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猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响被引量：6: 1; 作者刘随新石达 +6 位作者陈建飞张鑫时洪艳刘孝珍张莎王璐冯力《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期173-176,共4页; 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接... 展开更多; 关键词猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白核仁定位信号流式细胞术宿主细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟病毒衣壳蛋白核仁定位信号鉴定被引量：2: 2; 作者张鑫刘宁 +1 位作者时洪艳徐佳《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期93-96,共4页; 为鉴定猪瘟病毒(CSFV)衣壳蛋白(C)在细胞中的核仁定位信号(No LS),本研究采用截短表达的方法将含有C基因不同片段的真核表达重组质粒转染猪睾丸细胞(ST)。结果表明,瞬时表达的截短C蛋白的aa51-aa71多肽定位于ST细胞核仁中。而将C蛋白的a... 展开更多; 关键词猪瘟病毒衣壳蛋白核仁定位信号; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲型H1N1流感病毒NS1蛋白核仁定位的研究: 3; 作者赵宗正涂加钢 +3 位作者张文婷胡勇周红波金梅林《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期12-16,共5页; 为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白。然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来... 展开更多; 关键词甲型H1N1流感病毒 NS1 多克隆抗体核仁定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究被引量：9: 4; 作者刘宁时洪艳 +3 位作者陈建飞冯力张鑫胡桂学《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期71-72,80,共3页; 为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定... 展开更多; 关键词猪瘟病毒衣壳蛋白 ST细胞核仁定位; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响被引量：6: 1; 作者刘随新石达陈建飞张鑫时洪艳刘孝珍张莎王璐冯力; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期173-176,共4页; 基金国家自然科学基金(31172350) 黑龙江省杰出青年基金(JC201118); 文摘为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。; 关键词猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白核仁定位信号流式细胞术宿主细胞周期; Keywords porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein nucleoli localization signal flow cytometry cell cycle; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟病毒衣壳蛋白核仁定位信号鉴定被引量：2: 2; 作者张鑫刘宁时洪艳徐佳; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江省动物卫生监督所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期93-96,共4页; 基金国家自然科学基金(31101823); 文摘为鉴定猪瘟病毒(CSFV)衣壳蛋白(C)在细胞中的核仁定位信号(No LS),本研究采用截短表达的方法将含有C基因不同片段的真核表达重组质粒转染猪睾丸细胞(ST)。结果表明,瞬时表达的截短C蛋白的aa51-aa71多肽定位于ST细胞核仁中。而将C蛋白的aa51-aa71缺失突变后,C蛋白则丧失了其核仁定位的能力。此外,将C蛋白的51KKK53突变为51AAA53,也同样导致C蛋白丧失核仁定位能力,表明该序列为核仁定位的核心基序。本研究为进一步分析C蛋白在CSFV复制过程中的功能提供了实验依据。; 关键词猪瘟病毒衣壳蛋白核仁定位信号; Keywords classical swine fever virus capsid nucleolar localization signals; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲型H1N1流感病毒NS1蛋白核仁定位的研究: 3; 作者赵宗正涂加钢张文婷胡勇周红波金梅林; 机构华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期12-16,共5页; 基金国家973计划(2010CB534000) 转基因生物新品种培育重大专项资助(2009ZX08009-141B) +1 种基金 2009ZX10004-109)课题资助; 文摘为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白。然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来制备多抗,Western blot检测抗体。通过间接免疫荧光对表达不同长度NS1(NS1-219、NS1-230、NS1-237)的3种重组流感病毒进行了核仁定位的研究,3种重组毒的NS1蛋白存在于细胞核和细胞质,但都不能定位于核仁,说明NS1蛋白的截短与否并不影响其核仁定位,其生物学意义有待于进一步研究。; 关键词甲型H1N1流感病毒 NS1 多克隆抗体核仁定位; Keywords H1N1 Influenza A virus NS1 polyclonal antibody nuclear localization; 分类号 S853.659.5 [农业科学—临床兽医学] S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究被引量：9: 4; 作者刘宁时洪艳陈建飞冯力张鑫胡桂学; 机构吉林农业大学动物科学技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期71-72,80,共3页; 基金国家自然科学基金(31101823); 文摘为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定位情况。结果表明,CSFV表达蛋白在ST细胞中主要定位于细胞质和核仁。本研究为进一步分析CSFV的复制机理提供依据。; 关键词猪瘟病毒衣壳蛋白 ST细胞核仁定位; Keywords classical swine fever virus capisd protein ST cells nucleus localization; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响	刘随新石达陈建飞张鑫时洪艳刘孝珍张莎王璐冯力	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪瘟病毒衣壳蛋白核仁定位信号鉴定	张鑫刘宁时洪艳徐佳	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	甲型H1N1流感病毒NS1蛋白核仁定位的研究	赵宗正涂加钢张文婷胡勇周红波金梅林	《中国动物传染病学报》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究	刘宁时洪艳陈建飞冯力张鑫胡桂学	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	9	在线阅读下载PDF 职称材料