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题名国槐遗传转化体系的优化
被引量：8
- 1
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作者
张晓英
甘敬
尹伟伦
朱祯
王华芳
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机构
北京林业大学生物科学与技术学院
北京市琅山苗圃
北京市园林绿化局
中国科学院遗传与发育生物学研究所
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出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期20-26,F0003,共8页
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基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2001AA244041)
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文摘
采用根癌农杆菌介导的国槐叶盘转化法,在建立修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)转化体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行研究。结果表明:国槐叶片需在黑暗条件下在MS培养基上预培养5天,农杆菌菌株选用GV3101,农杆菌共培养3天较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.7,感染时间10min;侵染前的菌液和共培养基中添加200μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)对国槐遗传转化有明显的促进作用;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)500mg·L-1最好。PCR和Southern blotting检测证实sck基因已整合到国槐基因组中。
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关键词
国槐
根癌土壤农杆菌
乙酰丁香酮
遗传转化
槐尺蠖
抗虫基因
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Keywords
Sophora japonica
Agrobacterium tumefaciens
acetosyringone
genetic transformation
Semiothisa cinerearia
insect-resistant genes
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分类号
S718.46
[农业科学—林学]
Q943.2
[生物学—植物学]
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题名国槐离体再生及抗虫基因sck的转导
被引量：6
- 2
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作者
张晓英
王华芳
朱祯
王天祥
尹伟伦
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机构
北京林业大学生物科学与技术学院
中国科学院遗传与发育生物学研究所
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出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期34-38,F0003,共6页
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基金
国家高技术研究发展计划(863计划) (2001AA244041)
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文摘
以国槐叶片作为外植体,筛选出诱导不定芽分化的最佳培养基;利用根癌农杆菌介导法将经过修饰的广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck(Signal-CpTI-KDEL)导入国槐。国槐叶片与农杆菌共培养结束后,转移至筛选培养基MS+BA3 mg·L-1+IAA0·05 mg·L-1+G418 8 mg·L-1+Cef 500 mg·L-1上。不定芽在培养基1/2MS+IBA1·0 mg·L-1+G418 10 mg·L-1+Cef 100 mg·L-1上进一步培养获得完整再生植株。通过PCR和Southern blotting检测证明,修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck已成功导入国槐细胞。
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关键词
国槐
根癌土壤农杆菌
豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck
基因转导
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Keywords
Sophora japonica
Agrobacterium tumefaciens
cowpea trypsin inhinitor（CpTI） gene sck
gene transformation
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分类号
S718.46
[农业科学—林学]
Q943.2
[生物学—植物学]
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题名国槐转雪花莲凝集素基因及抗蚜性
被引量：7
- 3
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作者
张晓英
甘敬
尹伟伦
朱祯
王华芳
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机构
北京市琅山苗圃
北京市园林绿化局
北京林业大学生物科学与技术学院
中国科学院遗传与发育生物学研究所
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出处
《林业科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期51-55,F0003,共6页
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基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2001AA244041)
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文摘
通过农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素基因(gna)导入国槐叶片,获得转基因再生植株,经卡那霉素抗性筛选,PCR和Southern blot检测证实,gna基因已经整合进入国槐基因组中。凝血活性检测表明,大部分转基因植株表现出一定的凝血活性,对照未转化植株的凝血活性很低。室内离体叶片虫试试验进一步证明,转基因植株较非转基因植株有一定的抗蚜虫能力。
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关键词
国槐
雪花莲凝集素
槐蚜
根癌土壤农杆菌
基因转化
虫口密度
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Keywords
Sophora japonica
Snowdrop （Galanthus nivalis） agglutinin （GNA）
Aphis medicaginis
Agrobacterium tumefaciens
genetic transformation
insect density
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分类号
S718.46
[农业科学—林学]
Q943.2
[生物学—植物学]
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