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髓系特异性核因子ⅠB条件性基因敲除小鼠的构建及其肠道炎症表现
1
作者
胡漫秋
周黎
+4 位作者
陈思源
刘宏韬
张浩
何松
周智航
《海军军医大学学报》
北大核心
2025年第2期215-222,共8页
目的通过构建核因子ⅠB(NFIB)条件性基因敲除(cKO)小鼠,探讨髓系细胞NFIB的表达与肠道炎症的关系。方法利用人类蛋白质图谱数据库、基因型-组织表达数据库和FANTOM5数据库查找NFIB在炎症细胞中的表达情况。运用CRISPR/Cas9技术构建NFIB-...
目的通过构建核因子ⅠB(NFIB)条件性基因敲除(cKO)小鼠,探讨髓系细胞NFIB的表达与肠道炎症的关系。方法利用人类蛋白质图谱数据库、基因型-组织表达数据库和FANTOM5数据库查找NFIB在炎症细胞中的表达情况。运用CRISPR/Cas9技术构建NFIB-flox小鼠,并与Lyz2-Cre转基因小鼠杂交,将后代自交获得髓系特异性NFIB cKO小鼠(NFIBfl/flLyz2-Cre小鼠)。经琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型后,选取C57BL/6N品系的NFIB cKO小鼠4只为实验组,非cKO小鼠4只为对照组。两组小鼠均使用2.5%葡聚糖硫酸钠盐以相同条件诱导,构建慢性结肠炎模型,从临床表现和组织病理学方面评估结肠炎严重程度。结果经分析发现NFIB在髓系细胞来源的粒细胞、单核细胞中均有表达,且在中性粒细胞中高表达。成功地利用CRISPR/Cas9技术和Cre-loxP系统构建了髓系特异性NFIB cKO小鼠。葡聚糖硫酸钠盐诱导的肠炎模型NFIB cKO小鼠在短时间内出现腹泻、肉眼血便、活动减少、体重减轻等情况。肠道大体观察显示NFIB cKO小鼠结肠较非cKO小鼠缩短[(8.23±0.35)cm vs(10.30±0.36)cm,P<0.01]。肠H-E染色显示NFIB cKO小鼠肠黏膜腺结构改变和结缔组织增生伴广泛炎症细胞浸润,NFIB cKO小鼠的组织学评分高于非cKO小鼠[(4.25±0.50)分vs(0.50±0.58)分,P<0.01]。肠免疫组织化学染色结果显示,CD11b阳性细胞在NFIB cKO小鼠较非cKO小鼠中募集更多。结论本实验成功构建了髓系特异性NFIB cKO小鼠,并发现髓系细胞中的NFIB能够减轻免疫细胞(粒细胞或/和单核细胞)浸润,抑制肠道炎症。
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关键词
条件性基因敲除
核因子ib
肠道炎症
髓系细胞
动物模型
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题名
髓系特异性核因子ⅠB条件性基因敲除小鼠的构建及其肠道炎症表现
1
作者
胡漫秋
周黎
陈思源
刘宏韬
张浩
何松
周智航
机构
重庆医科大学附属第二医院消化内科
出处
《海军军医大学学报》
北大核心
2025年第2期215-222,共8页
基金
国家自然科学基金(81972285)
肿瘤免疫病理学教育部重点实验室开发课题(2022jsz808).
文摘
目的通过构建核因子ⅠB(NFIB)条件性基因敲除(cKO)小鼠,探讨髓系细胞NFIB的表达与肠道炎症的关系。方法利用人类蛋白质图谱数据库、基因型-组织表达数据库和FANTOM5数据库查找NFIB在炎症细胞中的表达情况。运用CRISPR/Cas9技术构建NFIB-flox小鼠,并与Lyz2-Cre转基因小鼠杂交,将后代自交获得髓系特异性NFIB cKO小鼠(NFIBfl/flLyz2-Cre小鼠)。经琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型后,选取C57BL/6N品系的NFIB cKO小鼠4只为实验组,非cKO小鼠4只为对照组。两组小鼠均使用2.5%葡聚糖硫酸钠盐以相同条件诱导,构建慢性结肠炎模型,从临床表现和组织病理学方面评估结肠炎严重程度。结果经分析发现NFIB在髓系细胞来源的粒细胞、单核细胞中均有表达,且在中性粒细胞中高表达。成功地利用CRISPR/Cas9技术和Cre-loxP系统构建了髓系特异性NFIB cKO小鼠。葡聚糖硫酸钠盐诱导的肠炎模型NFIB cKO小鼠在短时间内出现腹泻、肉眼血便、活动减少、体重减轻等情况。肠道大体观察显示NFIB cKO小鼠结肠较非cKO小鼠缩短[(8.23±0.35)cm vs(10.30±0.36)cm,P<0.01]。肠H-E染色显示NFIB cKO小鼠肠黏膜腺结构改变和结缔组织增生伴广泛炎症细胞浸润,NFIB cKO小鼠的组织学评分高于非cKO小鼠[(4.25±0.50)分vs(0.50±0.58)分,P<0.01]。肠免疫组织化学染色结果显示,CD11b阳性细胞在NFIB cKO小鼠较非cKO小鼠中募集更多。结论本实验成功构建了髓系特异性NFIB cKO小鼠,并发现髓系细胞中的NFIB能够减轻免疫细胞(粒细胞或/和单核细胞)浸润,抑制肠道炎症。
关键词
条件性基因敲除
核因子ib
肠道炎症
髓系细胞
动物模型
Keywords
conditional gene knockout
nuclear factorⅠB
intestinal inflammation
myeloid cells
animal models
分类号
R-332 [医药卫生]
R574 [医药卫生—消化系统]
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作者
出处
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1
髓系特异性核因子ⅠB条件性基因敲除小鼠的构建及其肠道炎症表现
胡漫秋
周黎
陈思源
刘宏韬
张浩
何松
周智航
《海军军医大学学报》
北大核心
2025
0
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