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病理学特征及其病毒在组织内的分布特点,用辽宁分离毒株EU-PRRSV LNEU12接种健康仔猪14d后,扑杀所有仔猪,观察病理学特征并采用免疫组织化学方法分析组织内抗原分布情况。结果表明,欧... 为了研究仔猪感染欧洲型猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病理学特征及其病毒在组织内的分布特点,用辽宁分离毒株EU-PRRSV LNEU12接种健康仔猪14d后,扑杀所有仔猪,观察病理学特征并采用免疫组织化学方法分析组织内抗原分布情况。结果表明,欧洲型PRRS主要的病理变化是多发性间质性肺炎和淋巴结炎;病毒主要分布在肺脏、淋巴结、脾脏和脑组织中,其次为肝脏和肾脏。证明PRRS典型病理变化的产生与PRRSV分布情况具有明显的相关性。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 欧洲型 病理学特征 病毒分布 仔猪
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猪繁殖与呼吸综合征病毒生命周期的研究进展 被引量:2
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作者 刘爱军 张传亮 +1 位作者 黄晓兵 周彩琴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1027-1041,共15页
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以猪呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为主要特征的传染病,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。然而,PRRS至今仍没有安全有效的疫苗和药物进行防治。全面深入理解PRRSV生命周期可以为PRRS防控提供新的思路。因此,本文在简述PRRSV生命周期的基础上,重点对病毒侵入、复制与转录、翻译及翻译后修饰、组装等过程的研究进展进行综述,以期为PRRSV致病机制及防控研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 入侵 复制和转录 翻译及翻译后修饰 组装
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双氢青蒿素体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究
5
作者 秦枫 刘云 +4 位作者 唐楠楠 吴植 李勇军 于生兰 朱善元 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4379-4393,共15页
【目的】探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)作用。【方法】试验首先建立体外抗PRRSV的Marc-145细胞模型,采用MTT法检测DHA对Marc-14... 【目的】探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)作用。【方法】试验首先建立体外抗PRRSV的Marc-145细胞模型,采用MTT法检测DHA对Marc-145细胞毒性,确定其最大安全浓度。将Marc-145细胞分为4组,分别为空白对照组(Control)、阳性对照组(利巴韦林)、模型组(PRRSV)和药物组(DHA),检测阻断、抑制和直接灭活作用方式下DHA抗PRRSV的作用效果。通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测不同作用方式下、不同时间点PRRSV N的mRNA和蛋白表达量,利用Annexin/PI双染法检测PRRSV感染诱导的细胞凋亡情况。【结果】DHA和阳性药物利巴韦林的最大安全浓度分别为3.13和15.63μg/mL。在阻断、抑制和直接灭活作用下,DHA对PRRSV的的最大抑制率分别为66.2%、88.9%和62.1%;在抑制作用下细胞基本保持单层完好,在阻断和直接灭活作用下细胞出现了圆缩、团聚的现象。抑制作用下,利巴韦林对PRRSV的抑制率最大,抑制率为68.9%,细胞出现了圆缩、团聚的现象。实时荧光定量PCR检测结果显示,在阻断和抑制作用下,与模型组相比,利巴韦林和DHA组细胞中PRRSV N基因拷贝数显著降低(P<0.05);在直接灭活作用下,与模型组相比,DHA组细胞中PRRSV N基因拷贝数显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,不同作用方式下,与模型组相比,不同时间点DHA组细胞中PRRSV N蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,阻断作用下,与模型组相比,早期凋亡48 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05);晚期凋亡不同时间点,利巴韦林和DHA组细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。抑制作用下,与模型组相比,在早期凋亡和晚期凋亡72 h时,DHA组细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。直接灭活作用下,与模型组相比,早期凋亡24、48 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05);晚期凋亡24、72 h时,DHA组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。【结论】DHA体外抗PRRSV作用显著,主要通过抑制PRRSV N基因表达及N蛋白合成发挥作用,同时对细胞凋亡具有抑制效果。 展开更多
关键词 双氢青蒿素(DHA) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 抗病毒作用 细胞凋亡
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2021—2024年河南省猪繁殖与呼吸综合征流行病学监测
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作者 靳冬 赵胜杰 尼博 《中国动物检疫》 2025年第6期9-12,54,共5页
为掌握近年来河南省猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行情况,2021—2024年对采自4211场次的80865份猪组织样品进行了PRRS病原学检测,并按年份、月份和季节,区域以及场点类别对检测结果进行了时间、空间和群间分布分析。结果显示:2021—2024年... 为掌握近年来河南省猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行情况,2021—2024年对采自4211场次的80865份猪组织样品进行了PRRS病原学检测,并按年份、月份和季节,区域以及场点类别对检测结果进行了时间、空间和群间分布分析。结果显示:2021—2024年,河南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)平均场群阳性率为3.23%,平均个体阳性率为1.18%,近4年PRRSV场群和个体阳性率均呈逐年上升的趋势;冬春季节,尤其是1月份和11月份阳性率相对较高;豫东、豫西和豫北地区阳性率相对较高,豫中和豫南地区相对较低;无害化处理厂PRRSV阳性率高于养殖场和屠宰场,种猪场和散养户无阳性样品检出。结果表明:河南省PRRSV分布具有一定时间、空间和群间特征,冬春季节高发、沿黄河和黄河以北地区流行较严重,无害化处理厂污染风险较高。提示应依据病原分布特征和流行规律,加强高发季节和流行区域的PRRS防控及净化工作,同时加强无害化处理厂、屠宰场的清洗消毒和生物安全管理,降低病原流行和散播风险。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 病原 监测 分析 河南省
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猪繁殖与呼吸综合征流行现状及防控策略
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作者 王京兰 赵金福 +2 位作者 薛瑜 刘敏 程素彩 《广东饲料》 2025年第4期45-47,共3页
猪繁殖与呼吸综合征,又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种烈性、高度接触性重要传染病,该病可导致母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病,给养猪业带来了严重威胁。本文通过介绍该病的临床症状、病理变化、诊断方法及流行现状,... 猪繁殖与呼吸综合征,又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种烈性、高度接触性重要传染病,该病可导致母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病,给养猪业带来了严重威胁。本文通过介绍该病的临床症状、病理变化、诊断方法及流行现状,并采取加强生物安全、合理使用疫苗和控制继发感染的措施进行防控,以期为蓝耳病的预防和控制提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 流行现状 防控措施
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规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的净化
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作者 雷松波 《中国畜牧业》 2025年第19期85-88,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以各年龄段猪只呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为特征的一种高度传染性疫病。目前该疫病已在全球所有养猪国家普遍流行,自20世纪80年代出现以来,每年给全球养猪业造成巨... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以各年龄段猪只呼吸系统疾病和母猪繁殖障碍为特征的一种高度传染性疫病。目前该疫病已在全球所有养猪国家普遍流行,自20世纪80年代出现以来,每年给全球养猪业造成巨大损失。PRRSV会导致猪群繁殖损失增加、死亡率上升、日增重下降及饲料效率降低,仅在美国,由PRRS造成的生产力损失每年估计达6.64亿美元。 展开更多
关键词 猪繁殖障碍 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征
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猪繁殖与呼吸综合征和链球菌病混合感染的诊治
9
作者 林太明 《福建畜牧兽医》 2025年第5期94-95,共2页
某规模场引入种猪群为猪繁殖与呼吸综合征抗原抗体双阴,由于各方面原因造成猪繁殖与呼吸综合征病毒转阳引起发病,并出现猪链球菌病混合感染,造成重大损失。笔者通过采取加强饲养管理、使用替米考星等药物防治等综合措施,快速控制病情,... 某规模场引入种猪群为猪繁殖与呼吸综合征抗原抗体双阴,由于各方面原因造成猪繁殖与呼吸综合征病毒转阳引起发病,并出现猪链球菌病混合感染,造成重大损失。笔者通过采取加强饲养管理、使用替米考星等药物防治等综合措施,快速控制病情,旨为养猪场处理此类混合感染提供参考。 展开更多
关键词 规模猪场 猪繁殖与呼吸综合征 猪链球菌病 诊治
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黄芩苷对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外抑制作用 被引量:1
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作者 吴非凡 常伟辰 +6 位作者 孔亮 张素梅 黎露露 徐曾浩 张红英 袁淑萍 杨明凡 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2270-2278,共9页
旨在探讨黄芩苷对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抑制作用。利用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、间接免疫荧光(IFA)、半数组织培养感染剂量(TCID50)等试验观察黄芩苷对PRRSV感染阻断、直接杀灭、增殖抑制3种作用方式;吸附、内... 旨在探讨黄芩苷对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抑制作用。利用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、间接免疫荧光(IFA)、半数组织培养感染剂量(TCID50)等试验观察黄芩苷对PRRSV感染阻断、直接杀灭、增殖抑制3种作用方式;吸附、内化、复制、释放4个复制环节以及与PRRSV病毒粒子直接相互作用的影响。结果发现,黄芩苷在不同作用方式下均可抑制PRRSV复制,感染阻断4 h时抑制作用显著(P<0.05);黄芩苷可以抑制PRRSV复制过程各个阶段,吸附和内化阶段抑制效果显著(P<0.05),且呈剂量依赖;黄芩苷可直接与PRRSV病毒粒子相互作用,抑制PRRSV复制(P<0.05)。综上,黄芩苷在体外对PRRSV的复制具有抑制作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 猪繁殖与呼吸综合征病毒 体外抑制作用
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猪繁殖与呼吸综合征病毒三重纳米RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 茹敏 高洁 +3 位作者 赵治钤 郑丹阳 赵谜 穆杨 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期18-25,共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪群中不断变异和传播,给世界养猪业造成严重的经济损失。将纳米颗粒与传统RT-PCR技术相结合,根据不同毒株Nsp2核苷酸序列,设计合成PRRSV特异性通用引物,在对退火温度、引物浓度、反应循环数等进行优化... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪群中不断变异和传播,给世界养猪业造成严重的经济损失。将纳米颗粒与传统RT-PCR技术相结合,根据不同毒株Nsp2核苷酸序列,设计合成PRRSV特异性通用引物,在对退火温度、引物浓度、反应循环数等进行优化后,建立了能鉴别经典、高致病性和NADC30样PRRSV毒株的三重纳米RT-PCR(Nano RT-PCR)检测方法。特异性试验结果显示,使用该方法检测猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、猪细小病毒等病毒均无交叉反应。该方法对经典、高致病性和NADC30样PRRSV毒株的Nsp2重组质粒的检出限分别为3.32×10^(2)、6.18×10^(3)、3.26×10^(3)拷贝/μL,高于常规RT-PCR方法的灵敏度。对80份临床样本的检测结果显示,该方法可用于临床样品中PRRSV经典毒株、高致病性毒株和NADC30样毒株的鉴别检测,并可确定毒株类型,为猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 经典毒株 高致病性毒株 NADC30样毒株 纳米RT-PCR
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猪繁殖与呼吸综合征阻断ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
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作者 冯子萱 李宛生 +7 位作者 张洪亮 许浒 李超 郭镇洋 彭金美 周国辉 王倩 田志军 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第6期585-592,613,共9页
为了建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法,本研究以纯化的PRRSV全病毒为包被抗原,利用PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)为阻断抗体,经棋盘法优化各反应条件,建立了检测PRRSV抗体的阻断ELISA(B-ELISA)方法。结果显示,B-ELIS... 为了建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法,本研究以纯化的PRRSV全病毒为包被抗原,利用PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)为阻断抗体,经棋盘法优化各反应条件,建立了检测PRRSV抗体的阻断ELISA(B-ELISA)方法。结果显示,B-ELISA方法的最佳抗原包被浓度为1μg/mL,血清样品稀释度为1:4,酶标PRRSV N蛋白MAb的最佳稀释度为1:3000。ELISA结果判定标准为血清样品抑制率PI≥40%时判定为阳性,PI<40%判定为阴性。利用该方法检测PRRSV-1、PRRSV-2、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪病毒阳性血清,结果显示该方法仅检测PRRSV-1和PRRSV-2为阳性,与其他病毒阳性血清均无交叉反应,特异性强。利用该方法和IDEXX试剂盒分别检测2倍倍比(1:2~1:2048)稀释的PRRSV 71#标准阳性血清,结果显示,该方法能检测出256倍稀释的71#标准阳性血清,而IDEXX试剂盒能检测到128倍稀释的71#标准阳性血清,本实验建立的方法敏感性更高;从同一批次和不同批次包被的ELISA板中各取3块,分别检测5份猪血清样品,每份样品各重复3次,进行批内和批间重复性试验,结果显示批内重复性试验的变异系数小于10%,批间重复性试验的变异系数小于15%。利用该方法和商品化IDEXX试剂盒对黑龙江地区采集的1012份临床血清样品进行检测,结果显示,本研究建立的B-ELISA对样品的阳性检测率为73.42%(743/1012),阴性率为26.58%(269/1012),IDEXX试剂盒对样品的阳性检测率为71.84%(727/1012),阴性率为28.16%(285/1012),二者的总符合率达97.43%,Kappa值为0.957,二者检测结果高度符合。本研究建立的B-ELISA方法为PRRSV的流行病学调查及其抗体水平的监测与检测提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白 抗体 阻断ELISA
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民猪猪繁殖与呼吸综合征恢复力高低组血清代谢组学研究
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作者 孟祥旭 李佳 +5 位作者 任德明 陈奎蓉 和艺云 王立贤 盛熙晖 王立刚 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1689-1699,共11页
旨在对民猪猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)恢复力高低组血清代谢组学进行研究,为蓝耳病的防控提供参考。本研究从代谢组学的角度出发,选择28日龄民猪15头,体重相近、饲喂环境相同且攻相同蓝耳病毒,从中选取高恢复力组5头、低恢复力组5头,... 旨在对民猪猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)恢复力高低组血清代谢组学进行研究,为蓝耳病的防控提供参考。本研究从代谢组学的角度出发,选择28日龄民猪15头,体重相近、饲喂环境相同且攻相同蓝耳病毒,从中选取高恢复力组5头、低恢复力组5头,基于液相色谱-质谱(LC-MS)对血清样本进行非靶向代谢组学检测,通过正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)、聚类分析等筛选不同恢复力民猪血清差异代谢物并进行通路富集分析。结果表明:在不同恢复力组间可筛选得到39个差异代谢物(P<0.05),进一步注释分析发现,鞘磷脂、靛玉红、花生四烯酸、L-苏氨酸可以作为潜在标志代谢物候选。通路分析发现,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成、花生四烯酸代谢通路等可能通过影响炎性细胞因子水平和炎症介质的产生来减轻炎症反应,最终影响恢复力。综上所述,本研究不仅筛选到鞘磷脂、靛玉红、花生四烯酸等蓝耳病恢复力相关标志代谢物,还在代谢物角度初步诠释了恢复力差异高低的可能机制,为蓝耳病的防控和高恢复力民猪选育提供了理论参考。 展开更多
关键词 民猪 猪繁殖与呼吸综合征 恢复力 代谢组学
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2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及ORF5基因变异分析
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作者 黄文琳 于慧 +5 位作者 蓝欣 杨圆 陈洪博 范克伟 魏春华 刘建奎 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期9-16,共8页
为了研究2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异规律,采用荧光定量RT-PCR方法,对福建不同地区收集的240份疑似PRRSV的组织样品和血清进行PRRSV-1和PRRSV-2检测,对阳性样品采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因,应用... 为了研究2020-2023年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异规律,采用荧光定量RT-PCR方法,对福建不同地区收集的240份疑似PRRSV的组织样品和血清进行PRRSV-1和PRRSV-2检测,对阳性样品采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因,应用分子生物学软件进行同源性和遗传变异分析。结果显示,福建省PRRSV总体阳性率为18.8%(45/240),其中PRRSV-2的阳性率为16.3%(39/240),PRRSV-1的阳性率为2.5%(6/240)。经RT-PCR成功扩增35个PRRSV-2 ORF5基因和3个PRRSV-1 ORF5基因。序列比对分析表明,35个PRRSV-2 ORF5基因核苷酸同源性为81.3%~99.8%,与代表毒株VR2332、NADC30、NADC34、QYYZ和JXA1的核苷酸同源性为80.9%~99.3%。3个PRRSV-1 ORF5基因核苷酸同源性为82.8%~98.5%,与代表毒株LV、Amervac PRRS、FJQEU14、FJEU13等的核苷酸序列同源性为81.5%~99.7%。遗传进化分析表明,福建省PRRSV-2可分为Lineage1、Lineage3和Lineage8,其中Lineage1占比最高,为68.6%(24/35,18株为NADC30-like毒株,6株为NADC34-like毒株),PRRSV-1均属于SubtypeⅠ。氨基酸分析表明,PRRSV-1 GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽区域(aa 1-33)和2个胞外域(aa 33-67和aa 89-109);PRRSV-2 GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽区域(aa 1-25)、aa 27-36区域和抗原表位C(aa 52-62)。综上表明,PRRSV-1和PRRSV-2同时在福建省流行,NADC30-like PRRSV-2为优势流行毒株且呈现遗传多样性,NADC34-like PRRSV-2和PRRSV-1可能已在福建省潜在流行。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 序列分析 遗传进化分析 NADC34
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反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)快速检测猪繁殖与呼吸综合征
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作者 于娜 赵爱云 +8 位作者 黄春媛 马佳镁 张紫薇 范悦轩 郑佳馨 张艳 刘光亮 齐萌 曹宗喜 《新疆农业科学》 北大核心 2025年第3期748-753,共6页
【目的】针对PRRSV Nsp2基因建立反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。【方法】设计经典毒株和高致病毒株引物及探针,检测RT-RAA的敏感性及特异性等。【结果】方法与猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV Bartha-K61)、猪... 【目的】针对PRRSV Nsp2基因建立反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。【方法】设计经典毒株和高致病毒株引物及探针,检测RT-RAA的敏感性及特异性等。【结果】方法与猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV Bartha-K61)、猪流行性腹泻病毒(PEDV Purdue)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV LJX)的核酸均无交叉反应;方法对高致病性毒株最低检出限为1.71×10^(1) copies/μL,对经典株最低检出限为2.19×10^(3) copies/μL。高致病毒株方法敏感性为95.5%,特异性为100%;经典株方法敏感性为93.0%,特异性为100%,2种方法具有高度的一致性。【结论】建立的PRRSV RT-RAA荧光法可以区分2种不同的毒株并且特异性良好、灵敏度高。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 RT-RAA NSP2基因 特异性 敏感性 高致病毒株 经典毒株
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的逆转录重组酶介导等温扩增荧光检测方法的建立及应用
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作者 张紫薇 黄春媛 +4 位作者 于娜 郑佳馨 张艳 刘光亮 曹宗喜 《新疆农业科学》 北大核心 2025年第5期1286-1292,共7页
【目的】开发研究一种临床上快速、简单和准确的检测PRRSV的方法。【方法】该研究建立一种基于逆转录重组酶介导等温扩增荧光检测PRRSV的方法。该方法通过针对PRRSV ORF4基因序列设计特异性引物和探针。【结果】荧光RT-RAA检测可在41℃... 【目的】开发研究一种临床上快速、简单和准确的检测PRRSV的方法。【方法】该研究建立一种基于逆转录重组酶介导等温扩增荧光检测PRRSV的方法。该方法通过针对PRRSV ORF4基因序列设计特异性引物和探针。【结果】荧光RT-RAA检测可在41℃下用引物和探扩增20 min,通过荧光定量PCR仪实时观察结果。该方法具有较高的灵敏度和较强的特异性,与其他猪病原体无交叉反应。【结论】使用荧光RT-RAA和PCR检测180份样品,两种方法之间的符合率98.3%。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF4 RAA 快速检测
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2023年华南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析
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作者 李松倍 谢永生 +5 位作者 龙晓琴 张晓晓 陈永杰 张春红 焦茂兴 郭春和 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期331-340,共10页
[目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328... [目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328份样品进行PRRSV检测,对来自不同猪场具有代表性的29个PRRSV阳性样品ORF5基因进行测序和遗传进化分析。[结果]所有样本中PRRSV的阳性率为54.27%(178/328),获得29株PRRSV。ORF5基因序列分析结果显示,所获得的PRRSV毒株均属于基因Ⅱ型毒株,29株PRRSV ORF5基因之间的核苷酸序列相似性为83.7%~100%,氨基酸序列相似性为83.0%~100%。其中6株属于以重组毒株NADC30-like为代表的谱系1,2株属于以经典毒株VR2332为代表的谱系5,21株属于以高致病性毒株JXA1为代表的谱系8。ORF5基因氨基酸突变主要集中在2个高变区、1个诱饵表位和3个跨膜区。谱系1的5株毒株的诱饵表位区域发生了V27A突变,谱系5的2株毒株的诱饵表位区域发生了V29A突变。在中和表位区域,谱系1的8株毒株发生了I39L突变,谱系8的5株毒株发生了I39F突变。在毒力相关位点中,部分毒株发生了R13Q、R151K、R151I、R151G突变。此外,谱系1的N-糖基化位点变异较多,主要集中在第30-32、32-34、33-35、34-36、35-37、57-59位氨基酸处,而谱系5和谱系8的N-糖基化位点相对保守。[结论]目前华南地区猪场的PRRSV阳性率仍较高,PRRSV流行以多谱基因Ⅱ型为特征,谱系8和谱系1毒株占比较高,并且变异复杂多样,需加强对PRRSV的监测,以掌握PRRSV毒株之间的遗传变异情况,及时做好防控。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 遗传变异 ORF5基因 谱系
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谱系1和8重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与遗传进化分析
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作者 邹舟 黎颖 +2 位作者 韦莹莹 刘惠僮 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期29-37,共9页
2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产... 2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产生明显的细胞病变;该毒株全基因组长度为15019个核苷酸(nt),与基因2型PRRSV谱系1 NADC30-like毒株的同源性最高,为94.0%,与基因1型PRRSV代表毒株Lelystad virus同源性最低,仅为60.0%;通过Nsp2氨基酸序列比对,结果发现GXWZ20230831存在NADC30-like典型的131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失模式;与美洲型代表株VR2332相比,GXWZ20230831的GP5蛋白在非中和抗原表位发生了V27A、V185A以及R191K 3处突变,同时在GP5蛋白中存在4个潜在的N-糖基化位点;构建的全基因组序列、nsp2基因、ORF5基因遗传进化树均显示该毒株处于谱系1的分支;重组分析表明,GXWZ20230831是1株以谱系1经典毒株NADC30为骨架,谱系8毒株提供重组片段的重组毒株,重组断点位于基因组的nsp1(458-1821 nt)和Nsp4(5405-8179 nt)中。研究结果可为掌握广西地区的PRRSV遗传变异规律提供参考,为制定防控措施提供科学依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 重组 遗传进化分析
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一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及致病力分析
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作者 李明桃 刘云涛 +4 位作者 邹立宏 柳珊 刘茜 焦玉兰 郁宏伟 《中国畜禽种业》 2025年第2期104-111,共8页
该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,... 该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,感染后每日观察临床症状,测量直肠温度,并采集血液、口腔拭子、肛拭子以检测病毒血症与排毒情况,试验结束后进行病理剖检,观察大体病理变化。结果显示,感染组在感染后体温升高,第7天1头猪出现发热,第9天1头猪直肠温度达到峰值41.16℃;感染后第2天出现病毒血症及排毒,持续至感染后第21天;病理剖检发现肺部呈暗红色,局部发生实质性病变,未感染对照组未出现上述情况。可见,RP-1株可引起易感染猪只发病,并表现出明显的临床症状,但未致死,是一株中等毒力毒株,可为疫苗效力的评价提供毒株来源。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30毒株 病毒分离 致病力
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天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株ORF5基因的克隆及遗传变异分析
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作者 李文忠 荣新利 +4 位作者 刘野 吴庆东 张乐 孙英峰 于海 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期156-164,共9页
为了解天津地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的流行和遗传变异情况,收集2021-2022年天津地区养殖场209份临床疑似发病猪的组织进行检测及ORF5遗传变异分析。结果显示:PRRSV阳性样品总检出率为37.3%(78/209),并从阳性样本中选择15... 为了解天津地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的流行和遗传变异情况,收集2021-2022年天津地区养殖场209份临床疑似发病猪的组织进行检测及ORF5遗传变异分析。结果显示:PRRSV阳性样品总检出率为37.3%(78/209),并从阳性样本中选择15个不同地区来源具有代表性样品进行ORF5基因克隆序列。序列及遗传进化分析显示:该15株PRRSV毒株均属于美洲型,其中8条PRRSV毒株的ORF5基因与以HuN4为代表的类HP-PRRSV毒株同源性较高,核苷酸序列与推导氨基酸序列的同源性分别为89.4%~97.3%和80.6%~95.5%,而与NADC30、VR2332、NADC34等毒株的同源性较低,分别为77.1%~87.1%和77.1%~86.6%;6条PRRSV毒株的ORF5基因与以NADC30为代表的类NADC30毒株同源性最高,核苷酸序列与推导氨基酸序列的同源性分别为91.9%-92.7%和91.5%-93.0%,而与HuN4、VR2332、NADC34等毒株的同源性较低,分别为83.6%-87.8%和79.6%~86.6%;1条PRRSV毒株的ORF5基因与以NADC34为代表的类NADC34毒株同源性最高,核苷酸序列与推导氨基酸序列的同源性为96.4%和95.5%,而与NADC30、HuN4、VR2332等毒株的同源性为86.7%~89.9%和86.6%~92.0%。结果表明,2021-2022年天津地区以类HP-PRRSV、类NADC30 PRRSV为主要流行毒株,同时出现类NADC34毒株的流行,存在明显的遗传多样性。研究结果可为天津地区PRRS的防控提供理论依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 ORF5基因 序列分析 遗传变异 同源性分析
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