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樟树干叶DNA提取方法的研究 被引量:21
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作者 张国防 陈存及 邢建宏 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期111-114,共4页
利用硅胶干燥的樟树幼叶为材料,用改良的CTAB法进行DNA提取实验,并以樟树新鲜嫩叶为对比。结果表明,加入质量分数为3%可溶性PVP粉与材料充分研磨,在提取缓冲液中加入体积分数为2%的β-巯基乙醇,能有效地去除材料中的多酚类物质... 利用硅胶干燥的樟树幼叶为材料,用改良的CTAB法进行DNA提取实验,并以樟树新鲜嫩叶为对比。结果表明,加入质量分数为3%可溶性PVP粉与材料充分研磨,在提取缓冲液中加入体积分数为2%的β-巯基乙醇,能有效地去除材料中的多酚类物质;用氯仿/异戊醇(24:1)提取裂解液2次所获得的上清,加入1/20体积5mol/L的NaCl,并用无水乙醇沉淀DNA,可以有效地去除多糖的干扰,所提取的DNA产率和纯度均较高。尽管干叶提取的DNA的平均产率(373ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.54—1.92)比鲜叶提取的DNA的平均产率(467ug/g)和纯度(A260/A280比值为1.6—1.9)略低,但两者的RAPD—PCR扩增的条带都清晰、稳定、明亮,完整性好。 展开更多
关键词 樟树干叶片 DNA提取 方法
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