-
题名利用框内缺失法构建变异链球菌srtA基因缺失株
被引量：2
- 1
-
-
作者
陈璇
刘海霞
彭显
邹玲
-
机构
口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科
-
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期588-592,共5页
-
基金
国家自然科学基金(81570974)
四川省科技计划项目基金(2015JY0260)~~
-
文摘
目的利用框内缺失法,通过IFDC2基因盒及融合聚合酶链反应(PCR)、同源重组技术构建变异链球菌UA159菌株srt A基因缺失株。方法 PCR扩增变异链球菌UA159菌株srt A基因上下游同源片段及IFDC2基因盒,将这些片段连接、转化入UA159,替换srt A基因同源片段,筛选、鉴定红霉素抗性克隆;PCR扩增、连接UA159 srt A基因上下游同源片段,将连接片段转化入前述红霉素抗性克隆中替换IFDC2同源片段,筛选、鉴定抗苯丙氨酸类似物p-chloro-phenylalanine(p-Cl-Phe)克隆。结果 PCR、琼脂糖凝胶电泳及DNA测序结果均证明srt A基因编码区被完全删除,上下游片段无缝连接,成功构建UA159 srt A基因缺失株。结论本研究成功构建了无标记的变异链球菌UA159 srt A基因缺失株,为进一步研究该基因在生物膜中的作用及其调控机制奠定了基础。
-
关键词
变异链球菌
srtA基因缺失
框内缺失法
-
Keywords
Streptococcus mutans
srtA-deletion mutant
in-frame deletion system
-
分类号
R780.2
[医药卫生—口腔医学]
-
