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通过农杆菌介导转化梅花的方法控制梅花PmDAMs基因表达的初步研究(英文)
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作者 HisayoYamane MeiGao-Takai RyutaroTao 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第S1期33-37,共5页
休眠是植物适应季节气候变化的一种生长调节机制。近年来由于全球气候变化使得休眠的遗传机制研究迫在眉睫。与梅花休眠相关的MADS-box基因被认为是调控梅花休眠规律的遗传因子。然而,通过同源植物的转基因来研究这类基因的功能尚未有... 休眠是植物适应季节气候变化的一种生长调节机制。近年来由于全球气候变化使得休眠的遗传机制研究迫在眉睫。与梅花休眠相关的MADS-box基因被认为是调控梅花休眠规律的遗传因子。然而,通过同源植物的转基因来研究这类基因的功能尚未有报道。最近,Gao等(2010)成功地开发了梅花的遗传转化系统。本文试图用农杆菌介导转化未成熟子叶,通过PmDAM6的组成型表达或RNAi诱导基因沉默的方法来控制PmDAM基因表达。尽管体细胞胚胎发生率很高以及转化率也能够接受,但从体细胞胚很难获得再生植物。最终,我们只得到了少数转基因个体。初步的表达分析表明该系统能够控制PmDAM基因的表达。因此,为了进一步鉴定PmDAMs基因的功能,应开发出具有更高植物再分化效率的高效遗传转化系统。 展开更多
关键词 农杆菌 DAM 休眠 核糖酸干扰 转化
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超声靶向微泡破裂技术联合shRNA质粒沉默Toll样受体4基因
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作者 郑翾 梁燕玲 +4 位作者 陈佳 陈智毅 李斯颖 罗建华 方小波 《中国卒中杂志》 2015年第4期284-290,共7页
目的 Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4表达水平与脑缺血合并高血糖后的痫性发作及脑梗死预后相关,本文探讨超声靶向微泡破裂(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)联合短发夹核糖核酸(short hairpin ribonucleic aci... 目的 Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4表达水平与脑缺血合并高血糖后的痫性发作及脑梗死预后相关,本文探讨超声靶向微泡破裂(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)联合短发夹核糖核酸(short hairpin ribonucleic acid,sh RNA)干扰技术沉默TLR4的可行性和应用价值。方法将32只实验用Wistar大鼠分为4组:空白对照组(NS)、裸质粒组(P)、质粒联合超声辐照组(P+UTMD)、质粒与Sono Vue联合超声辐照组(P+S+UTMD),每组各8只。裸质粒组注入质粒,质粒联合超声辐照组注入质粒行超声辐照,质粒与Sono Vue联合超声辐照组侧脑室注入质粒和Sono Vue微泡并行超声辐照,处理4 d后每组取5只大鼠行Western Blot检测大脑TLR4蛋白表达,取3只大鼠行免疫组织化学染色。结果质粒联合超声辐照组和质粒与Sono Vue联合超声辐照组抑制效果明显(P+S+UTMD:0.223±0.009,P+UTMD:0.277±0.013,t1,3=4.900,P<0.01;t1,4=8.779,P<0.01),裸质粒组与空白对照组差异无显著性(NS:0.351±0.030,P:0.339±0.034,t1,2=0.590,P>0.05),而质粒与Sono Vue联合超声辐照组与质粒联合超声辐照组相比抑制效果更好(P+S+UTMD:0.223±0.009,P+UTMD:0.277±0.013,t3,4=7.006,P<0.05)。免疫组织化学的平均光度值分析显示,质粒联合超声辐照组和质粒与Sono Vue联合超声辐照组抑制效果明显(P+S+UTMD:0.026±0.0013,P+UTMD:0.058±0.0014,t1,3=8.334,P<0.01;t1,4=21.027,P<0.01),裸质粒组与空白对照组差异无显著性(NS:0.079±0.0048,P:0.077±0.0012,t1,2=0.797,P>0.05),而质粒与Sono Vue联合超声辐照组与质粒联合超声辐照组相比抑制效果更好(P+S+UTMD:0.026±0.0013,P+UTMD:0.058±0.0014,t3,4=33.254,P<0.05)。结论超声微泡造影剂联合sh RNA质粒可高效稳定沉默TLR4基因。 展开更多
关键词 超声 微泡 TOLL样受体4 基因 核糖核苷干扰
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