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小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量:3
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作者 夏迪 钱倩 +5 位作者 刘志成 谭鸣鸣 丁媛 苏欣 孙文逵 施毅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第4期341-345,共5页
目的树突状细胞相关C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。文中旨在构建表达小鼠Dectin-1基因的重组腺病毒载体,扩增、纯化获得高浓度的重组腺病毒。方法将PCR扩增的... 目的树突状细胞相关C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。文中旨在构建表达小鼠Dectin-1基因的重组腺病毒载体,扩增、纯化获得高浓度的重组腺病毒。方法将PCR扩增的目的片段CLEC7A-p IRES2-EGFP重组到中间载体p DONR221上,再与腺病毒骨架质粒p AD/CMV/V5-DEST重组,获得重组腺病毒质粒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP,经Pac I线性化后转染人胚肾293(HEK293)细胞,收获重组腺病毒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP;利用HEK293细胞大量扩增腺病毒;并进行重组腺病毒的滴度测定;用荧光显微镜和实时荧光定量PCR鉴定转染重组腺病毒组(Dectin-1基因重组腺病毒转染HEK293细胞)和转染空病毒组(空病毒转染HEK293细胞)中Dectin-1基因的表达。结果菌落PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果均显示重组腺病毒含有Dectin-1基因,腺病毒滴度为5×1011IU/m L,荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR检测到转染重组腺病毒组Dectin-1表达量是转染空病毒组的8677.25倍。结论成功构建并获得了较高浓度的Dectin-1基因重组腺病毒载体,为下一步体内外研究Dectin-1高表达在宿主抗真菌天然免疫中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 树突状细胞相关c型凝集素-1 cLEc7A基因 腺病毒载体 模式识别受体
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血清Visfatin CTRP12半乳糖凝集素-3对2型糖尿病合并脑梗死诊断及预后评估的价值 被引量:2
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作者 李曾一 李星 +3 位作者 木亚林 籍胤玺 林玉玲 李杰玉 《临床心身疾病杂志》 CAS 2022年第5期11-18,共8页
目的 探讨血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3对2型糖尿病合并脑梗死诊断及预后评估的应用价值。方法 将72例2型糖尿病合并脑梗死患者设为研究组,另选取80例单纯2型糖尿病患者设为对照组。比较入院时两组血清内... 目的 探讨血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3对2型糖尿病合并脑梗死诊断及预后评估的应用价值。方法 将72例2型糖尿病合并脑梗死患者设为研究组,另选取80例单纯2型糖尿病患者设为对照组。比较入院时两组血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3水平,采用受试者工作特征曲线分析各血清指标诊断价值,比较治疗7 d及治疗14 d不同预后患者血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3水平及颈动脉内膜中层厚度,采用Pearson相关性分析法分析各血清指标与颈动脉内膜中层厚度、格拉斯哥预后量表评分关联性及预后预测价值,并采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。结果 入院时研究组血清内脂素、半乳糖凝集素-3水平显著高于对照组(P<0.01),C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12水平显著低于对照组(P<0.01)。血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3联合诊断2型糖尿病合并脑梗死的曲线下面积最大,为0.878。治疗第7 d、第14 d预后良好组血清内脂素、半乳糖凝集素-3水平及颈动脉内膜中层厚度显著低于入院时(P<0.01),且显著低于预后不良组(P<0.01),C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12水平显著高于入院时(P<0.01),且显著高于预后不良组(P<0.01);治疗第14 d预后不良组血清内脂素及半乳糖凝集素-3水平显著低于入院时(P<0.05或0.01)。血清内脂素、半乳糖凝集素-3水平与颈动脉内膜中层厚度呈显著正相关(P<0.05),C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12水平与颈动脉内膜中层厚度呈显著负相关(P<0.05)。入院第14 d内脂素预测2型糖尿病合并脑梗死预后的曲线下面积最大,为0.808。Kaplan-Meier曲线分析显示,血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3的生存曲线比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论 2型糖尿病合并脑梗死患者存在血清内脂素、C1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12、半乳糖凝集素-3异常表达情况,与颈动脉内膜中层厚度、格拉斯哥预后量表评分关系密切,可作为早期诊断、预后评估的检测指标,为临床治疗指明新方向。 展开更多
关键词 2糖尿病 脑梗死 内脂 c1补体肿瘤坏死因子相关蛋白12 半乳糖凝集-3 颈动脉内膜中层厚度
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Dectin-1对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响
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作者 邓浩然 丁旭春 《解剖学杂志》 CAS 2023年第6期508-513,共6页
目的:探究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖(GM)、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响。方法:大鼠随机分为对照组、Ad-EGFP组和Ad-Dectin-1-EGFP组。检测大鼠肺功能(肺容积变换、静息通气量);ELISA法检... 目的:探究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖(GM)、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响。方法:大鼠随机分为对照组、Ad-EGFP组和Ad-Dectin-1-EGFP组。检测大鼠肺功能(肺容积变换、静息通气量);ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)含量和血清中GM含量;H-E染色观察肺组织病理学变化;检测胸腺指数;TUNEL检测胸腺细胞凋亡;免疫印迹检测肺组织中Dectin-1、T-bet、GATA-3蛋白表达。结果:与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显降低,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显升高,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显降低。与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显降低,GATA-3蛋白表达明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显升高,GATA-3蛋白表达明显降低。结论:Dectin-1重组质粒可减轻侵袭性肺曲霉病大鼠肺损伤,降低血清中GM值,通过抑制胸腺细胞凋亡维持体内免疫功能平衡,其机制可能与T-bet、GATA-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 树突状细胞相关c凝集1 侵袭性肺曲霉病 半乳甘露聚糖 胸腺细胞 凋亡 肺损伤 大鼠
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下肢动脉硬化闭塞症患者血清sLOX-1、CTRP3水平与支架植入术后再狭窄的关系
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作者 付立平 马艳彪 +2 位作者 马波 孙庆贺 吕旭晨 《中国现代普通外科进展》 CAS 2024年第10期784-788,共5页
目的:探讨下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)的水平与支架植入术后再狭窄(ISR)的关系。方法:选取2019年6月至2022年6月在本院进行支架植入的106例ASO... 目的:探讨下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)的水平与支架植入术后再狭窄(ISR)的关系。方法:选取2019年6月至2022年6月在本院进行支架植入的106例ASO患者作为研究对象,术后1年根据患者ISR发生情况分为非ISR组(n=64)和ISR组(n=42)。比较两组患者血清sLOX-1、CTRP3水平;多因素Logistic回归分析ASO患者支架植入术后ISR的影响因素;ROC曲线分析血清sLOX-1、CTRP3水平对ASO患者支架植入术后ISR的预测价值。结果:ISR组血清sLOX-1水平显著高于非ISR组(P<0.05),CTRP31水平显著低于非ISR组(P<0.05)。完全闭塞、sLOX-1是ASO患者支架植入术后ISR的独立危险因素,CTRP3是ASO患者支架植入术后ISR的保护因素(P<0.05)。血清sLOX-1、CTRP3二者联合预测ASO患者支架植入术后ISR的AUC为0.944,敏感性为97.62%,特异性为79.69%,优于sLOX-1、CTRP3各自单独预测(Z_(联合检测-sLOX-1)=2.732、Z_(联合检测-CTRP3)=2.143,P=0.006、0.032)。结论:ASO支架植入术后ISR患者血清sLOX-1水平显著升高,CTRP3水平显著降低,二者联合检测对ASO患者支架植入术后发生ISR具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 下肢动脉硬化闭塞症 支架植入 术后再狭窄 可溶性凝集样氧化低密度脂蛋白受体-1 c1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3
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Dectin-1/Syk信号通路介导脂多糖诱导的BV2细胞中的炎症反应 被引量:3
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作者 程林 可红 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第1期71-75,共5页
目的探讨脂多糖(LPS)诱导BV2细胞神经炎症反应中树突状细胞相关C型凝集素1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)及其下游脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)信号通路发挥的作用。方法采用LPS建立BV2细胞炎症模... 目的探讨脂多糖(LPS)诱导BV2细胞神经炎症反应中树突状细胞相关C型凝集素1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)及其下游脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)信号通路发挥的作用。方法采用LPS建立BV2细胞炎症模型。将BV2细胞分为对照组、LPS 3 h组、LPS 6 h组、LPS 12 h组和LPS 24 h组,然后用免疫印迹法检测Dectin-1,Syk和p-Syk的表达,随后选出LPS最佳刺激时间。根据LPS最佳刺激时间,再将BV2细胞分为空白对照组、对照+LAM组、对照+PIC组、LPS组、LPS+LAM组和LPS+PIC组;用免疫印迹法检测Dectin-1、p-Syk、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮合酶(iNOS)的表达,观察抑制Dectin-1和Syk对促炎因子表达的影响。结果与对照组相比,LPS诱导3,6,12,24 h组Dectin-1,Syk和p-Syk蛋白在BV2细胞中的表达均增加,且在24 h表达量最高(P<0.05)。与空白对照组比较,对照+LAM组和对照+PIC组中各蛋白表达无明显差异(P>0.05);与LPS组相比较,LPS+LAM组Dectin-1,p-Syk,TNF-α和iNOS的蛋白表达明显下调(P<0.05)。类似的,与LPS组比较,LPS+PIC组TNF-α和iNOS的蛋白表达也明显下调(P<0.05)。结论Dectin-1/Syk信号通路可作为治疗神经炎症反应的潜在靶点。 展开更多
关键词 脂多糖 炎症反应 树突状细胞相关c凝集1 脾酪氨酸激酶
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Dectin-1受体信号通路研究进展 被引量:4
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作者 陈朝丰 于波 胡小平 《皮肤性病诊疗学杂志》 2016年第5期358-361,共4页
β-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成分,近年研究发现,树突状细胞相关性C型植物凝集素-1(dectin-1)受体可作为真菌的主要模式识别受体,通过对β-葡聚糖的识别及信号转导,诱导机体产生一系列的细胞因子和趋化因子,启动免疫功能。Dectin-1受体... β-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成分,近年研究发现,树突状细胞相关性C型植物凝集素-1(dectin-1)受体可作为真菌的主要模式识别受体,通过对β-葡聚糖的识别及信号转导,诱导机体产生一系列的细胞因子和趋化因子,启动免疫功能。Dectin-1受体广泛分布于单核巨噬细胞系统、树突状细胞及中性粒细胞等。本文主要对Dectin-1受体的结构、作用机制和信号通路进行综述。 展开更多
关键词 树突状细胞相关c植物凝集-1 Β-葡聚糖 真菌 免疫应答
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