结核分枝杆菌H37Ra诱导核苷酸结合寡聚结构域2基因敲除(NOD2-/-)小鼠的1型辅助T（Th1）细胞型免疫应答 被引量：5

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作者 陈少红 张倩 +3 位作者 刘俊彤 汤业珍 韩怀钦 梁锦屏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期577-582,共6页

目的探讨1型辅助T(Th1)细胞的细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)及多功能T细胞在感染结核分枝杆菌H37Ra的核苷酸结合寡聚结构域2基因敲除(NOD2-/-)小鼠中的作用.方法NOD2-/-小鼠与野生型C57BL/6小鼠气管分别滴入MTB减毒... 目的探讨1型辅助T(Th1)细胞的细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)及多功能T细胞在感染结核分枝杆菌H37Ra的核苷酸结合寡聚结构域2基因敲除(NOD2-/-)小鼠中的作用.方法NOD2-/-小鼠与野生型C57BL/6小鼠气管分别滴入MTB减毒株H37Ra建立肺部感染模型并设立生理盐水对照组,每组10只.4周后,取肺组织进行HE染色及病理评分;ELISA检测肺组织匀浆中TNF-α和IFN-γ含量;流式细胞术检测脾细胞中多功能CD4+T/CD8+T细胞的比例.结果NOD2-/-小鼠感染H-37Ra后肺组织炎症加重,肺组织TNF-α和IFN-γ含量增加.与生理盐水组相比,两种小鼠感染后,CD4+/CD8+T细胞中TNF-α+、IFN-γ+单阳性细胞及TNF-α+IFN-γ+细胞均显著增加;与C57BL/6小鼠感染组相比,NOD2-/-小鼠感染组体内TNF-α+CD4+T细胞、IFN-γ+CD4+T细胞及IFN-γ+CD8+T细胞显著增加.结论H37Ra可诱导NOD2-/-小鼠的Th1细胞型免疫应答反应. 展开更多

关键词 结核分枝杆菌(MTB) 核苷酸结合寡聚结构域2(nod2) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) γ干扰素(IFN-γ) 多功能T细胞

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核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用 被引量：4

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作者 曹运兰 胡龙江 宋耀明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期801-806,共6页

目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用。方法选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为... 目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用。方法选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为单纯冠心病组(n=40)、单纯2型糖尿病组(n=20)、2型糖尿病并发冠心病组(n=40)及正常对照组(n=30)。分离外周血单个核细胞及血浆。采用RT-q PCR、Western blot分别检测各组外周血单个核细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosisassociated speck-like protein,ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA及蛋白表达情况,ELISA法检测各组血浆中IL-1β含量。结果单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组外周血单个核细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均较正常对照组显著增高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组ASC、Caspase-1 mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05),而2型糖尿病并发冠心病组NLRP3蛋白在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。同时,测得单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量分别为(24.05±1.00)、(22.86±1.66)、(26.85±1.45)ng/L,较正常对照组(12.53±2.79)ng/L均显著升高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。结论 NLRP3炎性体的异常激活可促进2型糖尿病并发冠心病病理过程的发生、发展,其可能成为防治2型糖尿病并发冠心病的新靶点。 展开更多

关键词 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 炎性体 冠心病 2型糖尿病 IL-1Β

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沙门氏菌感染后鸡血液中核苷酸结合寡聚化结构域1基因的表达量变化分析

3

作者 陶志云 朱春红 +4 位作者 宋迟 宋卫涛 徐文娟 姬改革 李慧芳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期531-536,共6页

为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域1（nucleotide-binding oligomerization domain containing 1,NOD1）在抗沙门氏菌感染过程中的作用,本试验采用实时荧光定量PCR的方法检测了血液中NOD1基因在转录水平的表达量变化。试验分为3组,鸡白痢... 为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域1（nucleotide-binding oligomerization domain containing 1,NOD1）在抗沙门氏菌感染过程中的作用,本试验采用实时荧光定量PCR的方法检测了血液中NOD1基因在转录水平的表达量变化。试验分为3组,鸡白痢沙门氏菌组、肠炎沙门氏菌组和对照组,分别在感染后1、3、5、7d检测NOD1mRNA的表达水平。结果显示,感染后的1~7d,鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌感染后的表达量变化趋势不同,其中,鸡白痢沙门氏菌感染后表达量呈先上升再下降然后再上升的波浪形变化,而肠炎沙门氏菌感染后的表达量呈逐渐上升趋势。与对照组相比,血液中NOD1mRNA的水平,在鸡白痢沙门氏菌感染后的3和7d的表达量显著高于对照组（P〈0.05）,在肠炎沙门氏菌感染后的5、7d的表达量显著高于对照组（P〈0.05）。提示,鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌感染后均可促进鸡血液中NOD1基因的表达,NOD1基因可能参与了机体抗沙门氏菌感染过程。 展开更多

关键词 核苷酸结合寡聚化结构域1(nod1) 鸡 血液 沙门氏菌

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基于NOD2介导的AMPK/mTOR信号通路探讨宫颈癌细胞恶性行为的机制

4

作者 杜瑞亭 伍东月 +1 位作者 郭清民 靳冬梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第2期316-324,共9页

目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法 生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC... 目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法 生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC)以及NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响。通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析。Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达。24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果 在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P<0.05)。NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P<0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P<0.05)。RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关。与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P<0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P<0.05)。与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P<0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P<0.05)。结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活。 展开更多

关键词 核苷酸结合寡聚化结构域受体2 AMP活化蛋白激酶 雷帕霉素靶蛋白 宫颈癌细胞 自噬

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电针对急性心肌梗死小鼠心肌炎症和嘌呤能2X7受体信号通路的影响

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作者 钱丹颖 闫煜杭 +3 位作者 刘肖儿 鲁晓涵 白桦 卢圣锋 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1970-1975,共6页

目的:观察电针内关穴对急性心肌梗死(AMI)小鼠心肌炎症以及嘌呤能2X7受体/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(P2X7R/NLRP3)信号通路的影响,探讨电针改善心肌梗死的潜在机制。方法:将成年的C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组以及电针组... 目的:观察电针内关穴对急性心肌梗死(AMI)小鼠心肌炎症以及嘌呤能2X7受体/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(P2X7R/NLRP3)信号通路的影响,探讨电针改善心肌梗死的潜在机制。方法:将成年的C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组以及电针组。通过冠状动脉左前降支结扎法建立AMI模型。造模后30 min进行1次双侧内关穴电针干预,在第2、3天同一时间进行1次干预,共3次。干预结束后,采用心电图和酶联免疫吸附试验(ELISA)评估各组小鼠心肌损伤程度;超声心动图检测各组小鼠左心室功能;苏木精-伊红(HE)染色和ELISA评估各组小鼠心肌炎症水平;蛋白质印迹法(WB)检测各组小鼠心脏P2X7R/NLRP3信号通路的相对表达。结果:电针显著改善AMI小鼠的病理性Q波,降低心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平,提高左心室射血分数(EF)和短轴收缩率(FS),减少心肌组织中免疫细胞浸润,降低白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-6(IL-6)水平,并降低P2X7R、NLRP3蛋白的相对表达。结论:电针内关穴可以减轻AMI小鼠的心肌炎症反应并改善心功能,该效应可能是通过抑制P2X7R/NLRP3信号通路实现的。 展开更多

关键词 急性心肌梗死 心肌炎症反应 电针 内关穴 嘌呤能2X7受体 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 白细胞介素-1Β

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四神丸对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织TLR4、NOD2表达的影响 被引量：11

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作者 何兰娟 邓渊 +1 位作者 王燕 朱向东 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期613-618,共6页

目的通过对比大鼠结肠组织中的Toll样受体4(TLR4)和核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)治疗前后水平的变化,从修复肠粘膜屏障的角度探讨四神丸治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。方法UC大鼠模型制备采用三硝基苯磺酸... 目的通过对比大鼠结肠组织中的Toll样受体4(TLR4)和核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)治疗前后水平的变化,从修复肠粘膜屏障的角度探讨四神丸治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。方法UC大鼠模型制备采用三硝基苯磺酸/乙醇溶液灌肠法。将40只大鼠随机分为空白组、模型组、柳氮磺嘧啶组(0.36 g/(kg·d))和中药组(5 g/(kg·d)),通过采用HE染色法、RT-qPCR法、SP法和Western Blot法观察结肠组织中TLR4、NOD2的基因和蛋白表达。结果与空白组相比较,模型组大鼠结肠损伤严重,损伤评分显著增高(P<0.01),TLR4、NOD2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与模型组相比较,各治疗组大鼠结肠损伤有一定程度的恢复,损伤评分显著降低(P<0.01,P<0.05),TLR4、NOD2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论四神丸可以通过提高大鼠的免疫功能,抑制肠道炎症反应,达到治疗UC的目的。 展开更多

关键词 四神丸 溃疡性结肠炎 TOLL样受体4 核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2

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金黄色葡萄球菌促进奶牛乳腺上皮细胞NOD2的表达 被引量：1

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作者 杨彬 吕红发 +2 位作者 孙东波 王建发 武瑞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期741-745,共5页

目的研究金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)表达的影响。方法采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液刺激BMEC,金黄色葡萄球菌以感染复数(MOI)100∶1感染细胞0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5... 目的研究金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)表达的影响。方法采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液刺激BMEC,金黄色葡萄球菌以感染复数(MOI)100∶1感染细胞0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4 h,以MOI 10∶1、20∶1、40∶1、100∶1感染细胞2 h;用(0、10~4、10~5、10~6、10~7、10~8)集落形成单位(CFU)/mL热灭活的金黄色葡萄球菌菌液刺激细胞后,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测NOD2 mRNA和蛋白水平。结果金黄色葡萄球菌在感染细胞0.5~4 h,NOD2 mRNA和蛋白含量较未感染组显著升高,不同MOI的金黄色葡萄球菌感染细胞后,随着MOI的增加,NOD2 mRNA和蛋白水平也显著升高;与对照组相比,不同剂量的热灭活的金黄色葡萄球菌菌液处理细胞的NOD2 mRNA和蛋白含量无显著变化。结论金黄色葡萄球菌促进BMEC NOD2的表达。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 奶牛乳腺上皮细胞 核苷酸结合寡聚化结构域2(nod2)

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NOD2通过调控细胞外基质活性及炎性因子水平介导心肌梗死后心室重构 被引量：3

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作者 李香 刘文俊 +1 位作者 曲春晓 易凡 《中国心血管杂志》 2018年第5期409-414,共6页

目的探讨细胞内模式识别受体——核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)蛋白家族中NOD2蛋白是否参与心肌梗死(MI)后心室重构及相关机制。方法结扎小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型。实时荧光定量PCR检测不同梗死时间假手术组、手术组梗死区、手术... 目的探讨细胞内模式识别受体——核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)蛋白家族中NOD2蛋白是否参与心肌梗死(MI)后心室重构及相关机制。方法结扎小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型。实时荧光定量PCR检测不同梗死时间假手术组、手术组梗死区、手术组非梗死区NOD2的m RNA表达水平,免疫组化染色和Western blot测定梗死28 d心肌组织NOD2的蛋白表达。采用NOD2-/-基因敲除小鼠建立MI模型,实验分为4组:野生/假手术组(WT/Sham组)、NOD2基因敲除/假手术组(NOD2-/-/Sham组)、野生/MI组(WT/MI组)和NOD2基因敲除/MI(NOD2-/-/MI组)。小动物超声心动图测定心室重构指数并判断心功能,Masson和Tunel染色观察小鼠心梗后心肌纤维化程度及细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定梗死心肌组织的促炎细胞因子水平,Western blot和明胶酶谱法检测心肌组织裂解液基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白及活性变化,并用免疫组化染色观察MI后炎性细胞浸润和心脏成纤维细胞转分化成心肌成纤维细胞情况。结果与WT/Sham组相比,WT/MI组非梗死区和梗死区NOD2 m RNA表达水平均升高(均为P <0. 05),其中梗死区NOD2的m RNA表达及蛋白表达最高。超声心动图提示,NOD2缺失能减轻MI后心功能障碍和心室重构的程度; Tunel和Masson染色显示,NOD2-/-/MI组的细胞凋亡和心肌纤维化程度均明显降低(均为P <0. 05)。NOD2缺失还能降低MI区炎性因子水平、炎性细胞的浸润及MMP-9的活性(均为P <0. 05)。结论 NOD2通过调控MMP-9蛋白及活性、炎性介质水平和炎性细胞浸润来介导MI后心室重构过程。 展开更多

关键词 冠状动脉疾病 心室重构 核苷酸结合寡聚化结构域2 基质金属蛋白酶9 炎症

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NOD2促进二乙基亚硝胺诱导小鼠肝组织炎症的机制研究 被引量：1

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作者 许智玲 张斌 张顺财 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期730-737,共8页

目的探讨肝细胞中的模式识别受体NOD2(nucleotide-binding oligomerization domain 2,NOD2)在肝炎症反应过程中的作用及机制。方法以二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)注射的NOD2基因敲除小鼠为Nod2^(△hep)模型组,DEN注射的B6/JNju... 目的探讨肝细胞中的模式识别受体NOD2(nucleotide-binding oligomerization domain 2,NOD2)在肝炎症反应过程中的作用及机制。方法以二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)注射的NOD2基因敲除小鼠为Nod2^(△hep)模型组,DEN注射的B6/JNju-Nod2^(em1Cflox)/Gpt(Nod2^(f/f))小鼠为Nod2^(f/f)模型组,未注射DEN的NOD2基因敲除小鼠为Nod2^(△hep)组,未注射DEN的Nod2^(f/f)小鼠为Nod2^(f/f)组。使用HE染色检测肝病理损伤,使用ALT和AST试剂盒检测血清中ALT和AST水平变化;对小鼠的肝组织进行F4/80免疫组化染色检测肝炎细胞的数量以及qPCR法检测肝细胞炎症因子的基因表达水平及肝细胞NOD2的表达水平;Ki67免疫组化染色和TUNEL染色检测DEN对肝细胞增殖及凋亡的的影响;Western Blot检测肝组织中NF-κB、MAPK和STAT3信号通路相关蛋白分子的表达。结果与Nod2^(f/f)模型组相比,Nod2^(△hep)模型组小鼠肝损伤情况明显减轻,表现为细胞坏死及空泡形成明显减少,血清ALT和AST水平均明显下降(P<0.01);另外与Nod2^(f/f)模型组相比,Nod2^(△hep)模型组中肝组织炎症因子TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-1β的基因表达水平、肝组织F4/80染色阳性细胞数及肝细胞的增殖及凋亡水平均明显下降(P<0.01);Western Blot表达结果表明,Nod2^(△hep)模型组小鼠肝组织中的P38、ERK、JNK、p65以及JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平较Nod2^(f/f)模型组明显下降(P<0.05),而用于对照的Nod2^(△hep)组小鼠与Nod2^(f/f)组小鼠上述各项指标均无明显异常。结论肝NOD2缺失有减轻小鼠肝细胞炎症及坏死的作用,其机制可能与其下调肝组织NF-κB、MAPK和STAT3信号通路相关因子的表达有关。 展开更多

关键词 核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2 肝炎症 信号通路 机制

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NLRP3、AIM2和CASP1基因在慢性阻塞性肺疾病急性加重发病中的作用 被引量：9

10

作者 王国强 牟佳 +6 位作者 李元 袁语泽 王昱博 宋晨雪 谢婧书 郑敬彤 王放 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期130-133,共4页

目的:探讨固有免疫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱天冬酶1(CASP1)基因和白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)炎症因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作期(AECOPD)患者体内的表达情... 目的:探讨固有免疫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱天冬酶1(CASP1)基因和白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)炎症因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作期(AECOPD)患者体内的表达情况,阐明其作用机制。方法:收集健康对照组(12例)和AECOPD患者(20例)的痰液,分别进行痰处理,采用实时荧光定量PCR法检测NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平,通过ELISA法检测痰上清中的IL-1β和IL-18蛋白表达水平。结果:与健康对照组比较,AECOPD组患者NLRP3、AIM2和CASP1基因表达分别上调3.83、1.70和2.42倍,NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平明显增高(P<0.01),AECOPD组患者痰上清中IL-1β和IL-18蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论:NLRP3及AIM2炎性体参与AECOPD的病理过程,其作用机制可能与固有免疫活化有关。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病急性发作期 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 黑素瘤缺乏因子2 半胱天冬酶1 固有免疫

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NLRP3、AIM2、IFI16炎症小体在慢性乙型病毒性肝炎患者PBMC中的活化水平和与HBV感染的相关性分析 被引量：11

11

作者 陈洪涛 陈月 吴诗品 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期322-329,共8页

目的:探讨乙肝病毒(HBV)是否激活了慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)和干扰素诱导蛋白16(IFI16)炎症小体,分析HBV影响炎症小体活化的可能机制... 目的:探讨乙肝病毒(HBV)是否激活了慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)和干扰素诱导蛋白16(IFI16)炎症小体,分析HBV影响炎症小体活化的可能机制.方法:收集感染内科临床确诊CHB患者35例.同时选取健康住院医师28例为对照.以常规淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离健康对照组和CHB患者组静脉血得到PBMCs,采用逆转录、实时荧光定量PCR检测CHB患者组和健康对照组PBMCs NLRP3、AIM2、IFI16、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶1(CASP1)、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平,ELISA法检测两组血清中IL-1β蛋白分泌水平.结果:CHB患者组和健康对照组PBMCs ASC、NLRP3、AIM2、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平及两组血清IL-1β蛋白分泌水平无显著性差异.CHB患者组PBMCs IFI16、CASP1 mRNA表达水平显著上调,且IFI16 mRNA表达水平与患者血清HBV DNA载量显著正相关(r=0.699 8,P<0.01).结论:慢性HBV感染未导致CHB患者PBMCs NLRP3、AIM2炎症小体的活化;尽管HBV DNA可能诱导了CHB患者IFI16炎症小体的高表达,但通过抑制pro-caspase-1的活化、IL-1β的表达,HBV阻断了IFI16炎症小体的活化效应. 展开更多

关键词 炎性小体 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 黑素瘤缺乏因子2 半胱天冬酶1 干扰素诱导蛋白16 乙型肝炎病毒

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根皮素对2型糖尿病肾病小鼠的肾保护作用及机制 被引量：5

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作者 王兴红 马永超 +2 位作者 孙缦利 李超敏 李海霞 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第11期418-426,共9页

为探究根皮素对2型糖尿病肾病小鼠肾损伤的分子保护作用及潜在机制,将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性药物组(二甲双胍500 mg/kg)、根皮素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg·d)。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相应... 为探究根皮素对2型糖尿病肾病小鼠肾损伤的分子保护作用及潜在机制,将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性药物组(二甲双胍500 mg/kg)、根皮素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg·d)。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物,12周后,观察肾脏肥大指数、肾脏病理形态学变化,测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和尿β2-微球蛋白(β2-MG)、血清白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)等指标,并检测肾组织丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达。结果显示:与模型组比较,根皮素中、高剂量组小鼠肾脏肥大指数极显著减小(P<0.01);HE染色和Masson染色见肾小球体积明显减小、系膜增生明显减少,肾小球和肾间质纤维化明显减轻;血BUN、Scr、IL-1β、IL-18和肾组织MDA含量、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ι(CollagenΙ)、NLRP3、IL-1β和Gasdermin D(GSDMD)蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);肾组织GSH-Px活性、Nrf2、HO-1、钙粘附蛋白-E(E-cadherin)蛋白表达显著升高(P<0.05)。结果表明:根皮素能保护2型糖尿病肾病小鼠肾功能改善肾纤维化,可能与调控Nrf2/HO-1/NLRP3通路改善氧化应激与炎症反应有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 根皮素 转录因子 E2相关因子2/血红素加氧酶-1/核苷酸结合寡聚化结构域 样受体蛋白3通路 氧化应激 炎症

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P53结合位点对人NOD8基因的调控 被引量：2

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作者 曾琪 张芸 +3 位作者 田莉 唐清亮 胡巢凤 柏志全 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2362-2367,共6页

目的:探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用。方法:利用生物信息学方法,我们发现人与黑猩猩的NOD8基因核心启动子区域相似位置含有P53结合位点;以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因序列,构建含有/缺失人P53结合位点的NOD8基因... 目的:探讨P53结合位点在NOD8基因调控中的作用。方法:利用生物信息学方法,我们发现人与黑猩猩的NOD8基因核心启动子区域相似位置含有P53结合位点;以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因序列,构建含有/缺失人P53结合位点的NOD8基因启动子驱动的、表达绿色荧光蛋白-NOD8融合蛋白的质粒pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8和mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8;将构建的重组质粒经阳离子聚合物JetPeiTM介导瞬时转染HEK293细胞中,并加入不同浓度的P53抑制剂pifithrin alpha(PFT-α)处理HEK293细胞,用RT-PCR和Westren blotting方法检测NOD8 mRNA和蛋白的表达;此外,用pNOD8(760 bp)-EGFP质粒转染HEK293细胞,利用染色质免疫共沉淀法(ChIP)观察P53是否与NOD8启动子结合。结果:经酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功。ChIP实验证实P53能与NOD8启动子结合。pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组中NOD8 mRNA的表达显著高于pEGFP-C2转染组(P<0.05),并且NOD8 mRNA在缺失人P53结合位点的mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8转染组中的表达明显降低(P<0.01);同时发现加入PFT-α的pNOD8(760bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8 mRNA的表达显著下降,并呈剂量依赖关系,其中90μmol/L PFT-α对NOD8mRNA表达的抑制作用最为显著(P<0.01)。与mRNA检测结果一致的是pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8蛋白的表达量显著高于对照组pEGFP-C2;而mpNOD8(750 bp)-EGFP-NOD8转染组NOD8蛋白的表达量明显低于pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组和加入PFT-α的pNOD8(760 bp)-EGFP-NOD8转染组(P<0.01)。结论:P53结合位点在NOD8基因调控中起着重要的作用,并且P53结合位点与NOD8基因之间可能存在正反馈调节。 展开更多

关键词 启动子 基因 nod8 P53结合位点 核苷酸结合寡聚结构域样受体

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曲安奈德对自发性高血压大鼠视网膜P2X7R/NLRP3通路及眼底血管病变的影响 被引量：5

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作者 田甜 吴凌 徐丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第12期1125-1129,共5页

目的探讨曲安奈德(TA)对自发性高血压(spontaneously hypertensive,SHR)大鼠视网膜嘌呤能2X7受体(purinergic 2X7 receptor,P2X7R)/核苷酸结合寡聚化结构域受体蛋白3(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptor prot... 目的探讨曲安奈德(TA)对自发性高血压(spontaneously hypertensive,SHR)大鼠视网膜嘌呤能2X7受体(purinergic 2X7 receptor,P2X7R)/核苷酸结合寡聚化结构域受体蛋白3(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)通路蛋白表达及对眼底血管病变的影响。方法将40只双眼均有视网膜病变的SHR京都维斯特(WKY)大鼠随机分为模型组(SHR组)及TA低(20 g·L-1)、中(40 g·L-1)、高(80 g·L-1)剂量组,另取10只健康WKY大鼠作为空白组(Control组);TA低、中、高剂量组球结膜下四个方向分别注射相应剂量TA各10μL,Control组和SHR组注射等体积生理盐水,每7 d 1次;给药2周后,检测各组大鼠血压、左眼眼压及各组大鼠眼底视网膜形态,利用彩色超声多普勒检查大鼠视网膜中央动脉(central retinal artery,CRA)血流速度和视网膜中央静脉(central retinal vein,CRV)血流速度。观察各组大鼠视网膜结构、微血管变化,并检测视网膜毛细血管密度;行Western blot检测视网膜通路P2X7、NLRP3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白相对表达水平。结果与Control组相比,SHR组大鼠视网膜毛细血管闭塞及黄斑水肿等病理损伤明显,收缩压、舒张压、平均血压、眼压及P2X7、NLRP3、TNF-α、IL-6各蛋白相对表达水平均升高(均为P<0.05),毛细血管密度及CRA、CRV血流速度均降低(均为P<0.05);与SHR组相比,TA低、中、高剂量组视网膜毛细血管闭塞及黄斑水肿等病理损伤程度有所减轻,P2X7、NLRP3、TNF-α、IL-6各蛋白相对表达水平均降低(均为P<0.05),毛细血管密度及CRA、CRV血流速度均升高(均为P<0.05),且TA各剂量组呈剂量依赖性;与SHR组相比,TA各剂量组大鼠收缩压、舒张压、平均血压、眼压均无明显变化(均为P>0.05)。结论TA可能通过P2X7R/NLRP3通路抑制炎症反应,进而改善SHR大鼠眼底血管病变。 展开更多

关键词 曲安奈德 自发性高血压 视网膜嘌呤能2X7受体/核苷酸结合寡聚化结构域样受体通路 眼底血管病变

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NLRP3炎性体与2019冠状病毒病(COVID-19)肺损伤的研究进展 被引量：4

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作者 任正肖 车萍 +3 位作者 李紫薇 莫梅 张珊珊 张颖颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期844-850,共7页

强烈的炎症反应是2019冠状病毒病(COVID-19)急性肺损伤的主要原因,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)通过与受体血管紧张素转化酶2(ACE2)结合进入肺部上皮细胞等靶细胞,激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NL... 强烈的炎症反应是2019冠状病毒病(COVID-19)急性肺损伤的主要原因,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)通过与受体血管紧张素转化酶2(ACE2)结合进入肺部上皮细胞等靶细胞,激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性体,活化前体caspase-1,释放成熟的IL-1β和IL-18等炎性细胞因子,参与炎症反应及诱导细胞焦亡,从而导致COVID-19患者肺部炎症细胞浸润,充血,水肿,严重者可伴有急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、弥散性血管内凝血(DIC)等多种并发症。目前尚无治疗COVID-19的特定药物,MCC950及秋水仙碱等NLRP3炎性体抑制已经广泛应用于治疗各种炎症性疾病,而目前这些药物也正处于治疗COVID-19患者的临床试验阶段。我们总结了COVID-19发病机制及SARS-CoV激活NLRP3炎性体途径,以期初步揭示NLRP3炎性体在SARS-CoV-2感染过程中所扮演的角色及其机制,为研发相关靶向药物提供理论基础。 展开更多

关键词 2019冠状病毒病(COVID-19) 含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3) 炎性体 血管紧张素转化酶2(ACE2) 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 综述

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浸润性乳腺癌组织肝配蛋白A型受体2(EphA2)高表达且与细胞焦亡负相关 被引量：2

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作者 刘昆 吴立刚 +6 位作者 揭育祯 纳莉 张晴 田荣 李桂忠 卢冠军 马胜超 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期981-986,共6页

目的探讨肝配蛋白A型受体2(EphA2)参与浸润性乳腺癌中细胞焦亡(pyroptosis)的机制。方法采用Western blot法检验乳腺癌患者癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织EphA2、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶... 目的探讨肝配蛋白A型受体2(EphA2)参与浸润性乳腺癌中细胞焦亡(pyroptosis)的机制。方法采用Western blot法检验乳腺癌患者癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织EphA2、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白表达水平;采用免疫荧光技术检测45例乳腺癌患者癌组织和癌旁组织中EphA2表达情况;用Pearson相关系数对患者癌组织EphA2的蛋白表达与细胞焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1和IL-1β进行相关性分析。结果与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中NLRP3、caspase-1、IL-1β和ICAM-1的蛋白表达水平明显降低,EphA2蛋白表达明显升高;EphA2水平与细胞焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1和IL-1β均呈负相关性。结论乳腺癌组织EphA2高表达,且与细胞焦亡呈负相关。 展开更多

关键词 乳腺癌 细胞焦亡(pyroptosis) 炎性体 含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3) 肝配蛋白A型受体2(EphA2)

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P2X7R/NLRP3信号通路在酒精性肝损伤中的作用 被引量：8

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作者 潮蓉 武小娟 +2 位作者 王羽辉 苏倩倩 吕雄文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期491-495,共5页

目的探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用。方法采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,最后1周,分组进... 目的探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用。方法采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,最后1周,分组进行以下处理,对照组和模型组:给予等剂量的生理盐水腹腔注射(每只约0.2 mL),每日1次;A438079组:根据小鼠体质量,腹腔注射200μmol·kg^(-1)的A438079(按7 g·L^(-1)配制A438079,每只约0.2mL),每日1次。最后1天清晨给予单次31.5%酒精溶液灌胃,剂量为10 mL·kg^(-1)。9 h后小鼠眼眶取血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)。HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化方法检测肝组织中P2X7R的表达;Western blot法检测肝组织中的P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18水平。结果与对照组相比,模型组ALT、AST、TG、TCHO含量明显增强,且肝组织损伤明显;与模型组相比,A438079组ALT、AST、TG、TCHO含量明显降低。与对照组相比,模型组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达明显升高;与模型组相比,A438079组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达水平明显降低。结论酒精诱导的肝损伤可能与P2X7R-NLRP3信号通路有关。 展开更多

关键词 嘌呤P2X7受体 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 炎性小体 白细胞介素-1Β 白细胞介素-18 酒精性肝损伤

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七氟醚后处理对缺氧复氧诱导的H9C2心肌细胞焦亡及TXNIP/NLRP3通路的影响 被引量：3

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作者 刘金川 丁汉琳 李丽楠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期922-927,共6页

目的:基于硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路探究七氟醚后处理(SPostC)对缺氧复氧(HR)诱导的H9C2心肌细胞焦亡的影响。方法:体外培养H9C2心肌细胞,将细胞分为4组:正常对照组(NC组)、HR组、HR+SPo... 目的:基于硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路探究七氟醚后处理(SPostC)对缺氧复氧(HR)诱导的H9C2心肌细胞焦亡的影响。方法:体外培养H9C2心肌细胞,将细胞分为4组:正常对照组(NC组)、HR组、HR+SPostC组、HR+SPostC+TXNIP/NLRP3通路抑制剂白藜芦醇组(HR+SPostC+RES组)。采用CCK-8检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH含量;采用碘化丙啶(PI)染色法检测细胞膜孔的形成;采用Western blot法检测细胞焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18及TXNIP/NLRP3通路相关蛋白TXNIP、NLRP3的表达;采用实时荧光定量PCR法检测TXNIP/NLRP3通路相关基因TXNIP、NLRP3的表达。结果:与NC组相比,其余3组细胞活力显著降低,而LDH释放量、PI染色阳性率以及Caspase-1、IL-1β、IL-18、TXNIP和NLRP3的表达明显升高(P<0.05);与HR组相比,HR+SPostC组和HR+SPostC+RES组细胞活力显著升高(P<0.05),而LDH释放量、PI染色阳性率以及Caspase-1、IL-1β、IL-18、TXNIP和NLRP3的表达明显降低(P<0.05);与HR+SPostC组相比,HR+SPostC+RES组细胞活力显著升高(P<0.05),而LDH释放量、PI染色阳性率以及Caspase-1、IL-1β、IL-18、TXNIP和NLRP3的表达明显降低(P<0.05)。结论:SPostC可能通过抑制TXNIP/NLRP3信号通路进而抑制HR诱导的H9C2心肌细胞焦亡。 展开更多

关键词 七氟醚后处理 缺氧复氧 H9C2心肌细胞 细胞焦亡 硫氧还蛋白结合蛋白/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3通路

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柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化

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作者 桑瑞 魏金环 +3 位作者 潘静莹 杨日云 毛立明 包璟崟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期34-40,共7页

目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细... 目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞,实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量;Western blot法检测NLRP3蛋白的变化,免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后,NLRP3和IL-1β表达明显升高;下调NLRP3后,IL-1β分泌明显减少;NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染,组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化,增加炎症因子IL-1β表达和释放。 展开更多

关键词 含pyrin结构域nod样受体家族蛋白3(NLRP3) 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2) 柯萨奇病毒B3(CVB3) 巨噬细胞

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人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定

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作者 曾琪 胡巢凤 +1 位作者 孙丽萍 陆大祥 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期128-132,共5页

目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有... 目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp),用VspⅠ和NheⅠ双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析。构建的重组质粒经脂质体(lipofectam ine)TM2000介导转染HEK293、K562和HeLa细胞,转染48 h后在倒置荧光显微镜下观察。结果:pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的2段重组质粒转染HEK293、K562及HeLa细胞均能表达绿色荧光,其中构建的pEGFP-C2-NOD8(760 bp)重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-NOD8(520 bp)。结论:成功构建2段不同长度的人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体。 展开更多

关键词 核苷酸结合寡聚化结构域8启动子(nod8启动子) 载体 绿色荧光蛋白 基因表达

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