根癌农杆菌介导TA29-Barnase基因转化甘蓝型油菜的研究 被引量：41

1

作者 何业华 熊兴华 +8 位作者 官春云 李栒 林良斌 陈社员 刘忠松 李文彬 钟军 刘春林 周小云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期615-620,共6页

经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg&... 经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg·L-1BA +10mg·L-1Km +30 0mg·L-1Carb培养基上进行选择 ,转化率为 8 8% ,PCR检测和Southern杂交检测证明外源基因已整合了甘蓝型油菜基因组中。 展开更多

关键词 根癌农杆菌介导 TA29-Barnase基因 基因转化 甘蓝型油菜 雄性不育

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根癌农杆菌介导的水稻纹枯病菌转化系统的建立 被引量：10

2

作者 杨迎青 杨媚 +3 位作者 李明海 李勇 贺晓霞 周而勋 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期617-622,共6页

为建立水稻纹枯病菌的T-DNA插入诱变转化系统,以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1ⅠA)强致病力菌株GD118为转化的初始菌株,从预诱导时间、共培养时间、共培养时乙酰丁香酮的浓度、共培养温度和共培养时固体诱导培养基(SIM)的pH值等... 为建立水稻纹枯病菌的T-DNA插入诱变转化系统,以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1ⅠA)强致病力菌株GD118为转化的初始菌株,从预诱导时间、共培养时间、共培养时乙酰丁香酮的浓度、共培养温度和共培养时固体诱导培养基(SIM)的pH值等5个方面对转化条件进行了优化,成功地建立了适合于水稻纹枯病菌根癌农杆菌介导转化(ATMT)的优化系统。这个优化系统的转化条件如下:以30μg/mL的潮霉素B作为转化子的筛选浓度,预诱导8h,共培养20h,共培养时固体诱导培养基上的乙酰丁香酮浓度为200μmol/L,共培养温度25℃,共培养时固体诱导培养基pH5.6～5.8。采用这个系统筛选到的转化子继代培养5代后,在含30μg/mL潮霉素B的PDA平板上仍表现明显的抗性。从得到的转化子中随机抽取10个,利用根据抗潮霉素hph基因设计的特异性引物进行PCR扩增,转化子均能扩增出500bp左右的预期条带;与此同时,以4个根癌农杆菌作为阳性对照,用根癌农杆菌Vir基因特异引物对转化子进行PCR扩增,以排除转化子受农杆菌污染所致的假阳性,结果表明:4个根癌农杆菌均能扩增出Vir基因条带(730bp),而10个转化子均未能扩增出相应条带。以上两个PCR扩增的实验结果清楚地表明,T-DNA已经插入到目标菌株GD118中。 展开更多

关键词 水稻纹枯病 立枯丝核菌 根癌农杆菌介导转化 T-DNA插入诱变 方法

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根癌农杆菌介导花生高效遗传转化体系的优化 被引量：13

3

作者 邱金梅 温世杰 +1 位作者 刘海燕 梁炫强 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期208-211,共4页

本文研究表面活性剂(MES,methyl ester sulfonate)、真空渗入法和二次侵染对提高花生转化效率的影响,建立了一种农杆菌介导的花生快速高效遗传转化体系。该体系以带子叶的胚轴为外植体,在OD600为0.7的菌液中,加入150mg/L的MES,40kPa真... 本文研究表面活性剂(MES,methyl ester sulfonate)、真空渗入法和二次侵染对提高花生转化效率的影响,建立了一种农杆菌介导的花生快速高效遗传转化体系。该体系以带子叶的胚轴为外植体,在OD600为0.7的菌液中,加入150mg/L的MES,40kPa真空处理10min,共培养3d后进行二次侵染。采用该体系可显著提高遗传转化率,GUS基因阳性表达率最高,达73.3%。 展开更多

关键词 花生 根癌农杆菌介导 遗传转化

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根癌农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系的研究 被引量：9

4

作者 李瑞美 郑回勇 +3 位作者 陈永快 吴水金 鞠玉栋 吴松海 《江西农业学报》 CAS 2006年第2期22-25,共4页

采用根癌农杆菌介导法将苏云金氏芽孢杆菌毒蛋白B.t基因cryIA转入甘蔗胚性愈伤组织中,建立农杆菌转化甘蔗的遗传转化体系,获得13棵再生植株。经GUS及PCR检测,cryIA确实已转移到甘蔗幼苗中,GUS在再生植株中也得到瞬时表达。

关键词 甘蔗 根癌农杆菌介导 遗传转化

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根癌农杆菌介导脂肪酶在无孢黑曲霉中的高效表达 被引量：3

5

作者 潘力 王云艳 +2 位作者 王斌 何攀 李俊星 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期84-89,共6页

黑曲霉(Aspergillus niger)具有高效的蛋白表达和分泌能力.为实现异源蛋白在无孢黑曲霉中的高效重组表达,在优化遗传筛选标记的基础上,建立了根癌农杆菌介导的、以潮霉素抗性基因为筛选标记的黑曲霉转化体系.利用该体系介导米黑根毛霉... 黑曲霉(Aspergillus niger)具有高效的蛋白表达和分泌能力.为实现异源蛋白在无孢黑曲霉中的高效重组表达,在优化遗传筛选标记的基础上,建立了根癌农杆菌介导的、以潮霉素抗性基因为筛选标记的黑曲霉转化体系.利用该体系介导米黑根毛霉脂肪酶(RML)转化黑曲霉SH-1,通过PCR鉴定、酶活检测、镍柱亲和层析及SDS-PAGE电泳检测等确定成功获得了RML的黑曲霉转化子,并通过发酵条件优化实现了RML的高效表达,对硝基苯酚比色法测得转化子酶活最高可达15 U/mL,是其在酵母中表达水平的10倍以上. 展开更多

关键词 无孢黑曲霉 根癌农杆菌介导转化 米黑根毛霉脂肪酶 基因表达

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通过根癌农杆菌介导法将抗虫基因CpTI导入辣椒的研究 被引量：13

6

作者 柳建军 于洪欣 +1 位作者 崔德才 于彦丽 《山东农业科学》 2001年第4期15-16,共2页

研究建立了一套简单、高效的辣椒遗传转化系统。利用根癌农杆菌介导的带柄子叶转化法将豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因转入辣椒栽培品种益都羊角椒中。对获得的 3 3株卡那霉素 (Km)抗性再生植株进行PCR检测 ,证明有

关键词 辣椒 根癌农杆菌介导法 转基因植株 抗虫基因 胰蛋白酶抑制剂基因

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根癌农杆菌介导的甘蔗遗传转化 被引量：3

7

作者 吴转娣 刘新龙 +3 位作者 姚丽 苏火生 张敏 吴才文 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期150-155,共6页

综述开展甘蔗基因工程育种工作20多年来,从最初的利用农杆菌介导法研究抗除草剂和抗虫转基因成功,到目前高转化效率的转基因方法应用过程中取得的成果,分析影响农杆菌转化甘蔗的关键因素,并对农杆菌介导的甘蔗遗传转化研究前景作了展望。

关键词 根癌农杆菌介导法 甘蔗 遗传转化

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根癌农杆菌介导的玉米萌动胚NPR1基因遗传转化 被引量：4

8

作者 秦新民 曾德龙 +1 位作者 李惠敏 覃屏生 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第14期2985-2988,共4页

以玉米萌动胚为外植体,研究了影响根癌农杆菌介导的玉米NPR1基因遗传转化的若干因素。结果表明,在感染液和共培养基中分别都加入100μmol/L乙酰丁香酮,根癌农杆菌LBA4404的菌液,浸染时间12 h,40 mg/L潮霉素进行转化苗筛选,为转化的适宜... 以玉米萌动胚为外植体,研究了影响根癌农杆菌介导的玉米NPR1基因遗传转化的若干因素。结果表明,在感染液和共培养基中分别都加入100μmol/L乙酰丁香酮,根癌农杆菌LBA4404的菌液,浸染时间12 h,40 mg/L潮霉素进行转化苗筛选,为转化的适宜条件。对转化苗进行PCR检测,证明外源目的基因已整合到玉米基因组中。 展开更多

关键词 玉米 根癌农杆菌介导 遗传转化 NPR1基因 萌动胚

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根癌农杆菌介导的水稻遗传转化影响因素研究 被引量：5

9

作者 王育花 田继微 肖国樱 《江西农业学报》 CAS 2006年第3期60-63,共4页

从组织培养体系和根癌农杆菌侵染体系两个方面,对影响根癌农杆菌介导的水稻遗传转化频率的各种因素作了具体的分析和综述。

关键词 水稻 根癌农杆菌介导 遗传转化 影响因素

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根癌农杆菌介导抗菌肽基因转化大豆的研究 被引量：2

10

作者 李春风 张兴政 +2 位作者 张洁莉 韩阳 宋书宏 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期348-352,共5页

为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料,采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白融合基因转入大豆胚尖外植体。结果表明,60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选;在共培养时添加200μmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基... 为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料,采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白融合基因转入大豆胚尖外植体。结果表明,60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选;在共培养时添加200μmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基因的转化;在生根培养基中不添加卡那霉素更有利于转化苗的成活。目的基因特异的PCR检测和绿色荧光蛋白表达分析,发现抗菌肽基因已转入大豆,并得到表达。 展开更多

关键词 大豆 遗传转化 胚尖外植体 抗菌肽基因 根癌农杆菌介导

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根癌农杆菌介导法获得烟草转人骨形成蛋白-3成熟肽基因植株 被引量：5

11

作者 高书颖 郭蔼光 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第6期1128-1133,共6页

利用冻融法将质粒 p CAMBIA- h BMP- 3 m直接转入根癌农杆菌 LBA440 4 ,以烟草无菌苗叶盘为外植体 ,通过农杆菌介导法进行遗传转化 ,获得了在含 2 5 mg/L潮霉素 (Hy-gromycin,Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株 ,经 PCR检测呈阳性 ,初... 利用冻融法将质粒 p CAMBIA- h BMP- 3 m直接转入根癌农杆菌 LBA440 4 ,以烟草无菌苗叶盘为外植体 ,通过农杆菌介导法进行遗传转化 ,获得了在含 2 5 mg/L潮霉素 (Hy-gromycin,Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株 ,经 PCR检测呈阳性 ,初步鉴定并筛选整合了人骨形成蛋白 - 展开更多

关键词 烟草 人骨形成蛋白-3成熟肽 hBMP-3m 根癌农杆菌介导法 转基因

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根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立 被引量：2

12

作者 赵冬梅 何佳昱 +2 位作者 杨志辉 朱杰华 徐进 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第9期83-87,共5页

为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果... 为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。 展开更多

关键词 致病疫霉 根癌农杆菌介导的转化 T—DNA 转化效率

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根癌农杆菌介导的人骨形成蛋白-3成熟肽基因向油菜转化的研究 被引量：4

13

作者 张大鹏 郭蔼光 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第5期41-44,共4页

　用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4～5d苗龄的下胚轴;... 　用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4～5d苗龄的下胚轴;根癌农杆菌为LBA4404,其Ti质粒pCAMBIA-hBMP3m含hBMP-3m基因。切取2mm左右的下胚轴侵染根癌农杆菌后在分化培养基(MS+5.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA)上共培养2d,然后转到附加25mg/L潮霉素和500mg/L羧苄青霉素的分化培养基上。切下分化出的茎芽,插入附加25mg/L潮霉素的生根培养基(MS+0.4mg/LIBA)中,形成完整的植株。经PCR检测和Southernblot分析,证实hBMP-3m基因已插入到油菜细胞基因组中。 展开更多

关键词 根癌农杆菌介导 人骨形成蛋白-3成熟肽基因 油菜 下胚轴 转基因 药用蛋白基因

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根癌农杆菌介导的金边狗牙根遗传转化条件的优化 被引量：5

14

作者 胡繁荣 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2005年第2期15-18,共4页

为建立根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens,菌株EHA105)介导的金边狗牙根〔Cynodondactylon(L.)Pers.〕最佳遗传转化体系,以葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的瞬间表达率为指标,从愈伤组织继代时间、根癌农杆菌侵染时间、负压条件及光照时... 为建立根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens,菌株EHA105)介导的金边狗牙根〔Cynodondactylon(L.)Pers.〕最佳遗传转化体系,以葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的瞬间表达率为指标,从愈伤组织继代时间、根癌农杆菌侵染时间、负压条件及光照时间等方面进行了筛选。结果表明,根癌农杆菌介导的金边狗牙根最佳的转化体系是:以继代培养2周的愈伤组织为起始材料,根癌农杆菌介导感染10min,经负压处理(抽拉20次)并在全光条件下共培养转化。 展开更多

关键词 根癌农杆菌介导 狗牙根 转化条件 优化 金 遗传转化体系 愈伤组织 葡萄糖醛酸 继代时间 光照时间 继代培养 负压处理 表达率 糖苷酶 共培养 最佳 侵染 压条

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根癌农杆菌介导的S6PDH基因转化香蕉研究 被引量：1

15

作者 匡云波 赖钟雄 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期103-112,共10页

研究以香蕉栽培品种＂天宝蕉＂（Musaspp.cv.Tianbao）横切薄片（Thin cross-sections,TCSs）为材料,采用根癌农杆菌介导的方法,进行S6PDH基因转化香蕉的研究。结果表明,在横切薄片继代增殖培养基M4中添加5%~7%（V/V）的椰汁明显增强了... 研究以香蕉栽培品种＂天宝蕉＂（Musaspp.cv.Tianbao）横切薄片（Thin cross-sections,TCSs）为材料,采用根癌农杆菌介导的方法,进行S6PDH基因转化香蕉的研究。结果表明,在横切薄片继代增殖培养基M4中添加5%~7%（V/V）的椰汁明显增强了香蕉芽苗的生长势;GUS基因瞬时表达检测表明,长势旺盛的香蕉芽苗（直径为7~8 mm）适宜作为香蕉遗传转化的受体材料,横切薄片厚度以2 mm左右为佳;采用两步法进行抗性芽的筛选得到37个抗性芽苗,生根移栽后获得31株成活苗;目的基因S6PDH和报告基因GUS的PCR检测表明其中4株是转基因植株。该研究为将蔷薇科山梨醇代谢途径引入香蕉以提高其耐渗透胁迫的能力奠定了重要的基础。 展开更多

关键词 香蕉 S6PDH 根癌农杆菌介导 转基因植株

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根癌农杆菌介导库拉索芦荟遗传转化因素优化

16

作者 潘颖南 蒙平 +3 位作者 何铁光 苏宾 陈廷速 李杨瑞 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期125-128,共4页

以美国库拉索芦荟的横切薄片(transversethincelllayer,tTCL)作为转化外植体,初步研究了以根癌 农杆菌介导的多种因子对芦荟遗传转化的影响。结果表明:菌株EHA105比LBA4404及AGL1转化率高; 除了乙酰丁香酮(acetosyringone)外,菌液... 以美国库拉索芦荟的横切薄片(transversethincelllayer,tTCL)作为转化外植体,初步研究了以根癌 农杆菌介导的多种因子对芦荟遗传转化的影响。结果表明:菌株EHA105比LBA4404及AGL1转化率高; 除了乙酰丁香酮(acetosyringone)外,菌液的预处理和重悬液的pH值也是影响转化的主要因子;菌液的预处 理和适合的蔗糖浓度对转化也有促进作用;感染时间为12～18min,共培养的温度和时间分别以25℃及5d 为佳。 展开更多

关键词 根癌农杆菌介导 遗传转化 美国库拉索芦荟 优化 乙酰丁香酮 cell 主要因子 蔗糖浓度 感染时间 预处理 外植体 转化率 pH值 共培养 菌液

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根癌农杆菌介导大豆转化LePT1基因的研究

17

作者 张兴政 王昌陵 +2 位作者 卢福荣 韩阳 宋书宏 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期31-34,共4页

采用根癌农杆菌介导大豆胚尖的遗传转化方法将番茄的LePT1基因导入辽豆17基因组中,以期获得能够高效利用磷素的转基因大豆新品种。PCR结果表明,T0和T1代植株基因组均扩增出1.6 kb的目的条带,测序并进行在线Blast比对表明该条带与LePT1... 采用根癌农杆菌介导大豆胚尖的遗传转化方法将番茄的LePT1基因导入辽豆17基因组中,以期获得能够高效利用磷素的转基因大豆新品种。PCR结果表明,T0和T1代植株基因组均扩增出1.6 kb的目的条带,测序并进行在线Blast比对表明该条带与LePT1基因相同,与试验预期相一致。结果表明LePT1基因已成功转入T0代植株,并在T1代大豆基因组中稳定遗传。 展开更多

关键词 大豆 胚尖 遗传转化 根癌农杆菌介导 LePT1

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根癌农杆菌介导反义蜡质基因获得水稻植株研究初报

18

作者 孟昭河 孟巧霞 +2 位作者 刘永巍 李春光 张景龙 《黑龙江农业科学》 2005年第2期8-12,共5页

采用根癌农杆菌介导法,将水稻反义蜡质基因导入寒地4个水稻品种(系)成熟胚的愈伤组织.这些愈伤组织经连续2次25～50 mg/L潮霉素抗性筛选,获得抗性愈伤组织的转化频率为12.15%～25.95%,经分化培养,不同品种的绿苗转化频率分别为2.49%～4.... 采用根癌农杆菌介导法,将水稻反义蜡质基因导入寒地4个水稻品种(系)成熟胚的愈伤组织.这些愈伤组织经连续2次25～50 mg/L潮霉素抗性筛选,获得抗性愈伤组织的转化频率为12.15%～25.95%,经分化培养,不同品种的绿苗转化频率分别为2.49%～4.43%.分化成苗的植株经GUS检测,80%以上的植株叶片呈阳性反应,显示兰色.经PCR检测,也能扩增出外源基因相应的DNA片断,证明外源基因已整合到转基因植株中. 展开更多

关键词 植株 反义蜡质基因 根癌农杆菌介导 初报 转化频率 愈伤组织 水稻 外源基因 DNA片断 抗性筛选

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根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统的构建 被引量：3

19

作者 陈凤 王坤 +3 位作者 银超 李德明 任楠 李俊星 《安徽农业科学》 CAS 2012年第16期8800-8805,共6页

[目的]建立根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统,探讨利用泡盛曲霉表达异源蛋白的可行性。[方法]从国内主要菌种库中购买泡盛曲霉菌株,根据分泌蛋白图谱分析确定合适的宿主菌,在此基础上通过药物敏感性分析确定遗传转化的选择标记,并... [目的]建立根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统,探讨利用泡盛曲霉表达异源蛋白的可行性。[方法]从国内主要菌种库中购买泡盛曲霉菌株,根据分泌蛋白图谱分析确定合适的宿主菌,在此基础上通过药物敏感性分析确定遗传转化的选择标记,并利用构建的泡盛曲霉遗传转化体系对米黑根毛霉脂肪酶基因RML进行转化、表达研究,通过转化子鉴定及性质分析考察泡盛曲霉作为异源蛋白表达系统的可行性。[结果]通过分泌蛋白图谱分析确定泡盛曲霉CBS115.52和CICC2257作为异源蛋白表达的宿主菌;药物敏感性试验确定潮霉素抗性基因(HygBr)作为有效的遗传选择标记;在此基础上,利用根癌农杆菌介导的转化方法(agrobacterium tumefaciensmediated transformation,ATMT),将带有HygBr的质粒pHGW-amdS成功导入泡盛曲霉宿主菌CBS115.52,建立以HygBr为选择标记的泡盛曲霉遗传转化体系。利用该体系,介导米黑根毛霉脂肪酶(Rhizomucor miehei lipase,RML)的表达载体转化泡盛曲霉,通过底物水解试验、SDS-PAGE及Western blot确定RML基因已在泡盛曲霉中表达。[结论]该研究证明了根癌农杆菌介导转化泡盛曲霉作为异源蛋白的表达体系具有潜在的可行性。 展开更多

关键词 泡盛曲霉 根癌农杆菌介导转化(ATMT) 潮霉素抗性基因 米黑根毛霉脂肪酶(RML)

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一种根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的新方法 被引量：1

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作者 鲍广稳 祝嫦巍 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1168-1171,共4页

设计了一种简单高效的根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的方法。利用嵌套平板的方法,在内层平板培养平菇菌丝,待菌丝生长至平板边缘,将经诱导的根癌农杆菌与共培养培养基(CCM)混合,倒入内层平板与外层平板的间隙中,与正在生长中的菌丝共培... 设计了一种简单高效的根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的方法。利用嵌套平板的方法,在内层平板培养平菇菌丝,待菌丝生长至平板边缘,将经诱导的根癌农杆菌与共培养培养基(CCM)混合,倒入内层平板与外层平板的间隙中,与正在生长中的菌丝共培养,实现转化,利用潮霉素抗性筛选获得转化子,平均转化效率33%左右。此方法操作简单,周期短,极易扩大实验规模,为平菇的分子育种以及其他丝状真菌的遗传转化提供参考。 展开更多

关键词 根癌农杆菌介导转化 菌丝体 平菇

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