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新疆野苹果基因组提取优化及模板浓度对ISSR-PCR影响: 1; 作者张云秀杨美玲 +4 位作者于玮玮李芳刘彬龙鸿阎国荣《天津农学院学报》 CAS 2017年第1期15-18,共4页; 以新疆野苹果干燥叶片为材料,比较分析了CTAB法和4种改良CTAB法提取基因组DNA效果,及ISSR-PCR扩增所需最佳模板浓度。结果表明:5种方法提取的DNA在纯度和量上有很大差别,研磨时加入PVP,可有效去除多酚物质;第一次提取上清液中加入1/10体... 展开更多; 关键词新疆野苹果 DNA提取模板浓度优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测被引量：23: 2; 作者王明旭朱水芳 +2 位作者罗宽周李华赵文军《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期82-85,共4页; 以松材线虫rDNA -ITS2为靶区 ,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明 ,探针检测松材线虫和拟松材线虫时 ,前者产生明显的荧光信号 ,后者无荧光信号 ,表明探针具有高度的特异性 ;探... 展开更多; 关键词 TAQMAN探针 RDNA-ITS2 实时荧光PCR检测方法荧光信号拟松材线虫 DNA测序检测结果模板浓度特异性; 在线阅读下载PDF 职称材料

影响小麦RAPD稳定性的试验技术研究被引量：10: 3; 作者安德荣程继红 +1 位作者成卓敏慕小倩《麦类作物学报》 CAS CSCD 2001年第1期14-17,共4页; 随着 PCR和 RAPD技术在生物学领域的广泛应用 ,人们在实验中遇到的问题也越来越多 ,其中RAPD的可重复性差是最主要的一个问题 ,也是该技术最难克服的缺点。作者在利用 RAPD技术标记进行小麦的抗病毒基因研究中 ,对影响扩增结果的模板、... 展开更多; 关键词 RAPD PCR 小麦可重复性模板浓度 DNTP浓度引; 在线阅读下载PDF 职称材料

PCR构建融合基因方法的建立被引量：5: 4; 作者陈国梁白兴俊 +2 位作者赵蓉雷鸿亮陈宗礼《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期209-213,共5页; 以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法... 展开更多; 关键词融合基因一步PCR法模板浓度引物浓度; 在线阅读下载PDF 职称材料

小麦雄性不育材料RAPD扩增体系研究被引量：6: 5; 作者马翎健曹丽华 +3 位作者周济铭宋喜悦胡银岗何蓓如《西北农业学报》 CAS CSCD 2003年第4期60-63,共4页; 以光敏雄性不育系A31及其恢复系1376为材料,使用美国MGREACHE公司生产的PTC-200型PCR,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、Mg2+、dNTPs、引物和TapDNA聚合酶的适宜浓度和最佳的循环次数,实验结果表明在25μL反应体系中使... 展开更多; 关键词小麦雄性不育材料 RAPD扩增体系 DNA模板浓度镁离子 dNTPs浓度引物浓度 TAQDNA聚合酶循环次数; 在线阅读下载PDF 职称材料

七筋菇基因组DNA提取方法的比较研究: 6; 作者王祎玲潘豪杰 +1 位作者沈张波赵桂仿《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期617-620,共4页; 目的对七筋菇基因组DNA提取和ISSR-PCR扩增模板浓度进行优化。方法以常规的CTAB法为基础,对七筋菇基因组DNA提取进行了优化:提取液中加入PVP(6%(w/v)),β-巯基乙醇的浓度提高至5%(w/v);第一次抽提后,重新加入提取液及抗坏血酸(20%(w/v))... 展开更多; 关键词七筋菇 DNA提取模板浓度; 在线阅读下载PDF 职称材料

miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 7; 作者刘笙腩颜润川 +3 位作者李玲玲张雅妹陈树林赵善廷《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第11期11-15,共5页; 为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,采用茎环结构法设计了反转录引物,并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定,最后通过实时荧光定量PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确... 展开更多; 关键词实时荧光定量PCR miRNA-34c 颈环退火温度模板浓度; 在线阅读下载PDF 职称材料

棉花AFLP技术体系的摸索与建立被引量：33: 8; 作者赵宏王省芬 +1 位作者张桂寅马峙英《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-4,共4页; 对影响棉花AFLP技术体系的多种因素作了探讨 ,得到了一种适于棉花AFLP银染技术的优化体系。该体系中各优化因素为 :①模板DNA浓度为 15 0ng·μL-1;②酶切体系中 ,MseI和EcoRI各加入 3units ,使用NEBbuffer2 ,反应时间为 2h ;③连... 展开更多; 关键词棉花模板DNA浓度酶切体系连接时间 AFLP技术体系; 在线阅读下载PDF 职称材料

DNA分析与扩增: 9; 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第6期36-40,共5页; 关键词 DNA分析载体转化乳球菌基因组文库定序凝胶电泳人基因组模板浓度核糖体结合位点聚合酶链反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新疆野苹果基因组提取优化及模板浓度对ISSR-PCR影响: 1; 作者张云秀杨美玲于玮玮李芳刘彬龙鸿阎国荣; 机构天津农学院园艺园林学院南开大学生命科学学院; 出处《天津农学院学报》 CAS 2017年第1期15-18,共4页; 基金新疆维吾尔自治区财政林业科技专项项目"新疆野苹果种质资源收集与评价"(无编号); 文摘以新疆野苹果干燥叶片为材料,比较分析了CTAB法和4种改良CTAB法提取基因组DNA效果,及ISSR-PCR扩增所需最佳模板浓度。结果表明:5种方法提取的DNA在纯度和量上有很大差别,研磨时加入PVP,可有效去除多酚物质;第一次提取上清液中加入1/10体积CTAB裂解液(0.7 mol/L Na Cl、10%CTAB),可以有效去除多糖;异丙醇沉淀时加入1/9体积的乙酸钠,可加速得到白色沉淀。新疆野苹果ISSR扩增体系研究中,发现DNA模板浓度处于400~1 000 ng/μL时,ISSR-PCR扩增结果最佳。DNA提取优化及模板浓度优化为后续的分子生物学研究提供理论依据。; 关键词新疆野苹果 DNA提取模板浓度优化; Keywords Malus sieversii DNA extraction template concentration optimization; 分类号 Q946-33 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测被引量：23: 2; 作者王明旭朱水芳罗宽周李华赵文军; 机构湖南农业大学生物安全科技学院中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所; 出处《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期82-85,共4页; 基金国家林业局 2 0 0 3年松材线虫病工程治理实用技术短期研究项目; 文摘以松材线虫rDNA -ITS2为靶区 ,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明 ,探针检测松材线虫和拟松材线虫时 ,前者产生明显的荧光信号 ,后者无荧光信号 ,表明探针具有高度的特异性 ;探针检测到最低模板浓度为 1pg·μL- 1 。; 关键词 TAQMAN探针 RDNA-ITS2 实时荧光PCR检测方法荧光信号拟松材线虫 DNA测序检测结果模板浓度特异性; Keywords rDNA-ITS2 TaqMan probe Bursaphelenchus xylophilus detection; 分类号 S476.3 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名影响小麦RAPD稳定性的试验技术研究被引量：10: 3; 作者安德荣程继红成卓敏慕小倩; 机构西北农林科技大学中国农科院植物保护研究所; 出处《麦类作物学报》 CAS CSCD 2001年第1期14-17,共4页; 基金中国-欧共体合作研究项目; 文摘随着 PCR和 RAPD技术在生物学领域的广泛应用 ,人们在实验中遇到的问题也越来越多 ,其中RAPD的可重复性差是最主要的一个问题 ,也是该技术最难克服的缺点。作者在利用 RAPD技术标记进行小麦的抗病毒基因研究中 ,对影响扩增结果的模板、底物、引物和扩增程序等进行了实验探索 ,结果表明 :模板的浓度、d NTP浓度、引物浓度及反应程序均对 RAPD扩增结果有明显影响。; 关键词 RAPD PCR 小麦可重复性模板浓度 DNTP浓度引; Keywords RAPD PCR Wheat; 分类号 S512.103.2 [农业科学—作物学] Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PCR构建融合基因方法的建立被引量：5: 4; 作者陈国梁白兴俊赵蓉雷鸿亮陈宗礼; 机构延安大学生命科学学院陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期209-213,共5页; 基金延安大学专项科研基金项目(YDK2008-17) 延安大学大学生科技创新训练项目(YD2009-208); 文摘以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法,并对融合基因构建时PCR产物(不回收)的使用量及一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度等条件进行优化。结果表明,以不回收的PCR产物为模板构建融合基因时PCR产物(不回收)的使用量在10-20 ng范围内为佳;一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度在25-1 000 nmol/L为宜。; 关键词融合基因一步PCR法模板浓度引物浓度; Keywords Fusion gene One-step PCR Concentration of template Concentration of primer; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小麦雄性不育材料RAPD扩增体系研究被引量：6: 5; 作者马翎健曹丽华周济铭宋喜悦胡银岗何蓓如; 机构西北农林科技大学农学院西北农林科技大学植保学院杨凌职业技术学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 2003年第4期60-63,共4页; 基金国家"863"项目(2001AA241043) 陕西省自然科学基金(2001SM02)资助项目。; 文摘以光敏雄性不育系A31及其恢复系1376为材料,使用美国MGREACHE公司生产的PTC-200型PCR,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、Mg2+、dNTPs、引物和TapDNA聚合酶的适宜浓度和最佳的循环次数,实验结果表明在25μL反应体系中使用20～40ng的模板DNA,1.5～2.0mmol/L的Mg2+,0.3～0.4mmol/L的dNTPs,0.15～0.20μmol/L随机引物,1.0～1.5单位TaqDNA聚合酶;反应条件为94℃预变性5min,然后进行94℃45s,36°45s,72°90s,45个循环后,再在72℃延伸10min,小麦雄性不育材料RAPD扩增效果较好。; 关键词小麦雄性不育材料 RAPD扩增体系 DNA模板浓度镁离子 dNTPs浓度引物浓度 TAQDNA聚合酶循环次数; Keywords Wheat Male-sterile RAPD Affecting factors; 分类号 S512.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名七筋菇基因组DNA提取方法的比较研究: 6; 作者王祎玲潘豪杰沈张波赵桂仿; 机构西北大学生命科学学院; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期617-620,共4页; 基金教育部博士点基金资助项目(20040697010); 文摘目的对七筋菇基因组DNA提取和ISSR-PCR扩增模板浓度进行优化。方法以常规的CTAB法为基础,对七筋菇基因组DNA提取进行了优化:提取液中加入PVP(6%(w/v)),β-巯基乙醇的浓度提高至5%(w/v);第一次抽提后,重新加入提取液及抗坏血酸(20%(w/v)),65℃水浴30 min。结果所提样品DNA,A260/280,A260/230的平均光吸收值分别为1.78,1.99,浓度为105 ng/μL左右,ISSR扩增带多且清晰明亮,稳定性及多态性高,表明DNA纯度高;对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明,所提DNA模板稀释2倍效果最好(浓度为50 ng/μL)。结论改良后的CTAB法适于提取七筋菇植物的基因组DNA。; 关键词七筋菇 DNA提取模板浓度; Keywords Clintonia Udensis Trautv.et Mey. DNA extraction template concentration; 分类号 Q949.718.23 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 7; 作者刘笙腩颜润川李玲玲张雅妹陈树林赵善廷; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第11期11-15,共5页; 基金西北农林科技大学人才引进专项基金(Z111021101) 国家高技术研究发展计划(863计划)(2011AA10A208); 文摘为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,采用茎环结构法设计了反转录引物,并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定,最后通过实时荧光定量PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,其中miR-34c最佳退火延伸温度为62.4℃及每个实时定量反应体系中cDNA对应的RNA量最适浓度为50ng/μL,并得到重复性高、特异性强的检测结果。该技术体系的建立不仅为检测miR-34c提供了精准便捷的方法,而且可为设计检测其他miRNA提供技术支持。; 关键词实时荧光定量PCR miRNA-34c 颈环退火温度模板浓度; Keywords real-time qPCR miRNA-34c stem-loop annealing temperature template concentration; 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名棉花AFLP技术体系的摸索与建立被引量：33: 8; 作者赵宏王省芬张桂寅马峙英; 机构河北农业大学农学院; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-4,共4页; 基金河北省自然科学基金 (30 116 7) 河北农业大学重点科研基金 (9816计划 )资助项目; 文摘对影响棉花AFLP技术体系的多种因素作了探讨 ,得到了一种适于棉花AFLP银染技术的优化体系。该体系中各优化因素为 :①模板DNA浓度为 15 0ng·μL-1;②酶切体系中 ,MseI和EcoRI各加入 3units ,使用NEBbuffer2 ,反应时间为 2h ;③连接最适反应时间为 10h ;④连接产物最适稀释倍数为 10倍 ;⑤预扩增产物最适稀释倍数为10倍。; 关键词棉花模板DNA浓度酶切体系连接时间 AFLP技术体系; Keywords cotton AFLP affecting factors; 分类号 S562 [农业科学—作物学] S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DNA分析与扩增: 9; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第6期36-40,共5页; 关键词 DNA分析载体转化乳球菌基因组文库定序凝胶电泳人基因组模板浓度核糖体结合位点聚合酶链反应; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新疆野苹果基因组提取优化及模板浓度对ISSR-PCR影响	张云秀杨美玲于玮玮李芳刘彬龙鸿阎国荣	《天津农学院学报》 CAS	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测	王明旭朱水芳罗宽周李华赵文军	《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	23	在线阅读下载PDF 职称材料
3	影响小麦RAPD稳定性的试验技术研究	安德荣程继红成卓敏慕小倩	《麦类作物学报》 CAS CSCD	2001	10	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PCR构建融合基因方法的建立	陈国梁白兴俊赵蓉雷鸿亮陈宗礼	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小麦雄性不育材料RAPD扩增体系研究	马翎健曹丽华周济铭宋喜悦胡银岗何蓓如	《西北农业学报》 CAS CSCD	2003	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	七筋菇基因组DNA提取方法的比较研究	王祎玲潘豪杰沈张波赵桂仿	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立	刘笙腩颜润川李玲玲张雅妹陈树林赵善廷	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	棉花AFLP技术体系的摸索与建立	赵宏王省芬张桂寅马峙英	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	33	在线阅读下载PDF 职称材料
9	DNA分析与扩增		《生物技术通报》 CAS CSCD	1992	0	在线阅读下载PDF 职称材料