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超声辅助低共熔溶剂提取欧李原花青素工艺优化及其生物活性
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作者 赵悦 褚天旭 +2 位作者 高哲 赵文 孙亚赛 《食品工业科技》 北大核心 2025年第13期218-232,共15页
本研究旨在优化超声辅助低共熔溶剂对欧李原花青素(Cerasus humilis proanthocyanidin,CPC)的提取工艺,并与传统70%乙醇提取法进行比较,重点评估纯化物的结构组成和生物活性。用单因素结合响应面试验优化超声辅助低共熔溶剂提取CPC的提... 本研究旨在优化超声辅助低共熔溶剂对欧李原花青素(Cerasus humilis proanthocyanidin,CPC)的提取工艺,并与传统70%乙醇提取法进行比较,重点评估纯化物的结构组成和生物活性。用单因素结合响应面试验优化超声辅助低共熔溶剂提取CPC的提取工艺,纯化后测定平均聚合度,用傅里叶红外光谱和高效液相串联质谱(UPLC-OE-MS/MS)分析CPC官能团和组成定性,探究温度、光照、金属离子和pH对CPC稳定性的影响,借助DPPH、ABTS+自由基清除试验和FRAP法评估CPC抗氧化能力,并通过α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制试验考察CPC体外降糖活性。结果表明,筛选氯化胆碱-1,2丙二醇(摩尔比2:1)作为溶剂,在40%(V/V)含水量、1:20(g/mL)料液比、49℃超声温度和49 min提取时间下,CPC的得率达到21.11%±0.10%,是70%乙醇提取法的1.5倍。DES提取的CPC纯化后纯度为87.41%±2.54%,平均聚合度为3.09±0.02。CPC以原花青定为主要结构单元,以低聚原花青素为主要成分。CPC在20℃避光条件下10 h后保留率超过85%,但在高温、碱性和光照条件下稳定性显著降低,金属离子Fe3+、Fe2+和Cu2+对其破坏较大。此外,CPC展示出较强的抗氧化性和体外降血糖活性。综上,超声辅助低共熔溶剂提取法不仅显著提高了CPC的提取得率和纯度,还显著提高其生物活性,为欧李功能性活性物质的绿色提取和应用提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 欧李原花青素 低共熔溶剂 高效液相串联质谱(UPLC-OE-MS/MS) 稳定性 抗氧化 降血糖
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欧李原花青素通过PI3K-Akt-GSK-3β信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗
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作者 刘欣慧 赵悦 +5 位作者 褚天旭 邹蓉 高哲 赵文 刘严聪 孙亚赛 《食品工业科技》 北大核心 2025年第8期382-390,共9页
目的:基于网络药理学推测欧李原花青素(Cerasus humilis Proanthocyanidin,CPC)调控肝胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的潜在靶点和信号通路,运用人肝HepG2细胞构建胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型验证并讨论。方法:首先通过TCMSP、Swiss T... 目的:基于网络药理学推测欧李原花青素(Cerasus humilis Proanthocyanidin,CPC)调控肝胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的潜在靶点和信号通路,运用人肝HepG2细胞构建胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型验证并讨论。方法:首先通过TCMSP、Swiss Target Prediction等数据库筛选CPC靶点,OMIM、GeneCards等数据库获取IR关键控制点,借助Venny平台获取交集;其次用Cytoscape、STRING和生信平台对交集靶点进行拓扑分析、基因本体(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析;最后胰岛素诱导HepG2细胞建立IR-HepG2模型,考察CPC干预后细胞葡萄糖消耗量和摄取量、糖原合成以及糖酵解相关酶的活性,用抑制剂从蛋白水平确证CPC具体调控信号通路。结果:网络药理学分析筛选出AKT1、GSK-3β等66个关键靶点。主要富集在调节激酶活性、蛋白质磷酸化等GO条目,PI3K-Akt等KEGG信号通路。细胞实验结果显示,高剂量CPC(High Dosage CPC,H-CPC)增加36.02%细胞葡萄糖消耗量、22.03%葡萄糖摄取量和27.99%糖原含量,提高18.89%糖酵解酶己糖激酶(Hexokinase,HK)和26.89%丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase,PK)活性并降低8.77%糖异生酶葡萄糖-6-磷酸酶(Glucose-6-Phosphatase,G6Pase)含量,上调p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达(87.60%、64.14%和68.31%)。此外,PI3K抑制剂LY294002显著削弱CPC通过PI3K-Akt-GSK-3β调控HepG2细胞的葡萄糖消耗(29.09%)和糖原合成(6.07%)。结论:本研究证实CPC主要通过PI3K-Akt-GSK-3β信号通路改善肝脏IR,调节糖代谢紊乱,为欧李高值化产品开发提供理论基础。 展开更多
关键词 欧李原花青素 胰岛素抵抗 网络药理学 HEPG2细胞 PI3K-Akt-GSK-3β信号通路
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