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根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化
被引量：
2
1
作者
姚家成
夏珍珍
+6 位作者
黄粤
皮婷
梅枫
何冬兰
程国军
刘涛
李晓华
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期81-87,共7页
对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达,并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化,为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依...
对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达,并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化,为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依据。通过PCR扩增获得agnH全长基因(585bp),构建重组质粒pET28a(+)-agnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,研究不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对重组质粒pET28a(+)-agnH诱导表达的影响,用不同浓度的咪唑洗脱液洗脱重组蛋白,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。结果表明:在IPTG浓度为0.4mmol/L、诱导温度为25℃且诱导时间为25h条件下,AgnH蛋白表达量较高;在250mmol/L的咪唑洗脱液洗脱下,得到浓度较高的AgnH蛋白。
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关键词
根癌土壤杆菌scuec1菌株
尼古丁降解代谢
agnH基因
基因克隆
蛋白表达与纯化
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职称材料
高Vir毒力根癌农杆菌AGL-1菌株介导丝状真菌转化研究进展和应用
被引量：
4
2
作者
陈璨
蒋冬花
+3 位作者
齐育平
曹丽凌
黄娜
孙青
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第2期80-85,共6页
根癌农杆菌介导的真菌转化(ATMT),是分离真菌基因和分析基因功能的重要方法。目前有多种农杆菌菌株可运用于ATMT法,例如LB4404、C58C1、EHA104、AGL-1等。其中AGL-1菌株因其具有Vir毒力高、转化效率高、稳定性好等诸多优点,近年来有关AG...
根癌农杆菌介导的真菌转化(ATMT),是分离真菌基因和分析基因功能的重要方法。目前有多种农杆菌菌株可运用于ATMT法,例如LB4404、C58C1、EHA104、AGL-1等。其中AGL-1菌株因其具有Vir毒力高、转化效率高、稳定性好等诸多优点,近年来有关AGL-1菌株高效转化丝状真菌的应用越来越多。就其转化机制、转化过程、转化率影响因素的最新研究进展进行概述。
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关键词
根
癌
农
杆菌
AGL-
1
菌
株
丝状真
菌
T-DNA
影响因素
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职称材料
辅酶Q_(10)高产菌株的选育
被引量：
8
3
作者
刘克杉
吴文芳
+3 位作者
韩斯琴
徐梅
吕安国
孙静波
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期89-92,共4页
以根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)1.1416为出发菌株,考察了紫外线(UV)、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(NTG)和硫酸二乙脂(DES)对该菌株产生辅酶Q10能力的诱变效应,并结合辅酶Q10合成途径设计了快速筛选辅酶Q10高产菌株的模型。结...
以根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)1.1416为出发菌株,考察了紫外线(UV)、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(NTG)和硫酸二乙脂(DES)对该菌株产生辅酶Q10能力的诱变效应,并结合辅酶Q10合成途径设计了快速筛选辅酶Q10高产菌株的模型。结果表明:NTG和DES交替诱变处理根癌土壤杆菌1.1416具有较好的诱变效果,筛选到的突变株AGR0619和AGR0610的辅酶Q10总产量分别提高了137.49%和156.07%。
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关键词
辅酶Q
1
0
高产
菌
株
根
癌
土壤
杆菌
选育
诱变效应
亚硝基胍
快速筛选
合成途径
诱变效果
诱变处理
紫外线
DES
NTG
总产量
突变
株
硫酸
甲基
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职称材料
题名
根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化
被引量：
2
1
作者
姚家成
夏珍珍
黄粤
皮婷
梅枫
何冬兰
程国军
刘涛
李晓华
机构
中南民族大学生命科学学院/微生物资源与利用湖北省工程技术研究中心
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期81-87,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31070087
30570046)
+3 种基金
湖北省自然科学基金重点项目(2011CDA079
2008CDB076)
中央高校基本科研业务费专项(CZW16005
YCZW15104)
文摘
对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达,并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化,为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依据。通过PCR扩增获得agnH全长基因(585bp),构建重组质粒pET28a(+)-agnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,研究不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对重组质粒pET28a(+)-agnH诱导表达的影响,用不同浓度的咪唑洗脱液洗脱重组蛋白,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。结果表明:在IPTG浓度为0.4mmol/L、诱导温度为25℃且诱导时间为25h条件下,AgnH蛋白表达量较高;在250mmol/L的咪唑洗脱液洗脱下,得到浓度较高的AgnH蛋白。
关键词
根癌土壤杆菌scuec1菌株
尼古丁降解代谢
agnH基因
基因克隆
蛋白表达与纯化
Keywords
Agrobacterium tumefaciens strain
scuec
1
nicotine degrading metabolism
agnH gene
gene cloning
expression and purification of protein
分类号
Q939.9 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
高Vir毒力根癌农杆菌AGL-1菌株介导丝状真菌转化研究进展和应用
被引量：
4
2
作者
陈璨
蒋冬花
齐育平
曹丽凌
黄娜
孙青
机构
浙江师范大学化学与生命科学学院
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第2期80-85,共6页
基金
国家自然科学基金(31070008
31270061)
文摘
根癌农杆菌介导的真菌转化(ATMT),是分离真菌基因和分析基因功能的重要方法。目前有多种农杆菌菌株可运用于ATMT法,例如LB4404、C58C1、EHA104、AGL-1等。其中AGL-1菌株因其具有Vir毒力高、转化效率高、稳定性好等诸多优点,近年来有关AGL-1菌株高效转化丝状真菌的应用越来越多。就其转化机制、转化过程、转化率影响因素的最新研究进展进行概述。
关键词
根
癌
农
杆菌
AGL-
1
菌
株
丝状真
菌
T-DNA
影响因素
Keywords
Agrobacterium tumefacien
strain AGL-
1
filamentous fungi
T-DNA
influencing factors
分类号
Q939.96 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
辅酶Q_(10)高产菌株的选育
被引量：
8
3
作者
刘克杉
吴文芳
韩斯琴
徐梅
吕安国
孙静波
机构
中国科学院沈阳应用生态研究所
中国科学院研究生院
辽宁省人民医院药剂科
出处
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期89-92,共4页
文摘
以根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)1.1416为出发菌株,考察了紫外线(UV)、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(NTG)和硫酸二乙脂(DES)对该菌株产生辅酶Q10能力的诱变效应,并结合辅酶Q10合成途径设计了快速筛选辅酶Q10高产菌株的模型。结果表明:NTG和DES交替诱变处理根癌土壤杆菌1.1416具有较好的诱变效果,筛选到的突变株AGR0619和AGR0610的辅酶Q10总产量分别提高了137.49%和156.07%。
关键词
辅酶Q
1
0
高产
菌
株
根
癌
土壤
杆菌
选育
诱变效应
亚硝基胍
快速筛选
合成途径
诱变效果
诱变处理
紫外线
DES
NTG
总产量
突变
株
硫酸
甲基
Keywords
Agrobacterium tumefaciens
1
.
1
4
1
6
Coenzyme Q
1
0
mutagenesis
screening
分类号
TQ925.9 [轻工技术与工程—发酵工程]
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化
姚家成
夏珍珍
黄粤
皮婷
梅枫
何冬兰
程国军
刘涛
李晓华
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
高Vir毒力根癌农杆菌AGL-1菌株介导丝状真菌转化研究进展和应用
陈璨
蒋冬花
齐育平
曹丽凌
黄娜
孙青
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2013
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
辅酶Q_(10)高产菌株的选育
刘克杉
吴文芳
韩斯琴
徐梅
吕安国
孙静波
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
8
在线阅读
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职称材料
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