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Anti-SAD基因植物表达载体的构建
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作者 黄锐之 刘智宏 +2 位作者 郎春秀 胡张华 陈锦清 《浙江农业学报》 CSCD 2001年第5期272-275,共4页
硬脂酰 ACP脱饱和酶 (SAD ;EC 1.14.99.)是植物中广泛存在的酶系 ,在脂肪酸合成途径中脱饱和的起始阶段中起催化作用 ,在脂肪酸饱和度调控中起着关键作用。本研究通过对已克隆的硬脂酰 ACP脱饱和酶基因分析 ,合成了SAD基因保守区域基... 硬脂酰 ACP脱饱和酶 (SAD ;EC 1.14.99.)是植物中广泛存在的酶系 ,在脂肪酸合成途径中脱饱和的起始阶段中起催化作用 ,在脂肪酸饱和度调控中起着关键作用。本研究通过对已克隆的硬脂酰 ACP脱饱和酶基因分析 ,合成了SAD基因保守区域基因片段 ,并将该片段插入载体pIG12 1的SacI位点 ,构建了Anti SAD植物表达双元载体 ,为进一步开展植物脂肪酸成份基因工程调控研究提供了基础。 展开更多
关键词 硬脂酰-ACP脱饱和酶 植物表达双元载体 反义基因 重组质粒 Anti-SAD基因 植物油料 脂肪酸成分
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几种基于pCAMBIA系列多用途新型植物表达载体的改建及优化 被引量:3
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作者 李敬涛 孙新华 +4 位作者 余刚 贾承国 杜茜 李启云 潘洪玉 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期371-375,共5页
以pCHF3,pCAMBIA1301,pCAMBIA3300和pCAMBIA3301载体为骨架,构建CaMV 35S和rd29A启动子驱动多克隆位点(MCS:SacⅠ,KpnⅠ,SmaⅠ,BamHⅠ,XbaⅠ,SalⅠ,PstⅠ)的通用型重组植物双元表达载体,得到两种启动子驱动下MCS与eGFP融合的应用型亚细... 以pCHF3,pCAMBIA1301,pCAMBIA3300和pCAMBIA3301载体为骨架,构建CaMV 35S和rd29A启动子驱动多克隆位点(MCS:SacⅠ,KpnⅠ,SmaⅠ,BamHⅠ,XbaⅠ,SalⅠ,PstⅠ)的通用型重组植物双元表达载体,得到两种启动子驱动下MCS与eGFP融合的应用型亚细胞定位双元表达载体,并建立了对大量候选基因进行高通量筛选和功能验证的通用型表达载体系统. 展开更多
关键词 植物双元表达载体 CaMV 35S RD29A 多克隆位点 增强型绿色荧光蛋白
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不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因(GLDH)cDNA片段克隆与RNAi表达载体构建
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作者 高红亮 李英 +2 位作者 宋玉萍 马成英 侯喜林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期20-24,共5页
根据植物中hpRNA(hairpin RNA)原理,选择GLDH基因cDNA序列同源性较低区域设计1对携带双酶切位点的特异引物,以不结球白菜‘苏州青’叶片为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆了GLDH基因片段。构建中间克隆载体,经过3次亚克隆将测序正确的... 根据植物中hpRNA(hairpin RNA)原理,选择GLDH基因cDNA序列同源性较低区域设计1对携带双酶切位点的特异引物,以不结球白菜‘苏州青’叶片为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆了GLDH基因片段。构建中间克隆载体,经过3次亚克隆将测序正确的GLDH基因片段分别以正向和反向两种形式插入到间隔基因YYT的两端,经鉴定已插入到植物表达载体中,成功地构建了干扰GLDH基因表达的RNAi植物双元表达载体pRNAi-GLDH,并将表达载体转化到农杆菌菌株LBA4404中,为深入研究GLDH基因功能提供有效的工具。 展开更多
关键词 不结球白菜 GLDH基因 RNAi植物双元表达载体
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虾青素合成相关酶基因Adketo果实特异表达载体的构建 被引量:1
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作者 陈新君 黄静 +2 位作者 李伟 钟克焱 高新征 《海南医学院学报》 CAS 2019年第2期90-93,共4页
目的:采用克隆的番茄E8启动子和夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adketo构建果实特异表达载体,为利用植物基因工程进行虾青素生产提供新途径。方法:采用RT-PCR的方法,从夏侧金盏花中克隆到虾青素合成相关酶基因Adketo,同时以番茄基因组DN... 目的:采用克隆的番茄E8启动子和夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adketo构建果实特异表达载体,为利用植物基因工程进行虾青素生产提供新途径。方法:采用RT-PCR的方法,从夏侧金盏花中克隆到虾青素合成相关酶基因Adketo,同时以番茄基因组DNA为模板PCR扩增果实特异性启动子E8,克隆进T载体,菌液PCR初步鉴定后测序,序列分析。从T载体切下的E8启动子和Adketo基因经回收后同时插入到植物双元表达载体pBI121上,获得重组载体,然后进行菌液PCR检测和酶切鉴定。结果:测序结果分析显示获得正确的E8和Adketo基因序列。重组质粒经菌液PCR检测及酶切鉴定均获得预期大小条带。结论:该实验成功构建了番茄果实特异性E8启动子驱动虾青素合成相关酶基因Adketo的植物表达载体。 展开更多
关键词 番茄E8启动子 植物双元表达载体 Adketo基因
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小麦MITE转座子对sHSP基因的表达调控研究 被引量:4
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作者 李静婷 王健胜 杨风岭 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第12期29-32,共4页
MITE(miniature inverted-repeat transposable elements)是一类特殊的DNA介导的转座子,经常插入基因的编码区、内含子、启动子、非翻译区(UTR)而与基因紧密相关。探讨插入小麦16.9 ku sHSP基因(sHSP16.9)3'-UTR中MITE对基因表达调... MITE(miniature inverted-repeat transposable elements)是一类特殊的DNA介导的转座子,经常插入基因的编码区、内含子、启动子、非翻译区(UTR)而与基因紧密相关。探讨插入小麦16.9 ku sHSP基因(sHSP16.9)3'-UTR中MITE对基因表达调控的影响,实时定量结果显示:在高温、低温处理时,具有MITE插入的基因型中sHSP16.9基因转录水平较无MITE插入的基因型显著提高;构建2种不同的植物表达载体p CAMBIA Super-1300+sHSP16.9、p CAMBIA Super-1300+sHSP16.9+MITE转化拟南芥,半定量结果显示,sHSP16.9+MITE超表达的转基因拟南芥中sHSP16.9基因表达量较sHSP16.9超表达的转基因拟南芥中显著提高,推测sHSP16.9基因3'-UTR中MITE插入增强该基因的转录水平。 展开更多
关键词 MITE转座子 sHSP基因 基因表达 基因调控 小麦 植物双元表达载体 构建
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