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樟树干叶DNA提取方法的研究
被引量:
21
1
作者
张国防
陈存及
邢建宏
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期111-114,共4页
利用硅胶干燥的樟树幼叶为材料,用改良的CTAB法进行DNA提取实验,并以樟树新鲜嫩叶为对比。结果表明,加入质量分数为3%可溶性PVP粉与材料充分研磨,在提取缓冲液中加入体积分数为2%的β-巯基乙醇,能有效地去除材料中的多酚类物质...
利用硅胶干燥的樟树幼叶为材料,用改良的CTAB法进行DNA提取实验,并以樟树新鲜嫩叶为对比。结果表明,加入质量分数为3%可溶性PVP粉与材料充分研磨,在提取缓冲液中加入体积分数为2%的β-巯基乙醇,能有效地去除材料中的多酚类物质;用氯仿/异戊醇(24:1)提取裂解液2次所获得的上清,加入1/20体积5mol/L的NaCl,并用无水乙醇沉淀DNA,可以有效地去除多糖的干扰,所提取的DNA产率和纯度均较高。尽管干叶提取的DNA的平均产率(373ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.54—1.92)比鲜叶提取的DNA的平均产率(467ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.6—1.9)略低,但两者的RAPD—PCR扩增的条带都清晰、稳定、明亮,完整性好。
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关键词
樟树干叶片
DNA提取
方法
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职称材料
题名
樟树干叶DNA提取方法的研究
被引量:
21
1
作者
张国防
陈存及
邢建宏
机构
福建农林大学林学院
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期111-114,共4页
基金
福建省林业厅重大种苗攻关资助项目(200306)
文摘
利用硅胶干燥的樟树幼叶为材料,用改良的CTAB法进行DNA提取实验,并以樟树新鲜嫩叶为对比。结果表明,加入质量分数为3%可溶性PVP粉与材料充分研磨,在提取缓冲液中加入体积分数为2%的β-巯基乙醇,能有效地去除材料中的多酚类物质;用氯仿/异戊醇(24:1)提取裂解液2次所获得的上清,加入1/20体积5mol/L的NaCl,并用无水乙醇沉淀DNA,可以有效地去除多糖的干扰,所提取的DNA产率和纯度均较高。尽管干叶提取的DNA的平均产率(373ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.54—1.92)比鲜叶提取的DNA的平均产率(467ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.6—1.9)略低,但两者的RAPD—PCR扩增的条带都清晰、稳定、明亮,完整性好。
关键词
樟树干叶片
DNA提取
方法
Keywords
Cinnamomum camphora
DNA extraction
method
分类号
Q813.4 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
樟树干叶DNA提取方法的研究
张国防
陈存及
邢建宏
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
21
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