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系统代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌CP提高L-亮氨酸生产 被引量：1
1
作者 吴开水 刘韪玮 +1 位作者 马零 徐庆阳 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第7期48-57,共10页
L-亮氨酸是一种重要的支链氨基酸,在医药、食品、饲料、化妆品等多领域中具有重要价值。目前,工业上用于生产L-亮氨酸的菌株存在转化率低、副产物多、结晶后产率大幅下降等问题。为获得一株性能优越的L-亮氨酸生产菌株,该研究对L-亮氨... L-亮氨酸是一种重要的支链氨基酸,在医药、食品、饲料、化妆品等多领域中具有重要价值。目前,工业上用于生产L-亮氨酸的菌株存在转化率低、副产物多、结晶后产率大幅下降等问题。为获得一株性能优越的L-亮氨酸生产菌株,该研究对L-亮氨酸生产菌株谷氨酸棒状杆菌CP进行系统代谢工程改造。首先,敲除竞争途径并引入外源磷酸酮醇酶(由fxpk编码)加强前体物(丙酮酸和乙酰辅酶A)供应;其次,加强主代谢流(亮氨酸途径和支链氨基酸共同途径)提高L-亮氨酸产量;随后,加强胞内NADPH的供应;最后,敲除L-亮氨酸内转运蛋白BrnQ,最终获得的可高效生产L-亮氨酸的工程菌株CP06-1在5 L生物反应器中经50 h发酵后L-亮氨酸产量达65.3 g/L,糖酸转化率25.1%。此外,为解决L-亮氨酸结晶后产生的泡沫影响菌体吸收营养和溶氧的问题,该研究采取了半连续发酵的方式在L-亮氨酸结晶前通过放液-补液来延长菌株产酸高峰期,最终5 L生物反应器发酵50 h共生产L-亮氨酸228.8 g,糖酸转化率达27.9%,较分批补料提高了11.2%。该研究为L-亮氨酸生产菌株的改造和应用提供了一定的指导价值。 展开更多
关键词 L-亮氨酸 系统代谢工程 谷氨酸棒状杆菌 乙酰辅酶A NADPH 半连续发酵
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1株羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及耐药性分析
2
作者 刘泽武 樊月圆 +6 位作者 袁嘉芮 格桑卓嘎 班旦 白卫兵 茶金龙 四朗玉珍 富国文 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1405-1415,共11页
【目的】确定云南宜良地区某养殖场疑似患伪结核病病羊的病原,并探究其耐药性及致病性,为该病的诊断和治疗提供理论依据。【方法】通过患病羊临床症状初步判断病因,无菌采集病料,分离纯化病原菌后对其形态特征、培养特性和生化特性进行... 【目的】确定云南宜良地区某养殖场疑似患伪结核病病羊的病原,并探究其耐药性及致病性,为该病的诊断和治疗提供理论依据。【方法】通过患病羊临床症状初步判断病因,无菌采集病料,分离纯化病原菌后对其形态特征、培养特性和生化特性进行鉴定;利用PCR扩增分离株16S rRNA基因序列并进行测序比对分析;通过药敏试验、耐药基因检测和小鼠致病性试验探究分离株的耐药性和致病性。【结果】分离株在血琼脂平板上生长状态良好,菌落呈黄白色、不透明样,在普通营养琼脂和普通营养肉汤内生长不良;革兰染色镜检结果显示,菌体为球杆状或棒状,为革兰阳性菌。生化鉴定结果显示,分离株的葡萄糖、尿素试验呈阳性,乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、西蒙氏枸橼酸盐、硫化氢、靛基质、硝酸盐还原试验、甲基红(MR)试验和VP试验均呈阴性。16S rRNA序列比对结果显示,分离株与NCBI数据库中的伪结核棒状杆菌16S rRNA基因序列相似性>99%,鉴定其为伪结核棒状杆菌。药敏试验结果显示,分离株对链霉素、庆大霉素、新霉素表现中介,对氨曲南、头孢他啶、多黏菌素表现耐药。耐药基因检测结果显示,该分离株携带耐药基因Sul2、Sul3、blaTEM及bla CTX-M。动物致病性试验结果显示,腹腔、皮下接种4.4×10^(8) CFU/mL分离菌后可引起小鼠死亡,死亡率达100%。皮下接种96 h后可见小鼠皮下出现脓肿,脓液中可分离出伪结核棒状杆菌。【结论】本试验成功分离鉴定出1株羊源伪结核棒状杆菌,明确了患病羊病原,该分离株对小鼠致病性较强。研究结果为伪结核棒状杆菌感染羊的诊断、流行病学调查以及治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 山羊 伪结核棒状杆菌 分离鉴定 耐药性
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伪结核棒状杆菌磷脂酶D蛋白的表达及间接ELISA方法的建立与应用
3
作者 白婕妤 孙婧 +5 位作者 黄宇璇 王聚涛 杜金鑫 夏利宁 张万江 李刚 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期826-831,共6页
为建立羊伪结核棒状杆菌(Cp)的快速检测方法,本研究经PCR从Cp模式株ATCC19410中扩增磷脂酶D(PLD)编码基因,将其克隆至pET-28a中构建重组表达质粒pET-28a-PLD,经测序鉴定正确的该质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后切胶纯化,... 为建立羊伪结核棒状杆菌(Cp)的快速检测方法,本研究经PCR从Cp模式株ATCC19410中扩增磷脂酶D(PLD)编码基因,将其克隆至pET-28a中构建重组表达质粒pET-28a-PLD,经测序鉴定正确的该质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后切胶纯化,采用SDS-PAGE检测重组PLD蛋白(rPLD)的表达及纯化效果,经western blot检测其反应原性。结果显示,在37 ku处出现目的条带,且纯化效果好,该蛋白具有较好的反应原性。以纯化的rPLD为包被抗原,采用方阵法优化间接ELISA各反应条件,结果显示最佳抗原包被浓度为每孔100 ng、待检血清最佳稀释倍数为1:50、血清孵育时间为0.5 h、最佳封闭液为2%明胶、封闭时间2 h、兔抗山羊IgG-HRP的最佳稀释倍数为1:20000、二抗孵育时间1 h、抗体阴阳性临界值为0.432,表明初步建立了检测Cp血清抗体的间接ELISA方法。利用该ELISA方法检测Cp、山羊痘病毒、羊支原体、结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、小反刍兽疫病毒、羊布鲁氏菌的阳性血清,结果显示,除Cp外其余病原的检测结果均为阴性,该方法特异性较强。将Cp阳性血清2倍倍比稀释后利用该ELISA方法检测,结果显示,该方法对阳性血清的检测限为稀释度1:640,该方法敏感性较高。利用5份Cp阳性血清和3份Cp阴性血清进行重复性试验,结果显示,该ELISA方法批内、批间重复性试验的最大变异系数分别为5.53%和7.79%,重复性较好。利用该ELISA方法和菌体凝集抑制试验对50份临床血清样品检测,结果显示,二者的阳性符合率为88.9%,阴性符合率为88.5%,总符合率为88.7%。进一步利用该ELISA方法对451份黑龙江省部分地区羊场的血清样品检测,结果显示,Cp抗体阳性率为51%(230/451),表明黑龙江省部分地区羊场导致羊干酪性淋巴结炎(CLA)的Cp感染率较高。本研究建立的间接ELISA方法为Cp血清抗体的检测提供了候选的技术手段,为Cp感染的早期检测和流行病学研究提供了有力技术支撑。 展开更多
关键词 结核棒状杆菌 磷脂酶D 间接ELISA 抗体检测
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伪结核棒状杆菌灭活苗对山羊的免疫效果评价
4
作者 邹安龙 吕红 +5 位作者 吴婵玉 李鑫灿 宋艳 钱虹宇 王芝英 周作勇 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2025年第1期104-111,共8页
伪结核棒状杆菌(Cp)是羊体表脓肿及干酪样淋巴结炎(CLA)的重要病原,接种疫苗是防控Cp感染致病最有效的手段之一。以Cp万州株(WZ)作为疫苗株,甲醛为灭活剂,ISA 201 VG为佐剂制备灭活苗,对山羊进行免疫,首免后28 d进行二免,二免后30 d以W... 伪结核棒状杆菌(Cp)是羊体表脓肿及干酪样淋巴结炎(CLA)的重要病原,接种疫苗是防控Cp感染致病最有效的手段之一。以Cp万州株(WZ)作为疫苗株,甲醛为灭活剂,ISA 201 VG为佐剂制备灭活苗,对山羊进行免疫,首免后28 d进行二免,二免后30 d以WZ株攻毒,连续观察65 d。通过检测免疫和攻毒山羊的增质量、体温、血常规、血清免疫球蛋白G(IgG)水平、淋巴结脓肿数量及载菌量等,综合评价Cp灭活苗的免疫保护效果。结果显示:与对照组相比,受免山羊血清IgG抗体在首免后第3、4周和二免后第2~4周均显著升高,且二免IgG抗体明显高于首免。攻毒发现,对照组山羊体温在攻毒后7 d内均高于免疫组,攻毒后1~8周内对照组山羊增质量均低于免疫组,且免疫组山羊脓肿数量及Cp数均明显少于对照组,提示该灭活苗免疫可缓解因Cp感染引起的山羊体质量下降及体温升高,减少Cp攻毒引起的脓肿数量和淋巴结Cp载菌量。综合表明:所制备Cp灭活苗可提高山羊的免疫水平,对该病原感染具有较好的保护作用。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 灭活苗 山羊 免疫效果
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山羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析
5
作者 林龙华 许秋 +7 位作者 马彩萍 柴霁芸 侯杰 孙宏飞 杜素素 范翠龙 祝瑶 张万江 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期23-30,共8页
为鉴定引起黑龙江省齐齐哈尔市某山羊养殖场山羊体表脓肿的病原,并分析其生物学特性,本实验无菌采集40份体表患有脓肿的山羊脓液进行细菌的分离鉴定、革兰氏染色;采用PCR扩增分离菌16S rRNA基因并测序,基于细菌16S rRNA基因序列构建分... 为鉴定引起黑龙江省齐齐哈尔市某山羊养殖场山羊体表脓肿的病原,并分析其生物学特性,本实验无菌采集40份体表患有脓肿的山羊脓液进行细菌的分离鉴定、革兰氏染色;采用PCR扩增分离菌16S rRNA基因并测序,基于细菌16S rRNA基因序列构建分离菌的系统进化树;通过微量肉汤稀释法分析细菌对7类代表性抗菌药的敏感性;通过Illumina PE 150对细菌全基因组测序,并利用ResFinder数据库预测细菌的相关耐药基因,利用VFDB数据库预测细菌的毒力基因;通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)对细菌分型鉴定;通过小鼠致病性试验分别对分离菌和ATCC 19410株的致病性进行评价。结果显示:分离菌在血琼脂平板上可形成狭窄的β溶血环,革兰氏染色可见蓝紫色、球杆状的细菌;16S rRNA基因的测序鉴定结果显示引起山羊体表脓肿的病原为伪结核棒状杆菌,经统计从40份病料样品中分离出10株伪结核棒状杆菌。16SrRNA系统进化树结果显示,分离菌和伪结核棒状杆菌聚为同一分支,与谷氨酸棒状杆菌、肾棒状杆菌等处于临近分支,表明分离菌为伪结核棒状杆菌。药敏试验结果显示,10株分离菌对所测试的6种抗菌药均敏感,1-1、24两株分离菌对庆大霉素敏感,其余8株分离菌对庆大霉素均耐药。耐药基因预测结果显示10株分离菌均未检测到耐药基因。毒力基因预测结果显示10株分离菌均检测到与黏附性、铁摄取与调节、毒素相关的毒力相关基因21个。PFGE将10株分离菌分为两种谱型,表明至少有两种谱型的伪结核棒状杆菌正流行于该羊场。小鼠致病性试验结果显示,将毒力最强的3-1菌株对小鼠进行腹腔感染后,最高剂量组死亡小鼠剖检可见肠道充血肿胀、肝脾肿大、边缘出血梗死;低剂量组死亡小鼠剖检可见腹腔脏器出现黄白色脓肿,其产生的病变与ATCC 19410标准株感染小鼠产生的病变一致,前两个高剂量3-1菌株感染小鼠组的存活率为0,两个低剂量3-1菌株感染小鼠的存活率均为100%。经计算3-1菌株对小鼠的LD50为8.5×105 cfu。本研究确定了引起该山羊养殖场山羊体表脓肿的病原为伪结核棒状杆菌,并对其进行生物学特性分析,为山羊场羊伪结核病的防治提供实验依据,为后续伪结核棒状杆菌的进一步研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 耐药基因 毒力基因 脉冲场凝胶电泳 致病性
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牛乳蛋白κ-酪蛋白在谷氨酸棒状杆菌中的表达及优化
6
作者 张雅楠 王雨露 +2 位作者 武小月 刘秀霞 白仲虎 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第3期12-20,共9页
牛奶的蛋白质主要以酪蛋白为主,κ-酪蛋白是酪蛋白的一种,约占牛脱脂乳中总酪蛋白含量的13%。κ-酪蛋白具有乳蛋白的营养作用,可应用于未来牛奶的全合成,同时它水解产生的肽类物质还具有抑制血液凝固及抗血栓形成的作用。谷氨酸棒状杆菌... 牛奶的蛋白质主要以酪蛋白为主,κ-酪蛋白是酪蛋白的一种,约占牛脱脂乳中总酪蛋白含量的13%。κ-酪蛋白具有乳蛋白的营养作用,可应用于未来牛奶的全合成,同时它水解产生的肽类物质还具有抑制血液凝固及抗血栓形成的作用。谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)作为一种安全生产菌株,是食用蛋白生产的优势细胞平台。该研究利用谷氨酸棒状杆菌作为受体菌株表达异源蛋白的优势实现κ-酪蛋白的外源表达。根据κ-酪蛋白的信号肽和前肽的分析设计并合成谷氨酸棒状杆菌密码子偏好性κ-酪蛋白基因,利用谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032菌株用于表达κ-酪蛋白,并对该蛋白N端促溶标签、表达元件信号肽、表达宿主等进行优化,同时对发酵条件进一步优化。结果表明,对κ-酪蛋白进行二级结构及无序性分析,预测结果显示κ-酪蛋白具有固定的无序区域。采用SDS-PAGE和Western blotting技术检测κ-酪蛋白的表达情况,结果表明κ-酪蛋白能在谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032菌株中成功表达,在其N端添加SUMO、FH8促溶标签能提高κ-酪蛋白可溶表达量,进行信号肽和宿主筛选能进一步提高蛋白产量。该研究在谷氨酸棒状杆菌中成功表达κ-酪蛋白,并通过优化手段进一步提高了产量,为未来牛奶全合成的实现奠定了基础。 展开更多
关键词 κ-酪蛋白 谷氨酸棒状杆菌 无序区域 表达元件优化 宿主优化 促溶标签
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牛源棒状杆菌的分离鉴定与耐药性分析
7
作者 陈婷婷 达举云 《畜牧兽医杂志》 2025年第5期84-88,共5页
为确定白银某牛场1例引起牛淋巴结脓肿的病原,无菌采集脓液样品对其进行细菌分离鉴定、形态学鉴定、生化试验及16s RNA测序比对,将分离得到的菌株进行药敏试验测定、动物致病性试验检测。结果表明,在病牛淋巴结脓液中分离到的菌株为棒... 为确定白银某牛场1例引起牛淋巴结脓肿的病原,无菌采集脓液样品对其进行细菌分离鉴定、形态学鉴定、生化试验及16s RNA测序比对,将分离得到的菌株进行药敏试验测定、动物致病性试验检测。结果表明,在病牛淋巴结脓液中分离到的菌株为棒状杆菌。以该菌株对小鼠进行攻毒试验,48 h内被攻毒的小鼠全部死亡,体现了较强的致病性;小鼠皮下接种分离菌,接种部位出现脓肿、破溃、黄白色脓液。药敏结果显示,分离菌对红霉素、卡那霉素、头孢唑啉等药物敏感,尚未发现该菌出现耐药性。研究结果对预防和治疗棒状杆菌感染牛可以提供参考。 展开更多
关键词 棒状杆菌 细菌分离鉴定 致病性 药敏试验
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福建省3例输入性白喉棒状杆菌感染病例流行病学和病原学分析
8
作者 李曲文 梁雪晨 +3 位作者 高亚东 翁顺太 高源 邵祝军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期590-594,598,共6页
目的对福建省发现的3例输入性白喉病例进行流行病学和病原学分析。方法对3例疑似皮肤白喉患者进行流行病学调查,采集患者皮肤破损的分泌物样品,进行白喉棒状杆菌分离培养。对纯培养的疑似白喉棒状杆菌进行生化鉴定和质谱分析,检测白喉... 目的对福建省发现的3例输入性白喉病例进行流行病学和病原学分析。方法对3例疑似皮肤白喉患者进行流行病学调查,采集患者皮肤破损的分泌物样品,进行白喉棒状杆菌分离培养。对纯培养的疑似白喉棒状杆菌进行生化鉴定和质谱分析,检测白喉棒状杆菌(Diphtheria toxin repressor,dtxR)、(Toxin A,toxA)、(Toxin B,toxB)等毒力相关基因,进行MLST序列分型。结果3例病例有典型的皮肤白喉临床表现,皮肤破损部位均分离到白喉棒状杆菌。2例病例分离到的2株白喉棒状杆菌毒力基因检测结果为dtxR(+)、toxA(-)、toxB(-),MLST型别均为ST-703;1例病例分离的白喉棒状杆菌菌株毒力基因检测结果为dtxR(+)、toxA(+)、toxB(+),MLST型别为ST-248。结论福建省存在白喉输入性风险,非毒原菌亦可引起皮肤白喉。 展开更多
关键词 白喉棒状杆菌 毒力基因 皮肤白喉
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羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析 被引量：5
9
作者 宋艳 袁永丰 +4 位作者 钱虹宇 李鑫灿 罗洪艳 王芝英 周作勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期680-687,共8页
为明确重庆和贵州部分羊场发生体表淋巴结脓肿病料中伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染情况及其生物学特征,对山羊体表脓肿样本进行Cp分离鉴定、致病性试验、药敏试验、毒力/耐药基因检测及系统进化分析。结果... 为明确重庆和贵州部分羊场发生体表淋巴结脓肿病料中伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染情况及其生物学特征,对山羊体表脓肿样本进行Cp分离鉴定、致病性试验、药敏试验、毒力/耐药基因检测及系统进化分析。结果:从40份样本中分离到23株Cp,分离率达57.5%。毒力基因检测显示,所有Cp分离菌均携带pld、FagA、FagB、OppB、OppD、OppF、SodC、SpaC、pknG、NanH、sigE和cp40基因。药敏试验显示,所分离Cp对头孢拉定、丁胺卡那和多西环素敏感率最高,达95.65%(22/23),其次为青霉素、氨苄西林、四环素、万古霉素和环丙沙星,敏感率为91.30%(21/23),但对呋喃唑酮100%耐药,对新霉素和卡那霉素耐药率为82.61%(19/23)。Cp分离菌中氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-IIa和广谱A类β内酰胺酶耐药基因bla TEM-116的检出率分别为0和4.35%。对所有Cp的fusA进行测序并获得GenBank登录号ON969140-ON969162,系统进化分析显示所分离的Cp均聚类到羊生物型(biotype ovis)。本研究证实Cp是引起重庆和贵州部分羊场发生体表淋巴结脓肿的主要病原,并明确其部分生物学特性,为防控该病原提供了参考资料。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 山羊 毒力基因 药物敏感性 系统进化分析
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香柠檬精油抗伪结核棒状杆菌作用及机制研究 被引量：2
10
作者 符雪珍 李鑫灿 +6 位作者 钱虹宇 吕红 吴婵玉 王晓涵 王小华 王芝英 周作勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1217-1227,共11页
伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染可影响家畜尤其是反刍动物羊的生产性能,本文旨在筛选对Cp有抑杀活性的植物精油并研究其作用机制,为Cp感染防控提供参考。通过纸片扩散法从4种植物精油中筛选出能高效抑杀Cp... 伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染可影响家畜尤其是反刍动物羊的生产性能,本文旨在筛选对Cp有抑杀活性的植物精油并研究其作用机制,为Cp感染防控提供参考。通过纸片扩散法从4种植物精油中筛选出能高效抑杀Cp的香柠檬精油(bergamot essential oil, BEO),采用刃天青指示剂微量肉汤稀释法测定BEO对Cp不同菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)。通过体外试验评价BEO对Cp感染J774A.1巨噬细胞的影响。通过测定脏器载菌量、脾抗菌肽基因表达量和存活率综合评价BEO对Cp感染昆明系小鼠的保护作用。采用扫描电镜观察BEO作用后Cp菌体形态变化,并检测BEO作用后Cp的DNA泄漏以及毒力基因表达情况,初步研究BEO抗Cp机制。结果显示:BEO具有较强的抗Cp作用,其MIC为0.78~1.56μL·mL^(-1)。BEO可降低Cp感染小鼠肾、肝和腹水的细菌负荷(P<0.01),上调Cp感染小鼠脾中抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的mRNA表达水平(P<0.01)。BEO处理可降低Cp对J774A.1巨噬细胞的感染率,提高被Cp感染小鼠的存活率(P<0.05)。BEO处理使Cp细胞膜凹陷,菌体内DNA外渗增加(P<0.05),以及下调毒力基因磷脂酶D(phospholipase D,pld)的表达(P<0.01)。BEO能抑杀Cp,改善Cp对小鼠的感染程度,其机制可能与BEO损伤Cp细胞膜造成DNA泄漏并降低毒力基因pld的mRNA表达,以及促进Cp感染小鼠抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的表达有关。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 香柠檬精油 抗菌作用 机制
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鼠棒状杆菌层析免疫检测方法的建立及应用
11
作者 余建国 朱楼英 《福建畜牧兽医》 2024年第1期21-23,共3页
本研究对制备出的单克隆抗体进行鉴定,并以此为基础构建鼠棒状杆菌免疫层析检测方法,制备检测试纸。试验结果表明:试验获取的单克隆抗体效价高(1.6×10^(3)~1.28×10^(4)),特异性和灵敏度好。免疫层析胶体金试纸最低检出限为10^... 本研究对制备出的单克隆抗体进行鉴定,并以此为基础构建鼠棒状杆菌免疫层析检测方法,制备检测试纸。试验结果表明:试验获取的单克隆抗体效价高(1.6×10^(3)~1.28×10^(4)),特异性和灵敏度好。免疫层析胶体金试纸最低检出限为10^(-6)CFU/mL,与大肠杆菌、沙门氏菌等无交叉反应,具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 鼠棒状杆菌 单克隆 效价 免疫层析
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72株纹带棒状杆菌对抗菌药物敏感性及其感染或定植患者的临床特征 被引量：2
12
作者 闫小利 陈清清 +4 位作者 林玉玲 宋瑞雅 张建明 郑廷金 张志珊 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期395-401,共7页
目的 了解临床分离的纹带棒状杆菌对抗菌药物的敏感性及其感染或定植患者的临床特征。方法 收集福建医科大学附属泉州第一医院2020年7月-2022年9月临床分离纹带棒状杆菌72株,采用肉汤微量稀释法检测细菌对18种抗菌药物的敏感性。PCR扩... 目的 了解临床分离的纹带棒状杆菌对抗菌药物的敏感性及其感染或定植患者的临床特征。方法 收集福建医科大学附属泉州第一医院2020年7月-2022年9月临床分离纹带棒状杆菌72株,采用肉汤微量稀释法检测细菌对18种抗菌药物的敏感性。PCR扩增检测喹诺酮类耐药决定区相关基因gyrA并进行测序以分析氨基酸突变位点,PCR扩增核糖体甲基化酶基因ermX和氨基糖苷修饰酶基因aphA1并进行测序分析。病史资料分析纹带棒状杆菌感染或定植患者的临床特征。结果 药敏试验结果显示,所有菌株对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素均100%敏感,对头孢曲松、环丙沙星及莫西沙星均100%耐药,对青霉素(87.5%)、头孢吡肟(95.8%)、美罗培南(95.8%)、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(90.3%)、红霉素(98.6%)和克林霉素(98.6%)的耐药率较高,对庆大霉素(25.0%)、四环素(30.6%)和利福平(23.6%)耐药率较低。PCR及DNA测序结果显示,3株纹带棒状杆菌发生gyrA基因单点突变(Ser87Val),67株发生双突变(Ser87Phe、Asp91A1a或Ser87Tyr、Asp91Ala),2株发生三位点突变(Ser87Phe、Ala88Pro和Asp91Ala),其中三位点突变是本研究首次发现的突变模式。所有的纹带棒状杆菌均检出ermX基因,aphA1基因检出率为43.1%。病史资料结果显示,72株纹带棒状杆菌主要分离自ICU(占65.2%),标本来源以下呼吸道标本为主(占91.6%),患者平均年龄(68.0±15.3)岁,感染和定植患者比例分别占72.2%(52/72)和27.8%(20/72),两组患者在住院时长≥28 d、合并脑出血、意识障碍及病情恶化方面差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 该院临床分离的纹带棒状杆菌均为多重耐药菌,感染患者预后相对较差。 展开更多
关键词 纹带棒状杆菌 GYRA ermX aphA1
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山羊伪结核棒状杆菌噬菌体的分离鉴定 被引量：2
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作者 李少飞 刘明杰 +7 位作者 姜悦才 李登亮 曹启航 陈凤强 高士孔 陈德坤 马文涛 赵慧英 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期12-17,共6页
为获得有效抗山羊伪结核棒状杆菌感染的生物制剂,根据NCBI登录的伪结核棒状杆菌菌株及棒状杆菌属噬菌体序列信息分别对其时间和地理分布进行统计,并以山羊伪结核棒状杆菌为宿主菌,从陕西有山羊伪结核患病史羊场的环境污水中分离噬菌体,... 为获得有效抗山羊伪结核棒状杆菌感染的生物制剂,根据NCBI登录的伪结核棒状杆菌菌株及棒状杆菌属噬菌体序列信息分别对其时间和地理分布进行统计,并以山羊伪结核棒状杆菌为宿主菌,从陕西有山羊伪结核患病史羊场的环境污水中分离噬菌体,采用双层平板法对该噬菌体进行分离和表征鉴定。结果显示,山羊伪结核棒状杆菌病的发生呈全球性分布,其中以美国与巴西最为严重,美国也是棒状杆菌属噬菌体分离株的主要来源地;分离出的1株噬菌体命名为M2;噬菌体M2呈典型的20面体结构,最佳感染复数为0.1,潜伏期为20 min,裂解周期为60 min,平均裂解量约为690 PFU/cell,表明获得了1株对伪结核棒状杆菌具有裂解作用的噬菌体。研究结果可为山羊伪结核棒状杆菌感染防控提供流行病学数据参考,并可为山羊伪结核棒状杆菌感染的临床治疗提供潜在新方法。 展开更多
关键词 伪结核棒状杆菌 干酪性淋巴结炎 噬菌体 山羊
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一株肉牛源干燥棒状杆菌的分离鉴定
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作者 赵桂新 白和平 +5 位作者 陶勇 张闫 刘畅 张志强 吴同垒 史秋梅 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第3期63-67,共5页
为了确定河北省昌黎县某肉牛场肉牛发病原因,本研究从呼吸道症状明显的病牛鼻粘液中分离纯化到1株优势菌,采用细菌培养、革兰氏染色、细菌生化鉴定、rpoB基因检测、16S rRNA序列分析方法鉴定,经K-B试纸法检测该分离菌对泰乐菌素、头孢... 为了确定河北省昌黎县某肉牛场肉牛发病原因,本研究从呼吸道症状明显的病牛鼻粘液中分离纯化到1株优势菌,采用细菌培养、革兰氏染色、细菌生化鉴定、rpoB基因检测、16S rRNA序列分析方法鉴定,经K-B试纸法检测该分离菌对泰乐菌素、头孢拉定等18种抗生素的药物敏感性。结果显示,分离菌革兰氏染色呈阳性短杆状球菌,在血琼脂培养基上可生长为干燥且粗糙的淡黄色菌落,在LB液体培养基中呈沉淀生长,菌液上层轻微浑浊,下层有颗粒状、片状沉淀;rpoB基因PCR扩增检测结果为阳性;该分离菌具有脂酶、赖氨酸脱羧酶、β-葡萄糖苷酶、α-葡萄糖苷酶活性,能够发酵海藻糖、麦芽糖、蔗糖,结果符合干燥棒状杆菌生化特性;16S rRNA序列比对分析表明,该分离菌与干燥棒状杆菌同源性为99%,一致性为91.6%;对泰乐菌素、头孢拉定等7种药物耐药,对环丙沙星、恩诺沙星等9种药物敏感。试验结果表明该分离菌为干燥棒状杆菌。 展开更多
关键词 肉牛 干燥棒状杆菌 生化鉴定 RPOB基因 16S rRNA 药敏试验
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缺失分枝菌酸层提高谷氨酸棒状杆菌L-谷氨酸产量的研究
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作者 李贺丹 张德志 +3 位作者 赵桂红 李姿含 胡晓清 王小元 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期31-40,共10页
谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum,C.glutamicum)的分枝菌酸层对维持细胞的通透性有重要作用,但是其合成需要消耗大量的底物和能源。作者通过敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC13869中聚酮合酶编码基因pks13,构建了突变菌株Δpks13。与... 谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum,C.glutamicum)的分枝菌酸层对维持细胞的通透性有重要作用,但是其合成需要消耗大量的底物和能源。作者通过敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC13869中聚酮合酶编码基因pks13,构建了突变菌株Δpks13。与野生型相比,突变菌Δpks13细胞体积变大、形状变圆且细胞壁结合松散容易脱落,但L-谷氨酸产量提高了8倍。薄层层析和液相色谱-质谱联用分析发现,Δpks13菌株细胞壁中的脂质主要为磷脂。实时荧光定量PCR分析发现,与野生型相比,Δpks13谷氨酸外排相关基因mscCG的转录水平上调,而α-酮戊二酸脱氢酶编码基因odhA和下游产物精氨酸合成相关基因(argB、argC、argD、argF、argG、argH、argJ)转录水平下调。这些基因转录水平的改变解释了Δpks13 L-谷氨酸产量提高的机制。 展开更多
关键词 谷氨酸棒状杆菌 分枝菌酸 L-谷氨酸
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结核硬脂酸棒状杆菌引起脐尿管感染1例
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作者 王崇圳 麦吉仁 +6 位作者 钟山 许丽霞 王立程 符晓莹 李欢 黎元莉 陈东科 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1588-1590,共3页
报告1例患者因脐部疼痛入院,患者脐部脓性分泌物标本革兰染色可见短小阳性球杆菌,同时对分离菌株采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行鉴定和16S rRNA检测,并进行体外药敏试验。革兰染色、MALDI-TOF MS鉴定和16S... 报告1例患者因脐部疼痛入院,患者脐部脓性分泌物标本革兰染色可见短小阳性球杆菌,同时对分离菌株采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行鉴定和16S rRNA检测,并进行体外药敏试验。革兰染色、MALDI-TOF MS鉴定和16S rRNA检测结果均为结核硬脂酸棒状杆菌。药敏结果提示该菌对青霉素、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、万古霉素、达托霉素、利奈唑胺、复方磺胺甲口恶唑、氨苄西林、庆大霉素、四环素均敏感。微生物的形态学涂片有助于结核硬脂酸棒状杆菌的鉴别,MALDI-TOF MS对于快速鉴定该菌种是必要的,药敏试验也可以为临床该菌感染的经验性治疗提供一定的帮助。 展开更多
关键词 结核硬脂酸棒状杆菌 脐尿管 感染
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棒状杆菌脑膜炎2例并文献复习
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作者 阮冰 段曰黎 +1 位作者 朱浩翔 王新宇 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期530-536,共7页
目的报道2例棒状杆菌脑膜炎病例并复习相关文献,旨在提高临床对该菌致病性的认识。方法详细描述2例棒状杆菌脑膜炎病例。利用英文关键词“Corynebacterium meningitis”和“cerebrospinal fluid shunt infection”检索PubMed,以及中文... 目的报道2例棒状杆菌脑膜炎病例并复习相关文献,旨在提高临床对该菌致病性的认识。方法详细描述2例棒状杆菌脑膜炎病例。利用英文关键词“Corynebacterium meningitis”和“cerebrospinal fluid shunt infection”检索PubMed,以及中文关键词“棒状杆菌”和“脑膜炎”检索中国知网、万方、维普和中国生物医学文献数据库,对筛选出的病例进行总结和分析。结果2例病例在接受腰大池腹腔分流术后出现发热、腹痛、意识不清等症状。多次脑脊液培养均检出棒状杆菌,经万古霉素治疗后症状明显改善。文献复习发现29例相关病例,结合现文报道的2例共31例。患者中女性11例,男性20例,年龄范围为4周龄至87岁。感染的棒状杆菌种类包括杰氏棒状杆菌12例,纹带棒状杆菌9例,干燥棒状杆菌2例,牛棒状杆菌2例,水生棒状杆菌1例,马棒状杆菌1例,微小棒状杆菌1例,以及3例未明确分类的棒状杆菌。多数患者有基础疾病,如免疫性疾病2例,恶性肿瘤8例等。感染因素多样,包括恶性肿瘤化疗、激素和免疫抑制剂使用、侵袭性操作及大量抗生素使用。治疗中,万古霉素为首选药物,19例患者还进行了引流管或静脉导管的移除或更换。25例患者治疗后痊愈,6例患者死亡。结论棒状杆菌作为条件致病菌在临床上的感染病例逐渐增多。对于接受过多次侵袭性操作、免疫功能低下的患者,若出现发热、意识改变和脑膜炎症状,且脑脊液多次检测阳性,应高度警惕棒状杆菌感染,并及时治疗。 展开更多
关键词 棒状杆菌 脑膜炎 条件致病菌
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山羊伪结核棒状杆菌病防治体会
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作者 游文明 《福建畜牧兽医》 2024年第2期73-73,共1页
伪结核棒状杆菌病是一种人畜共患接触性传染病。某养殖户饲养的山羊中有1只出现干酪样淋巴结炎、脓肿等特征病变,结合显微镜检查初步诊断为伪结核棒状杆菌病。笔者通过局部涂抹红霉素软膏、肌肉注射头孢噻呋钠等治疗,并采取相关措施预... 伪结核棒状杆菌病是一种人畜共患接触性传染病。某养殖户饲养的山羊中有1只出现干酪样淋巴结炎、脓肿等特征病变,结合显微镜检查初步诊断为伪结核棒状杆菌病。笔者通过局部涂抹红霉素软膏、肌肉注射头孢噻呋钠等治疗,并采取相关措施预防同群山羊接触感染,取得了满意效果。 展开更多
关键词 山羊 伪结核棒状杆菌病 诊治
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圭山山羊伪结核棒状杆菌的分离及鉴定
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作者 陈关雄 李双洪 +4 位作者 李继明 台晓媛 高丽艳 李学德 喻永福 《云南畜牧兽医》 2024年第6期5-9,共5页
为准确诊断圭山山羊颌下、颈部等部位出现皮下脓肿的病原,无菌采集了圭山山羊皮下脓肿的脓汁,进行了细菌的分离培养、形态观察、生化鉴定、分子生物学鉴定、攻毒试验和药敏试验。结果:引起圭山山羊颌下、颈部等部位皮下脓肿的病原为伪... 为准确诊断圭山山羊颌下、颈部等部位出现皮下脓肿的病原,无菌采集了圭山山羊皮下脓肿的脓汁,进行了细菌的分离培养、形态观察、生化鉴定、分子生物学鉴定、攻毒试验和药敏试验。结果:引起圭山山羊颌下、颈部等部位皮下脓肿的病原为伪结核棒状杆菌,可选用绵羊血琼脂或亚碲酸钾血琼脂进行分离鉴定,该分离菌株对试验动物豚鼠较敏感,分离菌株对头孢曲松、头孢吡肟、青霉素、左氧氟沙星和多西环素敏感,其余抗生素均呈现一定程度的耐药。本研究为基层兽医人员科学地开展圭山山羊伪结核防治工作提供了参考。 展开更多
关键词 圭山山羊 伪结核棒状杆菌 石林县
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中药治疗羊假结核棒状杆菌病 被引量：2
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作者 杜昌隆 《中兽医学杂志》 2019年第11期89-89,共1页
棒状杆菌属的几种细菌可以引起动物的多种疾病,统称为棒状杆菌病。羊假结核棒状杆菌病主要通过皮肤损伤或或消化道传染,其中一部分甚至可以通过土壤传染,它会引发羊化脓性、干酪性淋巴结炎。我在查阅了多组数据后,整理了羊假结核棒状杆... 棒状杆菌属的几种细菌可以引起动物的多种疾病,统称为棒状杆菌病。羊假结核棒状杆菌病主要通过皮肤损伤或或消化道传染,其中一部分甚至可以通过土壤传染,它会引发羊化脓性、干酪性淋巴结炎。我在查阅了多组数据后,整理了羊假结核棒状杆菌病826只,在中药方剂的治疗下,成功治疗了788只,成效明显,现将治疗情况汇总如下。 展开更多
关键词 消化道传染 棒状杆菌病 中药方剂 干酪性淋巴结炎 棒状杆菌属 假结核棒状杆菌 皮肤损伤 多种疾病
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