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3种核酸提取方法在病媒生物携带肠道致病菌检测中的应用比较
1
作者
张思祺
何建安
+2 位作者
赵纯中
闫俊宇
刘国平
《中国动物检疫》
CAS
2024年第12期95-102,共8页
为比较并筛选出简便、经济、高效的提取病媒生物携带肠道致病菌核酸的方法,采用3种代表性核酸提取方法一一柱式提取法、磁珠吸附法、盐析法,从模拟感染沙门菌、志贺菌及大肠杆菌的苍蝇和样品中提取核酸,并系统比较核酸质量浓度、荧光定...
为比较并筛选出简便、经济、高效的提取病媒生物携带肠道致病菌核酸的方法,采用3种代表性核酸提取方法一一柱式提取法、磁珠吸附法、盐析法,从模拟感染沙门菌、志贺菌及大肠杆菌的苍蝇和样品中提取核酸,并系统比较核酸质量浓度、荧光定量PCR(qPCR)检测Ct值和细菌回收率,来全面评估各种方法的提取效率。结果显示:3种核酸提取方法中柱式提取法及盐析法均能成功从模拟感染样品中提取核酸,磁珠吸附法未能全部成功提取;通过比较核酸质量浓度、qPCR检测Ct值及回收率,柱式核酸提取法的提取效率最高。结果表明,在检测病毒载量较低的样品,如病媒生物样品时,可选择性价比高、操作简便且结果准确的核酸提取方法(如柱式提取法),以提升检测结果的准确性。
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关键词
肠道致病菌
核酸提取方法
病媒生物
口岸检疫
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职称材料
实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较
被引量：
3
2
作者
罗忠永
王印
杨泽晓
《动物医学进展》
北大核心
2016年第11期53-56,共4页
对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>...
对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法。提取效率为酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法>试剂盒提取法。表明各提取方法效果差异显著(P<0.01),为实验室核酸提取提供了参考。
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关键词
核酸提取方法
实时荧光定量PCR
提取
效果
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题名
3种核酸提取方法在病媒生物携带肠道致病菌检测中的应用比较
1
作者
张思祺
何建安
赵纯中
闫俊宇
刘国平
机构
长江大学动物科学技术学院
深圳国际旅行卫生保健中心(深圳海关口岸门诊部)
出处
《中国动物检疫》
CAS
2024年第12期95-102,共8页
基金
国家重点研发计划项目(2022YFC2302804)
口岸重要消化道病原体传播风险预警技术研究项目。
文摘
为比较并筛选出简便、经济、高效的提取病媒生物携带肠道致病菌核酸的方法,采用3种代表性核酸提取方法一一柱式提取法、磁珠吸附法、盐析法,从模拟感染沙门菌、志贺菌及大肠杆菌的苍蝇和样品中提取核酸,并系统比较核酸质量浓度、荧光定量PCR(qPCR)检测Ct值和细菌回收率,来全面评估各种方法的提取效率。结果显示:3种核酸提取方法中柱式提取法及盐析法均能成功从模拟感染样品中提取核酸,磁珠吸附法未能全部成功提取;通过比较核酸质量浓度、qPCR检测Ct值及回收率,柱式核酸提取法的提取效率最高。结果表明,在检测病毒载量较低的样品,如病媒生物样品时,可选择性价比高、操作简便且结果准确的核酸提取方法(如柱式提取法),以提升检测结果的准确性。
关键词
肠道致病菌
核酸提取方法
病媒生物
口岸检疫
Keywords
intestinal pathogenic bacteria
nucleic acid extraction methods
vector
port quarantine
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较
被引量：
3
2
作者
罗忠永
王印
杨泽晓
机构
四川农业大学动物医学院动物检疫实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2016年第11期53-56,共4页
基金
"十二五"国家科技支持计划项目(2013BAD12B04)
文摘
对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法。提取效率为酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法>试剂盒提取法。表明各提取方法效果差异显著(P<0.01),为实验室核酸提取提供了参考。
关键词
核酸提取方法
实时荧光定量PCR
提取
效果
Keywords
nucleic acid extraction method
real-time PCR
extraction effect
分类号
S854.4 [农业科学—临床兽医学]
Q52 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
3种核酸提取方法在病媒生物携带肠道致病菌检测中的应用比较
张思祺
何建安
赵纯中
闫俊宇
刘国平
《中国动物检疫》
CAS
2024
0
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职称材料
2
实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较
罗忠永
王印
杨泽晓
《动物医学进展》
北大核心
2016
3
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