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肉制品中猪肉源成分的Proofman-梯型熔解温度等温扩增检测: 1; 作者王博锐许丹丹 +4 位作者谷蒙林姚蔚王耀肖付刚王德国《肉类研究》 2023年第3期28-32,共5页; 建立一种基于Proofman探针(proofreading enzyme-mediated probe cleavage)的梯型熔解温度等温扩增(ladder-shape melting temperature isothermal amplification,LMTIA)方法检测肉制品中的猪肉成分。选取猪细胞核中的特异性基因PRLR为... 展开更多; 关键词 Proofman探针梯型熔解温度等温扩增技术猪肉快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

核酸等温扩增技术检测动物源食品研究进展被引量：4: 2; 作者肖付刚张尧轩 +2 位作者谷蒙林王德国张国治《粮食与油脂》北大核心 2023年第12期22-28,共7页; 综述了依赖核酸序列的扩增(NASBA)、链替代扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)、环介导等温扩增(LAMP)、赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、梯型熔解温度等温扩增(LMTIA)几种主要核酸等温扩增检测技术的发展及其基本原理、特点... 展开更多; 关键词核酸等温扩增技术检测动物源食品梯型熔解温度等温扩增技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

动物双歧杆菌乳亚种Proofman-LMTIA快速分型检测方法研究: 3; 作者刘丽波李洋 +3 位作者杨子豪王德国王松李春《中国乳品工业》北大核心 2025年第10期60-65,共6页; 将梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合,建立动物双歧杆菌乳亚种快速分型检... 展开更多; 关键词动物双歧杆菌乳亚种 Proofman探针梯型熔解温度核酸等温扩增快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用Proofman-LMTIA技术双重检测当归和东当归: 4; 作者张尧轩肖付刚 +1 位作者张国治王德国《保鲜与加工》 CAS 北大核心 2024年第8期109-114,共6页; 通过梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合的方法对当归和东当归进行双重检测... 展开更多; 关键词梯型熔解温度核酸等温扩增技术快速检测当归东当归; 在线阅读下载PDF 职称材料

核酸检测技术鉴别转基因食品被引量：1: 5; 作者肖付刚谷蒙林 +3 位作者张尧轩王德国丁长河张国治《农产品加工》 2023年第6期91-94,共4页; 转基因作物给农民乃至社会带来巨大的效益,但其安全性备受争议,转基因食品的检测引发了学者的高度重视。重点介绍了几种常用的鉴别转基因食品的核酸检测技术,如基因芯片技术、PCR、环介导等温扩增(Loop-med-iated Isothermal Amplificat... 展开更多; 关键词核酸检测转基因食品环介导等温扩增梯型熔解温度等温扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

犬细小病毒Proofman-LMTIA检测方法被引量：2: 6; 作者许丹丹姚蔚 +4 位作者周丹刘金鑫张晓华王耀王德国《中国测试》 CAS 北大核心 2023年第11期38-44,共7页; 为评价Proofman探针的梯型熔解温度等温扩增技术(LMTIA)检测核酸的性能,以Proofman-LMTIA快速检测犬细小病毒为例,采用实时荧光定量PCR方法和微滴式数字PCR方法进行对比分析。针对犬细小病毒基因的特异性序列设计引物和Proofman探针,通... 展开更多; 关键词 Proofman探针梯型熔解温度等温扩增技术犬细小病毒微滴式数字PCR 快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肉制品中猪肉源成分的Proofman-梯型熔解温度等温扩增检测: 1; 作者王博锐许丹丹谷蒙林姚蔚王耀肖付刚王德国; 机构河南科技大学食品与生物工程学院许昌学院食品与药学院河南工业大学粮油食品学院; 出处《肉类研究》 2023年第3期28-32,共5页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(31701689) 国家自然科学基金面上项目(32172300) +1 种基金河南省高校重点研发项目(21B550006)。; 文摘建立一种基于Proofman探针(proofreading enzyme-mediated probe cleavage)的梯型熔解温度等温扩增(ladder-shape melting temperature isothermal amplification,LMTIA)方法检测肉制品中的猪肉成分。选取猪细胞核中的特异性基因PRLR为靶基因,设计LMTIA引物和Proofman探针。通过优化反应体系,对所建立的方法进行特异性、灵敏度和最低检测限结果评价。结果表明:所建立的Proofman-LMTIA方法可在30 min内完成检测;相对于从鸡肉、鸭肉、牛肉、羊肉、猫肉、狗肉、玉米淀粉、红薯淀粉、木薯淀粉、绿豆淀粉、小麦粉中提取的基因组DNA,可特异性检测猪基因组DNA;检测灵敏度为1 ng/μL,对人工模拟的混合肉样中猪肉的最低检测限为0.1%。所建立的Proofman-LMTIA方法对猪肉成分有较好的特异性,能够快速、准确检测出肉制品中的猪肉成分,可对猪肉掺假进行快速检测。; 关键词 Proofman探针梯型熔解温度等温扩增技术猪肉快速检测; Keywords proofreading enzyme-mediated probe cleavage ladder-shape melting temperature isothermal amplification pork rapid detection; 分类号 TS251.51 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名核酸等温扩增技术检测动物源食品研究进展被引量：4: 2; 作者肖付刚张尧轩谷蒙林王德国张国治; 机构许昌学院食品与药学院河南工业大学粮油食品学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室; 出处《粮食与油脂》北大核心 2023年第12期22-28,共7页; 基金国家自然科学基金面上项目(32172300) 国家重点研发计划子课题(2016YFD0500704-4) +1 种基金河南省高等学校重点科研项目(21B550006)。; 文摘综述了依赖核酸序列的扩增(NASBA)、链替代扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)、环介导等温扩增(LAMP)、赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、梯型熔解温度等温扩增(LMTIA)几种主要核酸等温扩增检测技术的发展及其基本原理、特点和在动物源食品检测中的应用,并对几种主要核酸等温扩增检测技术的特点及应用进行比较。; 关键词核酸等温扩增技术检测动物源食品梯型熔解温度等温扩增技术; Keywords nucleic acid isothermal amplification technology detection animal derived food ladder-shape melting temperature isothermal amplification(LMTIA)technology; 分类号 TS207 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名动物双歧杆菌乳亚种Proofman-LMTIA快速分型检测方法研究: 3; 作者刘丽波李洋杨子豪王德国王松李春; 机构东北农业大学食品学院许昌学院黑龙江省绿色食品科学研究院; 出处《中国乳品工业》北大核心 2025年第10期60-65,共6页; 基金国家自然科学青年基金(No.31801518) 黑龙江省省级本科高等学校优秀青年教师(YQJH2023180) 黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD2022C007)。; 文摘将梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合,建立动物双歧杆菌乳亚种快速分型检测方法。首先针对动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis,B.Lactis)全基因组中的“梯形”熔解曲线进行特异性检查,再设计引物并合成Proofman探针,优化等温扩增温度后,使用其他双歧杆菌验证方法的特异性,再通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)方法进行灵敏度、扩增效率对比及真实样品检测验证。结果表明,利用Proofman-LMTIA建立的B.Lactis快速分型检测方法的引物最适温度为63℃,灵敏度为1 pg/μL,并具有良好稳定性。同其他5种双歧杆菌基因组DNA无交叉反应,且能在20 min内完成检测,比qPCR方法灵敏度高10倍,比qPCR方法扩增效率高3倍,真实样品检测结果与qPCR法一致。建立的扩增方法不需要变温条件即可快速扩增,兼具灵敏、准确等优点,适合大部分场景下动物双歧杆菌乳亚种的快速分型鉴定。; 关键词动物双歧杆菌乳亚种 Proofman探针梯型熔解温度核酸等温扩增快速检测; Keywords Bifidobacterium animalis subsp.lactis Proofman probe ladder-shape melting temperature isothermal amplification of nucleic acids rapid testing; 分类号 TS252.7 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用Proofman-LMTIA技术双重检测当归和东当归: 4; 作者张尧轩肖付刚张国治王德国; 机构河南工业大学粮油食品学院许昌学院食品与药学院; 出处《保鲜与加工》 CAS 北大核心 2024年第8期109-114,共6页; 基金河南省高等学校重点科研项目(21B550006) 河南省科技计划项目(212102310912) 河南省科技攻关项目(242102321128,242102321134)。; 文摘通过梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合的方法对当归和东当归进行双重检测。以ddH2O为阴性模板,当归和东当归基因组DNA为阳性模板,测定当归和东当归引物的最适温度、灵敏度及稳定性,并进行了真实样品检测。结果表明,应用Proofman-LMTIA双重检测当归和东当归,引物测定的最适温度为62℃,当归引物灵敏度低至10 pg/μL,东当归引物灵敏度低至1 pg/μL,具有良好的稳定性。7份市售当归样品经检测均为当归。该研究可为当归和东当归的鉴别提供一种新的检测方法。; 关键词梯型熔解温度核酸等温扩增技术快速检测当归东当归; Keywords ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification technique(LMTIA) rapid detection Angelica sinensis(Oliv.) Angelica acutiloba(Sieb.et Zucc.); 分类号 TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名核酸检测技术鉴别转基因食品被引量：1: 5; 作者肖付刚谷蒙林张尧轩王德国丁长河张国治; 机构许昌学院食品与药学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室河南工业大学粮油食品学院; 出处《农产品加工》 2023年第6期91-94,共4页; 基金河南省科技攻关项目(212102310912) 河南省高等学校重点科研项目(21B550006)。; 文摘转基因作物给农民乃至社会带来巨大的效益,但其安全性备受争议,转基因食品的检测引发了学者的高度重视。重点介绍了几种常用的鉴别转基因食品的核酸检测技术,如基因芯片技术、PCR、环介导等温扩增(Loop-med-iated Isothermal Amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)、交叉引物等温扩增(Cross Prime Amplification,CPA)。对这些技术的原理、优缺点进行了总结并对其进行展望。提出梯型熔解温度等温扩增(Ladder-Shape Melting Temperature Isothermal Amplification,LMTIA)技术,推进核酸检测技术的研究及在转基因食品检测中的应用。在转基因食品的检测中,RT-PCR,LAMP,LMTIA等均能检出0.01%以下的含量,可用于定量检测,表明这些核酸技术在转基因食品的检测有很好的应用前景。; 关键词核酸检测转基因食品环介导等温扩增梯型熔解温度等温扩增; Keywords nucleic acid testing adulteration genetically modified foods LAMP LMTIA; 分类号 TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬细小病毒Proofman-LMTIA检测方法被引量：2: 6; 作者许丹丹姚蔚周丹刘金鑫张晓华王耀王德国; 机构河南科技大学许昌学院; 出处《中国测试》 CAS 北大核心 2023年第11期38-44,共7页; 基金国家自然科学基金项目(32172300) 河南省科技攻关项目(212102310912) 河南省高校科技创新人才项目(23HASTIT048)。; 文摘为评价Proofman探针的梯型熔解温度等温扩增技术(LMTIA)检测核酸的性能,以Proofman-LMTIA快速检测犬细小病毒为例,采用实时荧光定量PCR方法和微滴式数字PCR方法进行对比分析。针对犬细小病毒基因的特异性序列设计引物和Proofman探针,通过优化反应条件,对方法的特异性、灵敏度进行测试,再通过实时荧光定量PCR方法、微滴式数字PCR进行对比验证。结果表明,所建立的Proofman-LMTIA方法在最适反应温度为61℃时,与猫、犬等基因组DNA无交叉反应,灵敏度达到8拷贝/μL,且能够在20 min内完成检测,与实时荧光定量PCR和数字PCR方法结果具有一致性。该方法不仅在恒温条件下即可扩增,且具有快速、灵敏、高效等优点,适用于病毒的现场快速检测。; 关键词 Proofman探针梯型熔解温度等温扩增技术犬细小病毒微滴式数字PCR 快速检测; Keywords Proofman probe ladder-shape melting temperature isothermal amplification of nucleic acids canine parvo virus droplet digital PCR rapid detection; 分类号 K826.15 [历史地理—历史学] TB9 [机械工程—测试计量技术及仪器]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	肉制品中猪肉源成分的Proofman-梯型熔解温度等温扩增检测	王博锐许丹丹谷蒙林姚蔚王耀肖付刚王德国	《肉类研究》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	核酸等温扩增技术检测动物源食品研究进展	肖付刚张尧轩谷蒙林王德国张国治	《粮食与油脂》北大核心	2023	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	动物双歧杆菌乳亚种Proofman-LMTIA快速分型检测方法研究	刘丽波李洋杨子豪王德国王松李春	《中国乳品工业》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	应用Proofman-LMTIA技术双重检测当归和东当归	张尧轩肖付刚张国治王德国	《保鲜与加工》 CAS 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	核酸检测技术鉴别转基因食品	肖付刚谷蒙林张尧轩王德国丁长河张国治	《农产品加工》	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	犬细小病毒Proofman-LMTIA检测方法	许丹丹姚蔚周丹刘金鑫张晓华王耀王德国	《中国测试》 CAS 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料