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题名核糖核酸酶保护法MD-2探针的制备
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作者
陈永华
李昌麟
王韵
蒋建新
朱佩芳
张宗梁
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机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第四研究室
中国科学院生化与细胞生物学研究所
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第20期1857-1858,共2页
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文摘
目的 构建用于核糖核酸酶保护法的MD 2转录质粒并制备反义RNA探针。方法 PCR扩增目的片段 ,并定向亚克隆至pSP72质粒T7启动子下游的多克隆位点 ,以T7RNA聚合酶转录合成反义RNA探针。结果 亚克隆插入的片段经测序、酶切鉴定 ,序列及方向完全正确 ,成功制备了用于的反义RNA探针。结论 成功地制备了用于核糖核酸酶保护法的MD 2转录模板和探针 ,为深入研究内毒素信号受体相关机制以及MD
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关键词
RNA探针
核糖核酸酶保护法
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分类号
R394.33
[医药卫生—医学遗传学]
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题名人肠上皮细胞内毒素低反应性及其机制探讨
被引量：2
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作者
张道杰
蒋建新
陈永华
段朝霞
熊健琼
朱佩芳
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机构
第三军医大学大坪医院野战外科研究所
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出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期194-196,共3页
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基金
国家重点基础研究发展规划项目资助课题 (编号G1 9990 540 3)
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文摘
为探讨人正常肠上皮细胞对内毒素(LPS)刺激低反应性的机制 ,用ELISA法检测LPS刺激肠上皮细胞 18h后IL 8的分泌水平 ,用RT PCR及RPA法检测肠上皮细胞LPS跨膜信号转导相关受体TLR4、TLR2、CD14和MD2mRNA的表达及LPS刺激对其表达的影响。结果表明 ,LPS刺激不能引起肠上皮细胞IL 8的分泌 ,而IL 1β刺激却能引起其分泌 ;人正常肠上皮细胞TLR4、TLR2、CD14和MD2mRNA的表达均较弱。LPS刺激后 ,TLR4、CD14和MD2mRNA表达进一步降低 ,而TLR2的表达无显著变化。说明肠上皮细胞对LPS的低反应性与细胞表面LPS相关受体低表达有一定的内在联系 ,从而进一步证实TLR4、CD14。
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关键词
肠上皮细胞
内毒素信号转导相关受体
逆转录聚合酶链反应
核糖核酸酶保护法
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Keywords
intestines epithelial cells
lipopolysaccharide signal transduction associated receptor
reverse transcriptase-polymerase chain reaction
RNase protection assay
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
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