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产酸克雷伯菌核心基因组多位点序列分型方案 被引量:1
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作者 陈胜林 康雨童 +5 位作者 梁一赫 徐帅 邱小彤 李芳 刘雪萍 李振军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期912-919,926,共9页
目的对产酸克雷伯菌进行核心基因组多位点序列分型(cgMLST)并探索产酸克雷伯菌克隆群(clonal groups,CGs)在国家或地区层面上的遗传多样性。方法chewBBACA被用作GbG(gene-by-gene)分析的生物信息学管道,从整个物种的基因组序列中进行集... 目的对产酸克雷伯菌进行核心基因组多位点序列分型(cgMLST)并探索产酸克雷伯菌克隆群(clonal groups,CGs)在国家或地区层面上的遗传多样性。方法chewBBACA被用作GbG(gene-by-gene)分析的生物信息学管道,从整个物种的基因组序列中进行集群识别,以构建和验证产酸克雷伯菌的cgMLST方案。公开获得的21个完整的产酸克雷伯菌基因组序列用于cgMLST方案的创建,386个不完整的产酸克雷伯菌基因组序列用于cgMLST方案的验证。结果建立了一个针对3356个核心基因的cgMLST(简称3356-cgMLST)方案。提出的3356-cgMLST方案实现了针对98%以上(400/407)的产酸克雷伯菌分离株基因组序列的分型。根据提出的3356-cgMLST方案,最终纳入分型的400株产酸克雷伯菌基因组序列中共确定了130个CGs。基于3356-cgMLST方案获得的CGs分布情况可以看出产酸克雷伯菌呈现出明显的多国家多地区传播现象。结论本研究为产酸克雷伯菌提供一个公开的3356-cgMLST方案,并揭示产酸克雷伯菌基因组序列呈现高度的遗传多样性,CG26为优势克隆群。 展开更多
关键词 产酸克雷伯菌 核心基因组多位点序列分型 基因分型 克隆群
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鸡毒支原体LC株全基因组分析及中国流行株多位点序列分型分析
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作者 方焕新 李琪 +6 位作者 宋子昂 温家明 顾嘉运 王占新 覃健萍 于岩飞 张炜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5095-5103,共9页
鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染可引起鸡慢性呼吸道疾病(CRD),影响饲料转化率、产蛋率、孵化率及健苗率,给全球家禽产业造成严重经济损失。本研究旨在分析LC分离株的基因组特性及生物学特征,探索国内流行规律。从孵化厂... 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染可引起鸡慢性呼吸道疾病(CRD),影响饲料转化率、产蛋率、孵化率及健苗率,给全球家禽产业造成严重经济损失。本研究旨在分析LC分离株的基因组特性及生物学特征,探索国内流行规律。从孵化厂中采集啄壳不全活胚进行MG分离,对分离株进行二代基因组测序及黏附相关蛋白变异分析。同时,对国内流行MG菌株进行多位点序列分型(MLST)分析。本研究从孵化厂的啄壳不全活胚中分离到一株MG菌株。基因组分析显示,MG基因组小,仅有953.4 kb,GC含量31.5%。注释显示721个编码区,编码密度89.3%,33个tRNA,2个CRISPR序列。功能富集于翻译、代谢和信号转导,具有高效蛋白质合成和环境适应能力,可能存在与毒力调控的相关基因。在黏附相关蛋白P1、P30和hwm3中发生11处氨基酸突变。MLST分析表明,该分离株属于ST-81型,与国内主要流行的ST-78和ST-36共同构成主要流行基因型。MG已成为孵化厂的重要污染因子,伴随着流行的多样性,显著增加了防控难度。本研究解析了LC株的基因组特征和生物学特性,并分析了国内主要流行ST型,这为病原生物学研究及疫苗菌株筛选提供了科学依据。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 啄壳不全活胚 基因组 氨基酸突变 多位点序列分型
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2008-2022年福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征研究
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作者 柯自立 张小玄 +5 位作者 徐海滨 高亚东 罗朝晨 黄梦颖 邱玉锋 杨劲松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期708-715,共8页
目的了解福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征,为深入开展霍乱分子流行病学研究提供依据。方法收集2008-2022年福建省霍乱病例和带菌者来源O1群霍乱弧菌16株,肉汤稀释法检测抗生素最小抑菌浓度(MIC)。运用二代测序技术得到全基因组序列... 目的了解福建省O1群霍乱弧菌人源株基因组特征,为深入开展霍乱分子流行病学研究提供依据。方法收集2008-2022年福建省霍乱病例和带菌者来源O1群霍乱弧菌16株,肉汤稀释法检测抗生素最小抑菌浓度(MIC)。运用二代测序技术得到全基因组序列;利用snippy、Roary、Prokka等开源软件及NCBI、BacWGSTdb等在线分析网站进行核心基因组多位点序列分型(cgMLST)、核心基因组单核苷酸多态性分析(cgSNP)、毒力基因和耐药基因预测、泛基因组多样性的分析。结果福建省霍乱弧菌分为5个ST(sequence type)型别,其中新发现的ST182和ST1480型是当前我国优势克隆群ST75型的进化分支,并与2010年和2013年的台湾株高度同源。产毒株和非产毒株均不同程度地携带各种毒力因子并发生变异;预测出7大类13个耐药基因,其中黏菌素类、四环素类耐药基因携带情况与耐药表型一致。泛基因组学分析发现霍乱弧菌拥有1个开放的泛基因组,Roary聚类分析表现出比cgMLST更高的分辨率。结论福建省O1群霍乱弧菌人源株的基因组结构和功能具有多态性,新发的ST1480型克隆群具有流行潜力,需加强对此类菌株的监测。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 基因组测序 生物信息学分析 核心基因组多位点序列分型 基因组
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江苏省2016—2021年临床分离铜绿假单胞菌耐药及基因组特征分析 被引量:4
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作者 聂俊伟 周璐 +3 位作者 瞿志鹏 洪捷 鲍倡俊 谈忠鸣 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期467-474,共8页
目的了解江苏地区临床分离的铜绿假单胞菌耐药情况及基因特征。方法收集2016—2021年江苏地区各哨点医院临床分离的铜绿假单胞菌,采用肉汤稀释法对分离株进行10类19种抗菌药物的敏感性测定,对分离株行全基因组测序并多位点序列分型,综... 目的了解江苏地区临床分离的铜绿假单胞菌耐药情况及基因特征。方法收集2016—2021年江苏地区各哨点医院临床分离的铜绿假单胞菌,采用肉汤稀释法对分离株进行10类19种抗菌药物的敏感性测定,对分离株行全基因组测序并多位点序列分型,综合抗菌药物耐药性数据库(CARD)扫描分析耐药基因。结果2016—2021年通过致病菌识别网12个市的哨点医院收集患者分离的铜绿假单胞菌101株。药敏试验结果显示,全部菌株对共计6类8种抗菌药物全部耐药,包括酰胺醇类抗生素氯霉素、磺胺类的复方磺胺甲口恶唑、头孢菌素类的头孢噻肟和头孢唑林、四环素类的四环素、青霉素类的氨苄西林及氨苄西林/舒巴坦以及β-内酰胺类的阿莫西林/克拉维酸;45.54%的分离株为碳青霉烯类耐药菌株,对亚胺培南、美罗培南两种碳青霉烯类抗生素的耐药率已分别达45.54%、39.60%;耐10种以上抗生素的菌株达63.36%;共发现35种耐药表型,其中1株菌对19种抗菌药物广泛耐药,耐药谱为AMC-AM-SAM-CZ-CTX-C-TE-SXT的菌株最多(31.69%,32株)。多位点序列分析发现75个ST型,聚类发现ST 262处于中心点,并遗传进化出11个亚型或分支。全基因组扫描发现6类18种抗菌药物耐药基因,crp P基因的携带情况与表型完全一致。结论2016—2021年江苏地区临床分离的铜绿假单胞菌耐药情况严重,两种碳青霉烯类抗生素的耐药率、耐10种以上抗生素的菌株比例高于国内其他省份,应引起高度重视。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 耐药性 基因组测序 耐药基因 多位点序列分型
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4株CAMP阴性无乳链球菌的全基因测序分析
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作者 王秀 姚杰 +2 位作者 冷贵云 唐伟 周强 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期707-711,共5页
目的探讨4株CAMP阴性无乳链球菌(S.agalactiae)的全基因组测序分子特征。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选可疑菌株。对于确认为S.agalactiae的菌株,进一步开展CAMP试验。针对CAMP阴性菌株,利用MGI DNBSEQ-T... 目的探讨4株CAMP阴性无乳链球菌(S.agalactiae)的全基因组测序分子特征。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选可疑菌株。对于确认为S.agalactiae的菌株,进一步开展CAMP试验。针对CAMP阴性菌株,利用MGI DNBSEQ-T7和MinION Flow Cell测序平台进行全基因组测序。测序结果重点分析多位点序列分型(MLST)、毒力基因和耐药基因。采用全自动Phoenix M50药敏仪对CAMP阴性菌株进行药敏检测。结果4株CAMP阴性S.agalactiae被纳入研究。全基因组测序分析显示,4株CAMP阴性菌株均为ST862型;携带22种与荚膜多糖、β-溶血素和透明质酸酶相关的毒力基因,以及7种与大环内酯类、林可酰胺类、多肽类和氨基糖苷类相关的耐药基因。药敏结果显示,4株CAMP阴性菌株对青霉素G、头孢吡肟、头孢噻肟、万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、莫西沙星和氯霉素均敏感;其中3株对红霉素耐药;1株对克林霉素耐药。结论4株CAMP阴性S.agalactiae均为ST862型,携带多种毒力基因及耐药基因,对红霉素耐药率高,应引起临床重视。 展开更多
关键词 无乳链球菌 CAMP阴性 基因组测序 多位点序列分型 毒力基因 耐药基因
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2017-2019年济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行病学和基因组学分析 被引量:4
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作者 王珊 杜照中 +5 位作者 尹强 韩淑琪 赵剑 江亚娟 王胜男 温红玲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期879-886,共8页
目的了解济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行情况及其基因组特征。方法采集2017-2019年流行前期、流行期、流行后期不同年龄组健康人群的咽拭子标本,进行菌株分离培养、生化试验、血清凝集试验,分离到的菌株进行基因测序,利用PubMLST数据... 目的了解济宁市健康人群脑膜炎奈瑟菌流行情况及其基因组特征。方法采集2017-2019年流行前期、流行期、流行后期不同年龄组健康人群的咽拭子标本,进行菌株分离培养、生化试验、血清凝集试验,分离到的菌株进行基因测序,利用PubMLST数据库进行多位点序列分型(MLST)、核心基因组多位点序列分型(cgMLST)、疫苗抗原分析,利用IQ-TREE和Splits Tree构建系统发育树。结果2017-2019年共检测1086份健康人群咽拭子标本,分离出21株脑膜炎奈瑟菌,健康人群平均带菌率为1.93%。其中流行前期带菌率为0.93%,流行期带菌率为2.30%,流行后期带菌率为1.83%。17~19岁人群带菌率较高,3~5岁儿童及≥20岁成人中未检出阳性菌株。检出的21株菌株中,B群15株,C群1株,不可分群5株。通过基因组分析,主要的ST型为ST-12301和ST-14655,ST-17464、ST-17465、ST-17466、ST-17467和ST-17468为本研究新发现的ST型。进行基因测序的19株菌株中,有8株属于4821克隆群,其余菌株不属于确定的克隆群,有3株血清型为不可分群的菌株但其基因型为B型。结论济宁市2017-2019年健康人群中脑膜炎奈瑟菌血清群以B群为主。本研究新发现5种MLST序列型,提示近几年菌株基因组存在微进化。MLST序列型的变迁有可能导致流行模式发生改变,有必要开展持续监测。17~20岁人群带菌率高,应密切关注菌株在人群中的扩散传播,以防引起流脑病例。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 健康人群 血清群 核心基因组多位点序列分型 系统发育树 4821克隆群
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三类禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌流行病学调查及全基因组测序分析 被引量:5
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作者 李翠函 曲志娜 +12 位作者 高玉斌 李彦 王娟 段笑笑 王琳 张喜悦 赵格 黄秀梅 赵建梅 张青青 王君玮 黄保续 刘俊辉 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1653-1662,共10页
【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131... 【目的】研究不同禽源碳青霉烯类耐药大肠杆菌(carbapenem-resistant Escherichia coli,CREC)的群间分布、耐药特征及菌株间亲缘关系,为阻断CREC的潜在危害提供技术支持。【方法】在胶东地区采集肉鸡、蛋鸡、水禽三类家禽泄殖腔拭子1131份,利用选择性分离培养、质谱鉴定、PCR、微量肉汤稀释法、多位点序列分型(MLST)及全基因组测序(WGS)等方法进行CREC菌株鉴定与分析。【结果】共分离出364株bla NDM基因阳性的CREC菌株,分离率为32.18%,阳性场总体占比为76.32%,肉鸡场和个体阳性率均最高,分别为93.33%和55.56%。三类禽源菌株均多重耐药,83.65%菌株对8类及以上药物同时耐药,对多数测试药物耐药率在80%以上。肉鸡多重耐药问题最严重,水禽次之,蛋鸡相对较轻。45株全基因组测序的CREC菌株携带12类52种耐药基因,4种bla NDM变异体,以bla NDM-5(77.78%)为主,三类家禽对同类耐药基因的检出率存在差异。共检出46种ST型,多样性比为44.23%。三类家禽CREC菌株间单核苷酸多态性(SNPs)差异位点为82~71307个,且携带的优势型不同。【结论】携带bla NDM的CREC在不同家禽养殖场尤其是肉鸡场广泛存在,以bla NDM-5亚型最为常见,对多种抗菌药普遍耐药,且携带大量耐药基因,以质粒传播为主。CREC菌株在三类家禽中呈多样化分布,且多数菌株间亲缘关系相差较远。提示应针对不同动物群体,加强监测和影响因素研究,以降低CREC的潜在风险。 展开更多
关键词 家禽 碳青霉烯类耐药大肠杆菌(CREC) 群间分布 多位点序列分型(MLST) 基因组测序(WGS)
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单核细胞增生李斯特菌LMXJ15全基因组测序及分析 被引量:3
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作者 杜冬冬 钱晶 +5 位作者 李思琪 刘雯菲 魏向利 刘长勇 罗瑞峰 康立超 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期298-306,共9页
为了解新疆地区单核细胞增生李斯特菌LMXJ15菌株的的基因组特征和进化关系。采用PacBio和Illumina HiSeq测序对LMXJ15菌株进行全基因组测序,使用相关软件对测序数据进行预测、注释,并进行多位点序列分型(mutilocus sequence typing,MLST... 为了解新疆地区单核细胞增生李斯特菌LMXJ15菌株的的基因组特征和进化关系。采用PacBio和Illumina HiSeq测序对LMXJ15菌株进行全基因组测序,使用相关软件对测序数据进行预测、注释,并进行多位点序列分型(mutilocus sequence typing,MLST)及共线性分析菌株间的同源性。结果显示单核细胞增生李斯特菌LMXJ15菌株基因组总长度为3017732 bp,平均GC含量为37.81%,预测到3154个编码基因,编码基因总长度为2734315 bp;包含6个rRNA操纵子和57个tRNA。编码基因通过CRT预测,发现一个CRISPR序列;通过GO数据库的对比分析,得到三类功能方面的2241个基因。预测到可能的毒力基因88个。MLST分析显示LMXJ15菌株为ST8型(sequence type,ST),属于CC8(clonal complex,CC)复合克隆系;进化分析显示其与意大利分离株IZSAM_Lm_15_17439_A144、瑞士分离株LmN1546和一株从熏鲑鱼分离菌株R479a在同一个进化分支上,具有相同的ST型和血清型(1/2a),并通过比较基因组分析显示4株LM的基因组之间的共线性较好。该研究初步分析了LMXJ15菌株基因组特征,毒力基因携带情况,为新疆地区单核细胞增生李斯特菌毒力和进化关系研究提供基础数据。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 基因组 多位点序列分型
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多位点序列分析方法在克罗诺杆菌属菌株溯源分析上的应用 被引量:4
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作者 闫瑞 杨捷琳 +3 位作者 陈翠玲 钮冰 徐之雯 蒋原 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2019年第9期9-14,共6页
克罗诺杆菌(Cronobacter)是一种急性细菌病原体,最初因与新生儿重症监护室爆发的几起致死性疾病(脑膜炎,坏死性小肠结肠炎)相关而受到人们广泛关注。目前Cronobacter PubMLST基因组和序列定义数据库(http://pubmlst.org/cronobacter/)... 克罗诺杆菌(Cronobacter)是一种急性细菌病原体,最初因与新生儿重症监护室爆发的几起致死性疾病(脑膜炎,坏死性小肠结肠炎)相关而受到人们广泛关注。目前Cronobacter PubMLST基因组和序列定义数据库(http://pubmlst.org/cronobacter/)中已包含超过2400多株克罗诺杆菌分离菌株的序列信息,阪崎克罗诺杆菌1774株,丙二酸盐阳性克罗诺杆菌295株是其中的优势菌种,这些菌株共分离自40多个国家和地区。通过将7个位点的多位点序列分型(7-loci multilocus sequence typing,7-lociMLST)方案应用于2438株克诺罗菌株,共揭示了591种可定义的序列型(sequencetype,ST),其中ST4(334株)、ST1(280株)、ST7(78株)和ST13(67株)为主要序列型。7-lociMLST对于克罗诺杆菌的致病型分型鉴定有很大帮助,但由于MLST所针对的七个基因位点在基因组总量中占比较小,导致同一ST型中包含地理来源,分离时间,宿主等不相关的菌株,而对菌株溯源结果适得其反。为了解决这一问题,本研究进一步采用基于直系同源基因簇的多位点序列分析方法(Clusters of Orthologous Genes MLST, cogMLST(1865-loci)),对PubMLST中240株已完成全基因组测序的菌株,包括阪崎克罗诺杆菌ST1(67株),ST4(95株),ST13(43株)和丙二酸盐阳性克罗诺杆菌ST7(35株)进行了全基因组序列分析。结果显示,cogMLST可对ST型相同,但无相关性的菌株进行进一步分型,且不同聚类与菌株分离国家及来源之间存在一定相关性。这或许对于相同ST克罗诺杆菌属菌株的全球溯源分析及食源性疾病监测有较大帮助。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 多位点序列分型 基因组分型 溯源分析
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ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的毒力基因分布及分子流行病学特征 被引量:2
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作者 黄雅轩 蔡依含 +2 位作者 何婉霞 张莉滟 赵越 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期730-736,共7页
目的:碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)携带的耐药基因会限制临床用药选择,其毒力基因也会严重影响患者预后。本研究旨在探讨重症监护室(intensive care unit,ICU)CRKP的毒力基因分布、荚膜... 目的:碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)携带的耐药基因会限制临床用药选择,其毒力基因也会严重影响患者预后。本研究旨在探讨重症监护室(intensive care unit,ICU)CRKP的毒力基因分布、荚膜血清型及分子流行病学特征,了解ICU中CRKP的感染特点,为ICU有效监测和防控CRKP感染提供科学依据。方法:收集2021年1月至2022年12月广东省人民医院ICU所分离并已确定为CRKP的非重复菌株共40株。采用全基因组测序方法,分析待测菌株耐药基因、毒力基因、荚膜血清型的分布,同时将CRKP基因组7个管家基因序列上传至肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)数据库进行分析,以明确菌株的序列型(sequence typing,ST)。结果:40例ICU CRKP感染患者年龄为(69.03±17.82)岁,且伴有多种基础疾病,临床结局好转和死亡各20例。所分离菌株主要来源于中段尿、肺泡灌洗液等标本。全基因组测序结果显示其主要携带blaKPC-1(29株,72.5%)和blaNDM-1(6株,15.0%),另有5株同时携带blaKPC-1和blaNDM-1。所携带的毒力基因有多种,其中entA、entB、entE、entS、fepA、fepC、fepG、yag/ecp、ompA等基因的携带率达100%,entD、fimB、iroB、iroD、fes、pla等基因携带率较低。ICU所分离的CRKP以ST11型(27例,67.5%)为主,荚膜血清型以KL64型(29例,72.5%)为主。共检出23例ST11-KL64型CRKP,占57.5%。结论:ICU CRKP主要为ST11-KL64型,并携带多种毒力基因,其中以铁吸收类毒力基因为主;且blaKPC已由blaKPC-2转为blaKPC-1。因此,需密切监测CRKP的分子流行病学变化,同时制订严格的防控措施,有效遏制CRKP感染的发生。 展开更多
关键词 重症监护室 碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌 基因组测序 毒力基因 荚膜血清型 多位点序列分型 分子流行病学
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2020-2023年山西省布鲁氏菌分子流行病学特征分析 被引量:2
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作者 王洋 姚素霞 +3 位作者 郝瑞娥 韩吉婷 张秋香 杨红霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1031-1035,共5页
目的分析2020-2023年山西省布鲁氏菌分子流行病学特征。方法对2020-2023年山西省临床分离的479株布鲁氏菌进行常规生物学鉴定,提取基因组进行MLVA-16分型和全基因组测序。结果多位点可变数串联重复序列分析(Multipk-Locus Variable-numb... 目的分析2020-2023年山西省布鲁氏菌分子流行病学特征。方法对2020-2023年山西省临床分离的479株布鲁氏菌进行常规生物学鉴定,提取基因组进行MLVA-16分型和全基因组测序。结果多位点可变数串联重复序列分析(Multipk-Locus Variable-number-Analysis,MLVA)聚类显示总体相似度在50.5%~100%,共204种VNTR型,聚类结果5株以上的成簇VNTR型有11种,其中有1种成簇数量在25株的VNTR型和1种成簇数量在17株的VNTR型。对这2种VNTR型的全部菌株进行全基因组测序,测序结果分别进行核心基因组多位点序列分型(Core Genenome Multilocus Sequence Typing,cgMLST)聚类,存在成簇的菌株,且差异位点较少。结论MLVA分型方法可将布鲁氏菌进行有效分辨,cgMLST能进一步阐述菌株亲缘关系和分子流行病学特征。山西省内存在着特定基因型的布鲁氏菌的长期传播。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 分子分型 多位点可变数串联重复序列分析 核心基因组多位点序列分型
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两种分子分型技术在乳制品克诺罗杆菌污染溯源分析上的比较 被引量:5
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作者 郭清艳 钮冰 杨捷琳 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期13-17,20,共6页
对2005-2006年进口婴幼儿配方奶粉等乳制品的原料及产品中分离获得的49株阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii),通过二代测序技术获得其全基因组序列,并比较两种分子分型技术的优缺点。通过二代测序技术获得49个菌株的全基因组序列,通过f... 对2005-2006年进口婴幼儿配方奶粉等乳制品的原料及产品中分离获得的49株阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii),通过二代测序技术获得其全基因组序列,并比较两种分子分型技术的优缺点。通过二代测序技术获得49个菌株的全基因组序列,通过fusA确定菌株种属,根据多位点序列分型(Multi-locus Sequence Typing, MLST)确定序列型(ST, Sequence type)。再对32株ST13菌株进行单核苷酸多态性位点分析(single nucleotide polymorphism, SNP),并构建进化树。结果 49株阪崎肠杆菌均确认为阪崎克罗诺杆菌(C.sakazakii)。49株C.sakazakii由8个ST(Sequence type,序列型)组成。ST13的菌株占分离菌株的绝对优势(65.3%, 32/49)。ST13菌株的SNP结果显示32株菌被分成4个组和5个独立的菌株。表明随着高通量测序技术的不断完善,通过全基因组序列的MLST分型方法完成初步分型,而针对遗传相似性很高的菌株,应用SNP分析深入分型,能对被克罗诺杆菌属(Cronobacter spp.)污染的乳粉进行快速溯源,对全球疫情调查有重要意义。 展开更多
关键词 阪崎克罗诺杆菌 基因组测序 多位点序列分型 单核苷酸多态性位点
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多杀性巴氏杆菌分型方法研究进展 被引量:9
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作者 祁鑫 蒋桃珍 李伟杰 《动物医学进展》 北大核心 2018年第8期89-92,共4页
多杀性巴氏杆菌是一种人兽共患病病原菌,可引起多种动物及人类疾病。目前临床上对多杀性巴氏杆菌的分型多采用基于免疫试验为基础的血清学分型和基于基因特征为依据的分子分型。血清学方法操作繁琐,对抗血清的特异性有很高的要求,不适... 多杀性巴氏杆菌是一种人兽共患病病原菌,可引起多种动物及人类疾病。目前临床上对多杀性巴氏杆菌的分型多采用基于免疫试验为基础的血清学分型和基于基因特征为依据的分子分型。血清学方法操作繁琐,对抗血清的特异性有很高的要求,不适宜临床大规模快速进行流行病学调查。分子分型具有分辨力高和重复性好等优点,因而在临床中得到了广泛应用。分子分型方法主要包括荚膜多重PCR分型、脂多糖多重PCR分型、多位点序列分型、脉冲场凝胶电泳、全基因组序列分析等。论文就每种分型方法的原理、优缺点和适用范围进行介绍,以期为临床上开展多杀性巴氏杆菌的流行病学调查,特别是分子流行病学调查提供参考。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 血清学分型 多重聚合酶链反应 多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳 基因组序列
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2005-2019年江苏省小肠结肠耶尔森菌的病原学和遗传学特征研究 被引量:1
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作者 傅明慧 王艳 +7 位作者 朱小娟 周璐 刘静娴 徐娅雯 杨华富 崔仑标 徐勤 吴斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1024-1030,1041,共8页
目的了解2005-2019年江苏省分离的小肠结肠耶尔森菌的病原学和遗传学特征。方法对江苏省食源性疾病腹泻病人以及猪、狗、牛、羊、家禽、苍蝇和食品中分离得到的110株小肠结肠炎耶尔森菌进行毒力基因、生物血清型和耐药性分析,并在全基... 目的了解2005-2019年江苏省分离的小肠结肠耶尔森菌的病原学和遗传学特征。方法对江苏省食源性疾病腹泻病人以及猪、狗、牛、羊、家禽、苍蝇和食品中分离得到的110株小肠结肠炎耶尔森菌进行毒力基因、生物血清型和耐药性分析,并在全基因组测序的基础上进行多位点序列分型(MLST)和核心基因组多位点序列分型(cgMLST)分析。结果110株小肠结肠炎耶尔森菌包括致病性菌株27株(24.5%),非致病性菌株83株(75.5%)。各种来源的菌株中,非致病性菌株占比均较高,其中93.8%的病人来源菌株(15/16)为非致病性菌株。致病性菌株的生物血清型主要为3/O∶3型(26/27,96.3%);非致病性菌株鉴定出了6种不同的生物血清型(不包含未知血清型),主要为1A/O∶8型(23/83,27.7%)和1A/O∶5型(14/83,16.9%)。110株菌对19种抗生素的敏感率达到80%以上。全基因组分析结果显示,致病性菌株均为ST135型,而非致病性菌株型别较为多样和分散。HierCC聚类分析将所有菌株聚类为3簇,致病性菌株单独成簇,病人来源菌株在各簇中均有分布。结论腹泻病人来源的小肠结肠耶尔森菌以非致病性菌株为主。相较于致病性菌株,非致病性菌株表现出了更为丰富的表观多样性和遗传多样性,应加强此类菌株的监测,警惕其感染人的风险。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 生物血清型 毒力基因 耐药性 基因组测序 多位点序列分型
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上海市首次自腹泻患者中检出格隆柏沙门菌的表型和分子特征研究 被引量:1
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作者 王闻卿 黄卫春 +6 位作者 苏靖华 尤舒琪 郑英杰 杨博雯 黄红 郝莉鹏 许学斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期732-738,共7页
目的研究上海市首次自腹泻患者中检出格隆柏沙门菌的表型和分子特征,为沙门菌病防控提供依据。方法对格隆柏分离株(2023JD76)进行生化鉴定、血清凝集试验、抗菌药物敏感性试验以及全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)。收集全球... 目的研究上海市首次自腹泻患者中检出格隆柏沙门菌的表型和分子特征,为沙门菌病防控提供依据。方法对格隆柏分离株(2023JD76)进行生化鉴定、血清凝集试验、抗菌药物敏感性试验以及全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)。收集全球格隆柏沙门菌全基因组序列,进行血清分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、耐药基因和毒力基因预测,分析2023JD76与全球株的系统进化关系。结果2023JD76血清分型符合抗原式(Salmonella Grumpensis,13,23:d:1,7),对20种抗菌药物均敏感,MLST型预测为2060(ST2060),携带氨基糖甙类药物耐药基因aac(6′)-Iaa和5类毒力基因,包括黏附基因csg、rat,分泌和转运基因sip、inv,伤寒毒素基因cdt、plt,侵袭性基因营养代谢因子mgt和抗菌肽抗性因子mig。36株全球格隆柏菌株共携带10种耐药基因,不同毒力基因携带率为58.33%~100%。进化树将全球格隆柏沙门菌基因组分为2个支系,支系Ⅰ以ST751(88.89%,16/18)为主,支系Ⅱ以ST2060(89.47%,17/19)为主。本次分离菌株2023JD76处于支系Ⅱ内,其序列型与全球人源粪便株和人源脑脊液株全基因组序列密切相关。结论本研究首次分离国内腹泻患者中的格隆柏沙门菌,不同地理来源菌株间耐药表型差异大,应加强监测以防范全球潜在的传播风险。 展开更多
关键词 格隆柏沙门菌 基因组测序 多位点序列分型 耐药基因 毒力基因
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山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的分子流行病学分析 被引量:2
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作者 宋祥彬 赵晓雨 +8 位作者 李传溥 门晓冬 梁萌 魏秀丽 李有志 杨志昆 张德琛 郭玉秋 汤文利 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期407-416,共10页
【目的】分析山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠杆菌的耐药情况、耐药机制、毒力基因、多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)、亲缘性和Inc型质粒,为禽临床合理使用抗菌药物防... 【目的】分析山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠杆菌的耐药情况、耐药机制、毒力基因、多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)、亲缘性和Inc型质粒,为禽临床合理使用抗菌药物防治此类细菌病提供参考。【方法】复苏2021年4月-2021年7月分离自山东省禽泄殖腔拭子样本中的38株产ESBLs大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法测定其对16种抗菌药物的敏感性,通过全基因组测序检测其携带的耐药基因、毒力基因、MLST、Inc型质粒,使用Parsnp构建菌株系统发育树。【结果】药敏试验结果显示,所有菌株对氨苄西林、头孢噻呋和头孢他啶耐药,对磺胺异噁唑(97.4%)、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(94.7%)、四环素(89.5%)、氟苯尼考(86.8%)、大观霉素(84.2%)耐药严重。全基因组分析结果显示,38株产ESBLs大肠杆菌的blaCTX-M型中blaCTX-M-55基因携带率为34.2%,blaNDM型中blaNDM-5和blaNDM-4基因携带率分别为21.1%和10.5%,其携带大量介导临床中常用抗菌药物的耐药基因和黏附类、侵袭类、血清抗性、铁转运类毒力基因。MLST结果显示,ST10(13.2%)为产ESBLs大肠杆菌最流行的ST型,其次是ST616(10.5%)和ST746(10.5%)。系统发育树分析表明,ST10、ST616和ST746分别属于同一起源。Inc型质粒结果显示,IncFIB(AP001918)携带率最高(68.4%),其次为IncHI2(42.1%)。【结论】山东省禽源产ESBLs大肠杆菌耐药状况严峻,blaCTX-M基因是导致大肠杆菌对超广谱β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要原因,且该类菌株携带大量毒力基因,亟需对其加强监测。 展开更多
关键词 超广谱β-内酰胺酶 碳青霉烯 禽源大肠杆菌 基因组测序 多位点序列分型
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河南省2015至2019年李斯特菌病分子流行病学特征 被引量:7
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作者 炊慧霞 李薇薇 +3 位作者 崔箐坡 贾松树 张秀丽 韩志伟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第6期767-773,共7页
目的:分析河南省2015至2019年李斯特菌病分子流行病学特征。方法:对河南省2015至2019年李斯特菌病感染专项监测中分离的60株单核细胞增生李斯特菌进行全基因组测序。分析其谱系、克隆群(CC型)、序列型、血清群。通过VFDB、BIGSdb-Lm和Re... 目的:分析河南省2015至2019年李斯特菌病分子流行病学特征。方法:对河南省2015至2019年李斯特菌病感染专项监测中分离的60株单核细胞增生李斯特菌进行全基因组测序。分析其谱系、克隆群(CC型)、序列型、血清群。通过VFDB、BIGSdb-Lm和ResFinder数据库获得其毒力基因、生物杀灭剂和重金属抗性基因及耐药基因分布。采用核心基因组多位点序列(cgMLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法进行分子分型。结果与结论:60株中65.0%来自于围生期病例,75.0%来自于血液标本。60株分属2个谱系(Ⅰ和Ⅱ),以谱系Ⅰ为优势谱系(68.3%);分属3个血清型(Ⅱb、Ⅱa和Ⅳb),Ⅱb为优势型(63.3%);分属13个CC型以及2个未分CC型(ST619和ST382),CC87为优势型(35.0%);分属18个序列型,ST87为优势型(35.0%)。所有菌株均携带毒力岛LIPI-1,26.7%菌株携带LIPI-3,45.0%菌株携带LIPI-4。所有菌株均不携带生物杀灭剂抗性基因(bcrABC、emrE、emrC、qacA、qacC和Tn6188 qac)和重金属抗性基因cadC,10.0%菌株携带重金属抗性基因cadA;28.3%菌株携带应激生存岛SSI-1,3.3%菌株携带SSI-2。60株均携带耐药基因fosX,3.3%菌株同时携带耐药基因fosX、mef(A)、msr(D)和tet(M),主要是大环内酯类和四环素类耐药基因。60株分属52种CL型,每种CL型包括1~5株菌,等位基因差异数0~1730个,CL0029、CL0014、CL0032和CL0033为优势型。60株共获得51种PFGE带型,每种带型包括1~4株菌,相似度为56.7%~100.0%,GX6A16.HA0030、GX6A16.HA0005、GX6A16.HA0023和GX6A16.HA0011为优势带型。 展开更多
关键词 李斯特菌病 基因组测序 多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳
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2010—2019年咸阳市食品及芝麻酱加工环节中单增李斯特菌污染状况及其分子流行病学特征分析 被引量:3
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作者 张俊君 王莹莹 +3 位作者 杨囡 王丽娟 刘刚 秦龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期957-965,共9页
目的了解咸阳市食品中单增李斯特菌的污染状况及分子流行病学特征。方法2010—2019年采集咸阳市12类1699份食品及酱制品加工环节样本,依据《国家食品安全风险监测工作手册》进行单增李斯特菌分离鉴定,用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel... 目的了解咸阳市食品中单增李斯特菌的污染状况及分子流行病学特征。方法2010—2019年采集咸阳市12类1699份食品及酱制品加工环节样本,依据《国家食品安全风险监测工作手册》进行单增李斯特菌分离鉴定,用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型,检测菌株血清表型,对菌株进行全基因组测序,分析其谱系、克隆群、序列型和血清群,采用核心基因组多位点序列分型方法(cgMLST)进行分子分型。结果1699份样本中检出单增李斯特菌72株,总检出率为4.24%,检出率最高的是生肉制品18.49%(22/119);1/2a、1/2b和1/2c为优势血清型(87.50%,63/72);分离株共分为40个PFGE带型,其中有3个优势带型(GX6A16.XY0009、GX6A16.XY0004、GX6A16.XY0003),初步建立了咸阳市单增李斯特菌的PFGE指纹图谱库;全基因组测序菌株分属3个谱系,以谱系II为主56.94%(41/72);血清群以Ⅱa为主,共31株(43.06%,31/71);分为15个CC型,其中CC224、CC8、CC9和CC87为优势CC型(56.94%,41/72)。cgMLST能将不同谱系、血清群和CC型的菌株明显分开,分为18个亚群,与CC型基本保持一致。结论咸阳市流通食品中单增李斯特菌污染状况持续存在,并有交叉污染的可能。建立的PFGE指纹图谱库可为单增李斯特菌引起的食源性疾病的预警和暴发溯源提供支持,基于全基因组的cgMLST分型可用于食源性疾病暴发调查中菌株的溯源。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 污染状况 基因组测序 核心基因组多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳
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微卫星分子标记的研究进展 被引量:1
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作者 陈红菊 陈灿菊 姜中伸 《山东畜牧兽医》 2004年第5期41-43,共3页
关键词 微卫星分子标记 位点特异性 多态信息含量 卫星DNA 基因组 核心序列 聚丙烯酰胺凝胶电泳 侧翼序列 研究进展 微卫星位点
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肾移植受者耶氏肺孢子菌肺炎的临床及流行病学特征分析 被引量:11
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作者 沈泽 田洋洋 +5 位作者 周政 惠宇 王亮良 潘浩 黄玉华 胡林昆 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期570-577,共8页
目的探讨肾移植受者耶氏肺孢子菌肺炎(PJP)的临床及流行病学特征。方法收集2021年7月至2021年12月68例肾移植受者的临床资料,根据肺部感染情况分为PJP组(11例)、普通肺部感染组(24例)、非肺炎组(33例)。分析肾移植术后PJP的发生及治疗情... 目的探讨肾移植受者耶氏肺孢子菌肺炎(PJP)的临床及流行病学特征。方法收集2021年7月至2021年12月68例肾移植受者的临床资料,根据肺部感染情况分为PJP组(11例)、普通肺部感染组(24例)、非肺炎组(33例)。分析肾移植术后PJP的发生及治疗情况,比较各组受者的基本特征及实验室指标,分析PJP患者的基因分型及传播图谱。结果64例肾移植受者中,11例明确诊断PJP,最常见的临床表现为体温升高、干咳伴进行性呼吸困难。所有患者胸部CT表现为双肺弥漫性间质炎症,磨玻璃样改变。确诊后,均口服复方磺胺甲唑3~4周。2例患者由于严重肺部感染和呼吸困难,使用无创呼吸机辅助呼吸,其余受者均使用鼻导管吸氧。1例患者出院时血清肌酐升高,发生移植肾失功,其余10例PJP受者移植肾功能正常,无受者死亡。与非肺炎组比较,PJP组排斥反应发生率较高,住院时间较长,淋巴细胞计数较少,淋巴细胞比例较低,C-反应蛋白、血清肌酐、乳酸脱氢酶水平较高,血清白蛋白水平较低,CD4+T细胞计数较少(均为P<0.05)。与普通肺部感染组比较,PJP组淋巴细胞计数较少,淋巴细胞比例较低,CD4+T细胞计数较少,1,3-β-D-葡聚糖(BDG)水平较高(均为P<0.05)。在检测的12例样本中,10例样本未发现新的基因分型。考虑PJP主要存在2条传播链,以及2例独立传播个体。结论由于细胞免疫功能受损,肾移植受者更易感染耶式肺孢子菌(PJ),最常见的临床表现为体温升高、干咳伴进行性呼吸困难,部分同时出现头痛,乏力,胸部CT表现为双肺弥漫性间质炎症、磨玻璃样改变。PJ可通过呼吸道传播,在肾移植随访门诊存在小规模的PJP爆发可能,应及时做好预防工作。 展开更多
关键词 肾移植 耶氏肺孢子菌 感染 耶氏肺孢子菌肺炎 基因组二代测序 多位点序列分型 淋巴细胞 排斥反应
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