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梨褪绿叶斑伴随病毒P5蛋白与NbWRKY1的互作研究
1
作者
高玉洁
任秋婷
+6 位作者
张永乐
张樾
张红艺
邓惠方
王先洪
洪霓
王国平
《西南农业学报》
北大核心
2025年第5期885-892,共8页
【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒(PCLSaV)P5蛋白是沉默抑制子和致病因子,探究NbWRKY1对PCLSaV P5生物学功能的作用,为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的...
【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒(PCLSaV)P5蛋白是沉默抑制子和致病因子,探究NbWRKY1对PCLSaV P5生物学功能的作用,为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的互作关系,同时通过根癌农杆菌介导的表达分析和绿色荧光蛋白RNA沉默诱导研究NbWRKY1对P5的生物学影响。【结果】NbWKY1与P5互作且共定位于细胞核中,并在细胞核内形成均匀的核体颗粒,不包含核仁,与NbWRKY1在本氏烟细胞内的分布特点相似。同时P5还可诱导NbWRKY1基因上调表达,2 d时NbWRKY1的表达水平显著上调4.2倍,至4 d时表达量有所回落,但仍高于对照。病毒诱导的基因沉默发现NbWRKY1在野生型本氏烟植株中沉默效率呈先上升后下降的动态变化趋势,在14 d时沉默效率最高。且NbWRKY1沉默植株表型与野生型植株相似。NbWRKY1沉默植株叶片上P5引起的细胞坏死程度明显比野生型植株叶片坏死程度减轻,由此判定当该基因下调表达时,能有效缓解由PCLSaV P5所引发的细胞坏死现象。检测NbWRKY1和P5的RNA沉默抑制活性,发现NbWRKY1具备直接抑制RNA沉默的能力,且P5与NbWRKY1的RNA沉默抑制能力存在叠加效应,当两种蛋白的沉默抑制活性叠加后,表现出比P5蛋白更强的RNA沉默抑制活性。【结论】本研究发现NbWRKY1可与P5互作,且NbWRKY1既可直接抑制RNA沉默,其下调表达后也可减轻PCLSaV P5引起的细胞坏死反应,同时NbWRKY1与PCLSaV P5的RNA沉默抑制活性存在叠加效应。研究结果为解析PCLSaV编码的P5蛋白的生物学功能提供了新的理论依据。
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关键词
梨褪绿叶斑伴随病毒
特异蛋白P5
NbWRKY1
蛋白互作
RNA沉默抑制
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职称材料
题名
梨褪绿叶斑伴随病毒P5蛋白与NbWRKY1的互作研究
1
作者
高玉洁
任秋婷
张永乐
张樾
张红艺
邓惠方
王先洪
洪霓
王国平
机构
华中农业大学植物科技学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室
华中农业大学园艺林学学院/果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室
出处
《西南农业学报》
北大核心
2025年第5期885-892,共8页
基金
国家重点研发计划项目(2019YFD1001800)。
文摘
【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒(PCLSaV)P5蛋白是沉默抑制子和致病因子,探究NbWRKY1对PCLSaV P5生物学功能的作用,为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的互作关系,同时通过根癌农杆菌介导的表达分析和绿色荧光蛋白RNA沉默诱导研究NbWRKY1对P5的生物学影响。【结果】NbWKY1与P5互作且共定位于细胞核中,并在细胞核内形成均匀的核体颗粒,不包含核仁,与NbWRKY1在本氏烟细胞内的分布特点相似。同时P5还可诱导NbWRKY1基因上调表达,2 d时NbWRKY1的表达水平显著上调4.2倍,至4 d时表达量有所回落,但仍高于对照。病毒诱导的基因沉默发现NbWRKY1在野生型本氏烟植株中沉默效率呈先上升后下降的动态变化趋势,在14 d时沉默效率最高。且NbWRKY1沉默植株表型与野生型植株相似。NbWRKY1沉默植株叶片上P5引起的细胞坏死程度明显比野生型植株叶片坏死程度减轻,由此判定当该基因下调表达时,能有效缓解由PCLSaV P5所引发的细胞坏死现象。检测NbWRKY1和P5的RNA沉默抑制活性,发现NbWRKY1具备直接抑制RNA沉默的能力,且P5与NbWRKY1的RNA沉默抑制能力存在叠加效应,当两种蛋白的沉默抑制活性叠加后,表现出比P5蛋白更强的RNA沉默抑制活性。【结论】本研究发现NbWRKY1可与P5互作,且NbWRKY1既可直接抑制RNA沉默,其下调表达后也可减轻PCLSaV P5引起的细胞坏死反应,同时NbWRKY1与PCLSaV P5的RNA沉默抑制活性存在叠加效应。研究结果为解析PCLSaV编码的P5蛋白的生物学功能提供了新的理论依据。
关键词
梨褪绿叶斑伴随病毒
特异蛋白P5
NbWRKY1
蛋白互作
RNA沉默抑制
Keywords
Pear chlorotic leaf spot-associated virus
Specific protein P5
NbWRKY1
Protein-protein interaction
RNA silencing suppression
分类号
S661.2 [农业科学—果树学]
S432.1 [农业科学—植物病理学]
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作者
出处
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1
梨褪绿叶斑伴随病毒P5蛋白与NbWRKY1的互作研究
高玉洁
任秋婷
张永乐
张樾
张红艺
邓惠方
王先洪
洪霓
王国平
《西南农业学报》
北大核心
2025
0
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