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玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析
被引量:
6
1
作者
关淑艳
赵丽娜
+3 位作者
王丕武
楚海娇
刘强
颜雪芬
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第5期147-153,共7页
【目的】从玉米幼根基因组DNA中克隆β-葡萄糖苷酶基因根部特异性启动子序列ZmGLU1P,并对其功能进行分析。【方法】利用PCR技术从玉米品种P138幼根基因组DNA中克隆玉米根部特异性启动子片段ZmGLU1P,将其与GUS基因融合,构建植物表达载体p...
【目的】从玉米幼根基因组DNA中克隆β-葡萄糖苷酶基因根部特异性启动子序列ZmGLU1P,并对其功能进行分析。【方法】利用PCR技术从玉米品种P138幼根基因组DNA中克隆玉米根部特异性启动子片段ZmGLU1P,将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pCAMBIA121-ZmGLU1P,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌介导法转化烟草NC89,对转化烟草植株进行PCR和Southern杂交检测。采集PCR和Southern杂交检测为阳性的转基因烟草的根、茎、叶,进行GUS活性的组织染色检测。【结果】克隆获得了ZmGLU1P片段,其长度为1 846 bp,与已报道的序列同源性达99%以上。转基因烟草植株的PCR和Southern杂交结果显示,成功地获得了转基因阳性植株;GUS活性检测表明,根中GUS活性最强,而在茎和叶等组织中GUS活性甚微,表明ZmGLU1P片段具有根部特异性启动子功能。【结论】玉米β-葡萄糖苷酶基因上游1 846 bp的片段ZmGLU1P具有根部特异性启动子功能,为根部特异性启动子。
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关键词
玉米
根部特异性启动子
功能分析
GUS染色
烟草
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职称材料
大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析
被引量:
6
2
作者
王丹
王丕武
+1 位作者
付永平
厉志
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期195-199,共5页
利用PCR技术从大豆品种吉农17基因组DNA中分离得到大豆根部特异性启动子片段RSP,长度约为2.5kb。序列分析表明RSP与报道序列同源性达97%以上。将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pRSP-GUS后,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌(A...
利用PCR技术从大豆品种吉农17基因组DNA中分离得到大豆根部特异性启动子片段RSP,长度约为2.5kb。序列分析表明RSP与报道序列同源性达97%以上。将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pRSP-GUS后,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)NC89。转基因植株的GUS活性检测表明,仅能在根中检测到GUS活性,而在茎、叶和种子等其它组织中都未检测到GUS活性,证实RSP片段具有根部特异性表达功能。
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关键词
大豆
根部特异性启动子
功能分析
GUS染色
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职称材料
MLL启动子驱动SST基因转化甜菜的抗旱性分析
被引量:
5
3
作者
梁文洁
张丽
+3 位作者
郭新勇
王爱英
向本春
祝建波
《江苏农业科学》
2018年第5期43-48,共6页
将洋葱(Allium cepa)的蔗糖-果糖基转移酶基因SST与甜菜根部特异性启动子MLL重组,以p BI121为起始载体,构建p BI121-MLL-SST,通过农杆菌介导法转化甜菜(Beta vulgaris)品种STFD4,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,简称PCR...
将洋葱(Allium cepa)的蔗糖-果糖基转移酶基因SST与甜菜根部特异性启动子MLL重组,以p BI121为起始载体,构建p BI121-MLL-SST,通过农杆菌介导法转化甜菜(Beta vulgaris)品种STFD4,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,简称PCR)鉴定转化植株,并用逆转录PCR(reverse transcription PCR,简称RT-PCR)技术检测SST基因的表达。利用干旱胁迫处理进行抗旱性分析,结果表明,与对照(CK)相比,转SST植株叶片萎蔫较迟且程度较轻,其叶片相对含水量和光系统Ⅱ相对量子产率的降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的提高幅度均低于对照甜菜植株。以上结果表明,SST基因可明显提高甜菜的抗旱性,为进一步研究该基因在甜菜中的功能奠定了基础。
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关键词
蔗糖-果糖基转移酶(SST)
植物表达载体
根部特异性启动子
甜菜
转化
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职称材料
题名
玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析
被引量:
6
1
作者
关淑艳
赵丽娜
王丕武
楚海娇
刘强
颜雪芬
机构
吉林农业大学生物技术中心
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第5期147-153,共7页
基金
国家转基因专项(20082X08003-005)
吉林省财政厅项目(200806)
吉林省科技厅成果转化补助项目(20095044)
文摘
【目的】从玉米幼根基因组DNA中克隆β-葡萄糖苷酶基因根部特异性启动子序列ZmGLU1P,并对其功能进行分析。【方法】利用PCR技术从玉米品种P138幼根基因组DNA中克隆玉米根部特异性启动子片段ZmGLU1P,将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pCAMBIA121-ZmGLU1P,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌介导法转化烟草NC89,对转化烟草植株进行PCR和Southern杂交检测。采集PCR和Southern杂交检测为阳性的转基因烟草的根、茎、叶,进行GUS活性的组织染色检测。【结果】克隆获得了ZmGLU1P片段,其长度为1 846 bp,与已报道的序列同源性达99%以上。转基因烟草植株的PCR和Southern杂交结果显示,成功地获得了转基因阳性植株;GUS活性检测表明,根中GUS活性最强,而在茎和叶等组织中GUS活性甚微,表明ZmGLU1P片段具有根部特异性启动子功能。【结论】玉米β-葡萄糖苷酶基因上游1 846 bp的片段ZmGLU1P具有根部特异性启动子功能,为根部特异性启动子。
关键词
玉米
根部特异性启动子
功能分析
GUS染色
烟草
Keywords
corn
root specific promoter
functional identification
GUS staining
tobacoo
分类号
S513 [农业科学—作物学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析
被引量:
6
2
作者
王丹
王丕武
付永平
厉志
机构
吉林农业大学农学院
出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期195-199,共5页
基金
教育部博士点基金资助项目(20070193005)
文摘
利用PCR技术从大豆品种吉农17基因组DNA中分离得到大豆根部特异性启动子片段RSP,长度约为2.5kb。序列分析表明RSP与报道序列同源性达97%以上。将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pRSP-GUS后,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)NC89。转基因植株的GUS活性检测表明,仅能在根中检测到GUS活性,而在茎、叶和种子等其它组织中都未检测到GUS活性,证实RSP片段具有根部特异性表达功能。
关键词
大豆
根部特异性启动子
功能分析
GUS染色
Keywords
Soybean
Root specific promoter
Functional Identification
GUS staining
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
在线阅读
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职称材料
题名
MLL启动子驱动SST基因转化甜菜的抗旱性分析
被引量:
5
3
作者
梁文洁
张丽
郭新勇
王爱英
向本春
祝建波
机构
石河子大学生命科学学院/石河子大学农业生物技术重点实验室
出处
《江苏农业科学》
2018年第5期43-48,共6页
基金
国家转基因专项(编号:2011ZX08005-004)
石河子大学科技研究发展规划(编号:gxss2007-y203)
文摘
将洋葱(Allium cepa)的蔗糖-果糖基转移酶基因SST与甜菜根部特异性启动子MLL重组,以p BI121为起始载体,构建p BI121-MLL-SST,通过农杆菌介导法转化甜菜(Beta vulgaris)品种STFD4,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,简称PCR)鉴定转化植株,并用逆转录PCR(reverse transcription PCR,简称RT-PCR)技术检测SST基因的表达。利用干旱胁迫处理进行抗旱性分析,结果表明,与对照(CK)相比,转SST植株叶片萎蔫较迟且程度较轻,其叶片相对含水量和光系统Ⅱ相对量子产率的降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的提高幅度均低于对照甜菜植株。以上结果表明,SST基因可明显提高甜菜的抗旱性,为进一步研究该基因在甜菜中的功能奠定了基础。
关键词
蔗糖-果糖基转移酶(SST)
植物表达载体
根部特异性启动子
甜菜
转化
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析
关淑艳
赵丽娜
王丕武
楚海娇
刘强
颜雪芬
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析
王丹
王丕武
付永平
厉志
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
MLL启动子驱动SST基因转化甜菜的抗旱性分析
梁文洁
张丽
郭新勇
王爱英
向本春
祝建波
《江苏农业科学》
2018
5
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