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CCR7基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受
被引量：
2
1
作者
周琨
高晓唯
+4 位作者
蔡岩
李文静
胡裕坤
田丽丽
付燕
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期902-908,共7页
背景 角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的 研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC...
背景 角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的 研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDCs）对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的影响,并探讨其可能的机制.方法 取1只雄性Wistar供体大鼠股骨骨髓分离和培养骨髓源imDCs,用携带大鼠CCR7基因的重组Ad转染imDCs,收集1＆#215;107个imDCs重悬于500μl含体积分数1％胎牛血清的PBS中.将60只受体SD大鼠以角膜碱烧伤法建立高危角膜移植模型,并用30只Wistar大鼠角膜作为供体进行同种异体角膜移植.采用随机数字表法将SD大鼠分为PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组,每组15只,按照分组不同分别于术前7d和术后3d经尾静脉注射相应溶液.术后每日裂隙灯显微镜下观察角膜植片存活情况,术后14d每组任意处死6只大鼠,取角膜植片行常规组织病理学检查,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测辅助性T细胞1（Th1）型细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的mRNA表达水平.结果 PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组和imDCs＋Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间分别为（10.44±1.88）、（16.00±2.18）、（15.11±2.03）和（23.67±2.83）d,4个组间总体比较差异有统计学意义（F=53.005,P=0.000）;与PBS组比较,未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间均明显延长,差异均有统计学意义（t=5.220、4.385、12.423,均P=0.000）;imDCs＋Ad-CCR7组植片的平均存活时间较未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组均明显延长,差异均有统计学意义（t=7.204、8.039,均P=0.000）.RT-PCR结果显示,与PBS组相比,未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组、imDCs＋Ad-CCR7组大鼠IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量均明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量均明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组比较,imDCs＋Ad-CCR7组IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量明显升高,差异均有统计学意义（均P=0.000）.结论 尾静脉注射CCR7基因修饰的imDCs可以明显延长大鼠高危角膜移植术后角膜植片的存活时间,抑制角膜移植免疫排斥反应,可能与CCR7基因修饰的imDCs诱导的Th1/Th2功能偏移有关.
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关键词
角膜移
植
植片存活/免疫
免疫
耐受
辅助T淋巴细胞
/免疫
树突状细胞
/免疫
受体
趋化因子受体7/代谢
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职称材料
题名
CCR7基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受
被引量：
2
1
作者
周琨
高晓唯
蔡岩
李文静
胡裕坤
田丽丽
付燕
机构
郑州市第二人民医院眼科
解放军第四七四医院全军眼科中心
保定市第一中心医院东院眼科
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期902-908,共7页
基金
全军医学科研“十二五”课题计划项目（CWS11J239）
文摘
背景 角膜移植术后免疫排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是高危角膜移植.延长高危角膜移植术植片的存活时间是目前亟待解决的问题.目的 研究趋化因子受体7 （CCR7）基因重组腺病毒（Ad）体外转染供体骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDCs）对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的影响,并探讨其可能的机制.方法 取1只雄性Wistar供体大鼠股骨骨髓分离和培养骨髓源imDCs,用携带大鼠CCR7基因的重组Ad转染imDCs,收集1＆#215;107个imDCs重悬于500μl含体积分数1％胎牛血清的PBS中.将60只受体SD大鼠以角膜碱烧伤法建立高危角膜移植模型,并用30只Wistar大鼠角膜作为供体进行同种异体角膜移植.采用随机数字表法将SD大鼠分为PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组,每组15只,按照分组不同分别于术前7d和术后3d经尾静脉注射相应溶液.术后每日裂隙灯显微镜下观察角膜植片存活情况,术后14d每组任意处死6只大鼠,取角膜植片行常规组织病理学检查,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测辅助性T细胞1（Th1）型细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的mRNA表达水平.结果 PBS组、未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组和imDCs＋Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间分别为（10.44±1.88）、（16.00±2.18）、（15.11±2.03）和（23.67±2.83）d,4个组间总体比较差异有统计学意义（F=53.005,P=0.000）;与PBS组比较,未修饰imDCs组、imDCs＋ Ad空载体组和imDCs＋ Ad-CCR7组角膜植片的平均存活时间均明显延长,差异均有统计学意义（t=5.220、4.385、12.423,均P=0.000）;imDCs＋Ad-CCR7组植片的平均存活时间较未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组均明显延长,差异均有统计学意义（t=7.204、8.039,均P=0.000）.RT-PCR结果显示,与PBS组相比,未修饰imDCs组、imDCs＋Ad空载体组、imDCs＋Ad-CCR7组大鼠IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量均明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量均明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与未修饰imDCs组和imDCs＋Ad空载体组比较,imDCs＋Ad-CCR7组IFN-γ mRNA和IL-2 mRNA相对表达量明显降低,而IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量明显升高,差异均有统计学意义（均P=0.000）.结论 尾静脉注射CCR7基因修饰的imDCs可以明显延长大鼠高危角膜移植术后角膜植片的存活时间,抑制角膜移植免疫排斥反应,可能与CCR7基因修饰的imDCs诱导的Th1/Th2功能偏移有关.
关键词
角膜移
植
植片存活/免疫
免疫
耐受
辅助T淋巴细胞
/免疫
树突状细胞
/免疫
受体
趋化因子受体7/代谢
Keywords
Corneal transplantation
Graft survival/immunology
Immune tolerance
T-lymphocytes,helper/immunology
Dendritic cells/immunology
Receptors,Chemokine receptor 7/metabolism
分类号
R779.65 [医药卫生—眼科]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CCR7基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受
周琨
高晓唯
蔡岩
李文静
胡裕坤
田丽丽
付燕
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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