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定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法
被引量：
5
1
作者
邓利
张为民
+1 位作者
郑汉其
林浩然
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2003年第1期7-11,共5页
目的 建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法 将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正...
目的 建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法 将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA ,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交 ,用RNaseA和RNaseT1 降解杂交产物的单链RNA ,双链杂交体得到保护 ,然后检测杂交体的分子大小及放射强度。结果 检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断 ,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交 RNase保护法 ,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达 ,表达水平在肝脏中最高。该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合。结论 为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段。
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关键词
黑鲷
受体
促生长素
核糖核酸酶保护测定
液相杂交
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职称材料
题名
定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法
被引量：
5
1
作者
邓利
张为民
郑汉其
林浩然
机构
中山大学水生经济动物研究所
香港中文大学生物化学系
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2003年第1期7-11,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No.39970 5 86 )
中山大学"2 11工程"研究项目
文摘
目的 建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法 将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA ,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交 ,用RNaseA和RNaseT1 降解杂交产物的单链RNA ,双链杂交体得到保护 ,然后检测杂交体的分子大小及放射强度。结果 检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断 ,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交 RNase保护法 ,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达 ,表达水平在肝脏中最高。该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合。结论 为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段。
关键词
黑鲷
受体
促生长素
核糖核酸酶保护测定
液相杂交
Keywords
Sparus macrocephalus
Receptors, Somatotropin
RNase Protection Assay
分类号
Q959.4 [生物学—动物学]
Q57 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法
邓利
张为民
郑汉其
林浩然
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2003
5
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