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环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鳗利斯顿氏菌的研究
被引量：
8
1
作者
董培培
李长红
+4 位作者
丁文超
陈炯
史雨红
黎昊雁
李明云
《水产科学》
CAS
北大核心
2011年第2期63-68,共6页
采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD),建立一种鳗利斯顿氏菌快速检测方法。针对鳗利斯顿氏菌金属蛋白酶基因设计一套特异性引物及异硫氰酸荧光素(Flu...
采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD),建立一种鳗利斯顿氏菌快速检测方法。针对鳗利斯顿氏菌金属蛋白酶基因设计一套特异性引物及异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针,结合生物素标记的环介导等温扩增技术扩增反应和横向流动试纸条技术对鳗利斯顿氏菌进行检测;比较LAMP-AGE、LAMP-LFD和PCR-AGE的灵敏度;选取4株鳗利斯顿氏菌和6株非鳗利斯顿氏菌验证LAMP-LFD特异性。试验结果表明,应用LAMP-LFD,能在30 min内完成鳗利斯顿氏菌的检测;LAMP-LFD检测的灵敏度为7.7 cfu/ml,LAMP-AGE和PCR-AGE检测的灵敏度均为77 cfu/ml;4株鳗利斯顿氏菌均呈阳性反应,其他6株非鳗利斯顿氏菌均为阴性。应用LAMP-LFD检测鳗利斯顿氏菌特异性强、灵敏度高、并且操作安全、简便、快捷。
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关键词
鳗利斯顿氏菌
empA基因
环介导等温扩增
技术
横向流动试纸条技术
检测
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职称材料
猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用
被引量：
19
2
作者
朱俊灵
叶佐东
+2 位作者
邓洁汝
勾红潮
陈金顶
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期1-7,共7页
【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classica...
【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RTLAMP-LFD检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。
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关键词
猪瘟病毒
NS5B基因
环介导等温扩增
技术
横向流动试纸条技术
病毒检测
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职称材料
题名
环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鳗利斯顿氏菌的研究
被引量：
8
1
作者
董培培
李长红
丁文超
陈炯
史雨红
黎昊雁
李明云
机构
宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室
浙江省出入境检验检疫局
出处
《水产科学》
CAS
北大核心
2011年第2期63-68,共6页
基金
浙江省科技厅重点项目(2008C22049
2008R40G2070059)
长江学者和创新团队发展计划项目(IRT0734)
文摘
采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD),建立一种鳗利斯顿氏菌快速检测方法。针对鳗利斯顿氏菌金属蛋白酶基因设计一套特异性引物及异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针,结合生物素标记的环介导等温扩增技术扩增反应和横向流动试纸条技术对鳗利斯顿氏菌进行检测;比较LAMP-AGE、LAMP-LFD和PCR-AGE的灵敏度;选取4株鳗利斯顿氏菌和6株非鳗利斯顿氏菌验证LAMP-LFD特异性。试验结果表明,应用LAMP-LFD,能在30 min内完成鳗利斯顿氏菌的检测;LAMP-LFD检测的灵敏度为7.7 cfu/ml,LAMP-AGE和PCR-AGE检测的灵敏度均为77 cfu/ml;4株鳗利斯顿氏菌均呈阳性反应,其他6株非鳗利斯顿氏菌均为阴性。应用LAMP-LFD检测鳗利斯顿氏菌特异性强、灵敏度高、并且操作安全、简便、快捷。
关键词
鳗利斯顿氏菌
empA基因
环介导等温扩增
技术
横向流动试纸条技术
检测
Keywords
Listonella anguillarum
empA gene
LAMP
LFD
detection
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用
被引量：
19
2
作者
朱俊灵
叶佐东
邓洁汝
勾红潮
陈金顶
机构
华南农业大学兽医学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期1-7,共7页
基金
国家自然科学基金(U1405216
31172321和31472200)
广东省高等教育科技创新特殊项目(2012CXZD0013)
文摘
【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RTLAMP-LFD检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。
关键词
猪瘟病毒
NS5B基因
环介导等温扩增
技术
横向流动试纸条技术
病毒检测
Keywords
classical swine fever virus
NS5B gene
LAMP
LFD
virus detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鳗利斯顿氏菌的研究
董培培
李长红
丁文超
陈炯
史雨红
黎昊雁
李明云
《水产科学》
CAS
北大核心
2011
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用
朱俊灵
叶佐东
邓洁汝
勾红潮
陈金顶
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
19
在线阅读
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职称材料
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