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花生青枯菌GFPuv标记菌株的构建和致病性分析
1
作者
黄金玲
吴雨霜
+5 位作者
唐慧全
黄敏怡
杨瑞雪
王强
杨永
谭晓丹
《广东农业科学》
2024年第11期102-112,共11页
【目的】构建带有GFPuv标记的花生青枯菌,以实时观察其在宿主植物内的侵染路径,并确定适用于外源基因整合的基因组位点。【方法】通过对青枯菌PeaFJ1菌株全基因组分析,选定外源基因的插入位点。利用pK18mobsacB自杀质粒,应用同源重组双...
【目的】构建带有GFPuv标记的花生青枯菌,以实时观察其在宿主植物内的侵染路径,并确定适用于外源基因整合的基因组位点。【方法】通过对青枯菌PeaFJ1菌株全基因组分析,选定外源基因的插入位点。利用pK18mobsacB自杀质粒,应用同源重组双交换技术将GFPuv基因整合到PeaFJ1菌株基因组的指定位点。使用荧光显微镜在紫外光激发下评估GFPuv标记菌株的荧光表现,并测定其生长速率及致病力以评估菌株功能活性。【结果】成功将GFPuv基因整合至PeaFJ1的IR3区域,构建出稳定的PeaFJ1-GFPuv菌株(即GFPuv标记菌株)。GFPuv标记菌株在紫外光下显示强烈绿色荧光,而野生型PeaFJ1菌株无荧光。PeaFJ1-GFPuv菌株在液体培养基中培养96h后OD600值超1.5;固体培养基中培养48 h后OD600值超0.5,3 d内菌落直径为1.0~1.5 mm,与PeaFJ1菌株生长速率无显著差异。致病力测试显示,PeaFJ1-GFPuv菌株侵染花生11 d后,植物萎蔫死亡率达100%,与PeaFJ1菌株无显著差异。此外,叶片电导率和菌含量测定结果表明,PeaFJ1-GFPuv菌株在花生叶片中的增殖速率与野生型PeaFJ1菌株相当。荧光显微镜观察能够清晰追踪PeaFJ1-GFPuv菌株在花生叶片中的侵染路径,从接种后2 d开始,菌株从切口进入主叶脉,至接种后9 d,菌株已广泛分布于整个叶片。【结论】成功构建在基因组IR3区域插入GFPuv的青枯菌GFPuv标记菌株,其生物学特性和致病与PeaFJ1菌株无显著差异,证明IR3区域为PeaFJ1菌株基因回补的有效位点。GFPuv标记菌株在紫外光下显现强烈绿色荧光,可用于观察青枯菌侵染路径。
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关键词
青枯
菌
绿色荧光蛋白
同源重组
标记菌株
整合位点
致病性分析
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职称材料
假单胞菌JK45菌株lux基因标记及在土壤中的存活
被引量:
21
2
作者
韦兵
唐欣昀
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期1524-1528,共5页
为研究植物根部重要促生菌株的个体生态学,利用三亲接合法成功地将发光酶基因luxAB转入具有解钾能力的假单胞菌Pseudomonassp.JK45菌株中。研究表明,获得的标记菌株JK45-L具有发光活性和对Cm、Km、Tet3种抗生素的抗性,杂交比例以1∶1∶...
为研究植物根部重要促生菌株的个体生态学,利用三亲接合法成功地将发光酶基因luxAB转入具有解钾能力的假单胞菌Pseudomonassp.JK45菌株中。研究表明,获得的标记菌株JK45-L具有发光活性和对Cm、Km、Tet3种抗生素的抗性,杂交比例以1∶1∶1适宜。JK45-L菌株在抗生素平板中传代15次,仍具发光活性和对3种抗生素的抗性,说明标记质粒在受体菌株中较为稳定,JK45-L菌株的生长及生理生化特性没有受到标记质粒的影响,其解钾能力也没有发生明显的变化。将JK45-L菌株接种到土壤中利用luxAB基因的活性研究菌株的存活情况,结果发现,标记菌株在灭菌土壤和自然土壤中均能很好的生存,在黄褐土和黄潮土中存活规律相似,说明JK45-L菌株具有在不同土壤中与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。
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关键词
假单胞
菌
luxAB基因
标记菌株
三亲本接合
定殖
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职称材料
木霉菌对杂交水稻生长影响差异的研究
被引量:
3
3
作者
罗秀娟
梁志怀
+3 位作者
魏林
罗赫荣
安哲宇
陈玉荣
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第13期6743-6744,6751,共3页
[目的]通过比较哈茨木霉(Trichoderma harzianum)抗药性标记菌株TUV-13和野生型菌株T2-16对水稻生长影响的差异,筛选出对水稻生长有更好促进作用的菌株,进一步推动木霉生防菌株在水稻上的应用。[方法]采用不同浓度的TUV-13和T2-16孢子...
[目的]通过比较哈茨木霉(Trichoderma harzianum)抗药性标记菌株TUV-13和野生型菌株T2-16对水稻生长影响的差异,筛选出对水稻生长有更好促进作用的菌株,进一步推动木霉生防菌株在水稻上的应用。[方法]采用不同浓度的TUV-13和T2-16孢子悬浮液对水稻进行人工接种(浸种处理),确定最适浸种浓度;室外盆栽试验采用常规方法测定水稻各个生长势指标。[结果]确定TUV-13和T2-16最适浸种浓度均为1×105个/ml;用此浓度的孢子悬浮液浸种均能提高种子活力,且TUV-13对水稻萌发的促进作用更显著,幼苗鲜重比经T2-16浸种处理增加4.85%,活力指数提高5.96%。盆栽试验显示,2个处理均能促进水稻植株根系和地上部分的生长,经TUV-13孢子悬浮液浸种的效果最显著。[结论]TUV-13对T优6135的生长具有更显著的促进作用,显示出TUV-13在水稻应用上的巨大潜力。
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关键词
哈茨木霉
抗药性
标记菌株
TUV-13
野生型
菌
株
T2-16
杂交水稻
种子活力
生长势
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职称材料
题名
花生青枯菌GFPuv标记菌株的构建和致病性分析
1
作者
黄金玲
吴雨霜
唐慧全
黄敏怡
杨瑞雪
王强
杨永
谭晓丹
机构
仲恺农业工程学院农业与生物学院/广州市特色作物种质资源研究与利用重点实验室
出处
《广东农业科学》
2024年第11期102-112,共11页
基金
广东省基础与应用基础研究基金(2022A1515110018)
仲华基因科技产业学院大学生创新创业训练计划项目(ZHCY2023001)
+1 种基金
大湾区生物育种产业学院大学生产业技术训练计划项目(NSCY2023001)
大学生创新创业训练计划项目(S202211347062,202311347015)。
文摘
【目的】构建带有GFPuv标记的花生青枯菌,以实时观察其在宿主植物内的侵染路径,并确定适用于外源基因整合的基因组位点。【方法】通过对青枯菌PeaFJ1菌株全基因组分析,选定外源基因的插入位点。利用pK18mobsacB自杀质粒,应用同源重组双交换技术将GFPuv基因整合到PeaFJ1菌株基因组的指定位点。使用荧光显微镜在紫外光激发下评估GFPuv标记菌株的荧光表现,并测定其生长速率及致病力以评估菌株功能活性。【结果】成功将GFPuv基因整合至PeaFJ1的IR3区域,构建出稳定的PeaFJ1-GFPuv菌株(即GFPuv标记菌株)。GFPuv标记菌株在紫外光下显示强烈绿色荧光,而野生型PeaFJ1菌株无荧光。PeaFJ1-GFPuv菌株在液体培养基中培养96h后OD600值超1.5;固体培养基中培养48 h后OD600值超0.5,3 d内菌落直径为1.0~1.5 mm,与PeaFJ1菌株生长速率无显著差异。致病力测试显示,PeaFJ1-GFPuv菌株侵染花生11 d后,植物萎蔫死亡率达100%,与PeaFJ1菌株无显著差异。此外,叶片电导率和菌含量测定结果表明,PeaFJ1-GFPuv菌株在花生叶片中的增殖速率与野生型PeaFJ1菌株相当。荧光显微镜观察能够清晰追踪PeaFJ1-GFPuv菌株在花生叶片中的侵染路径,从接种后2 d开始,菌株从切口进入主叶脉,至接种后9 d,菌株已广泛分布于整个叶片。【结论】成功构建在基因组IR3区域插入GFPuv的青枯菌GFPuv标记菌株,其生物学特性和致病与PeaFJ1菌株无显著差异,证明IR3区域为PeaFJ1菌株基因回补的有效位点。GFPuv标记菌株在紫外光下显现强烈绿色荧光,可用于观察青枯菌侵染路径。
关键词
青枯
菌
绿色荧光蛋白
同源重组
标记菌株
整合位点
致病性分析
Keywords
Ralstonia solanacearum
green fluorescence protein
homologous recombination
labeled strain
integration site
pathogenicity analysis
分类号
S565.2 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
假单胞菌JK45菌株lux基因标记及在土壤中的存活
被引量:
21
2
作者
韦兵
唐欣昀
机构
安徽农业大学生命科学学院
出处
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期1524-1528,共5页
基金
安徽省科技厅重点项目资助(04023043)
文摘
为研究植物根部重要促生菌株的个体生态学,利用三亲接合法成功地将发光酶基因luxAB转入具有解钾能力的假单胞菌Pseudomonassp.JK45菌株中。研究表明,获得的标记菌株JK45-L具有发光活性和对Cm、Km、Tet3种抗生素的抗性,杂交比例以1∶1∶1适宜。JK45-L菌株在抗生素平板中传代15次,仍具发光活性和对3种抗生素的抗性,说明标记质粒在受体菌株中较为稳定,JK45-L菌株的生长及生理生化特性没有受到标记质粒的影响,其解钾能力也没有发生明显的变化。将JK45-L菌株接种到土壤中利用luxAB基因的活性研究菌株的存活情况,结果发现,标记菌株在灭菌土壤和自然土壤中均能很好的生存,在黄褐土和黄潮土中存活规律相似,说明JK45-L菌株具有在不同土壤中与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。
关键词
假单胞
菌
luxAB基因
标记菌株
三亲本接合
定殖
Keywords
Pseudomonas sp
luxAB gene
labeled strain
tri-parent conjugation
colonization
分类号
S154.34 [农业科学—土壤学]
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职称材料
题名
木霉菌对杂交水稻生长影响差异的研究
被引量:
3
3
作者
罗秀娟
梁志怀
魏林
罗赫荣
安哲宇
陈玉荣
机构
中南大学隆平分院
湖南省植物保护所
湖南省农业科学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第13期6743-6744,6751,共3页
基金
湖南省科技攻关重点项目(2006NK2017)
湖南省博士后科研资助专项计划项目(2008RS4028)
文摘
[目的]通过比较哈茨木霉(Trichoderma harzianum)抗药性标记菌株TUV-13和野生型菌株T2-16对水稻生长影响的差异,筛选出对水稻生长有更好促进作用的菌株,进一步推动木霉生防菌株在水稻上的应用。[方法]采用不同浓度的TUV-13和T2-16孢子悬浮液对水稻进行人工接种(浸种处理),确定最适浸种浓度;室外盆栽试验采用常规方法测定水稻各个生长势指标。[结果]确定TUV-13和T2-16最适浸种浓度均为1×105个/ml;用此浓度的孢子悬浮液浸种均能提高种子活力,且TUV-13对水稻萌发的促进作用更显著,幼苗鲜重比经T2-16浸种处理增加4.85%,活力指数提高5.96%。盆栽试验显示,2个处理均能促进水稻植株根系和地上部分的生长,经TUV-13孢子悬浮液浸种的效果最显著。[结论]TUV-13对T优6135的生长具有更显著的促进作用,显示出TUV-13在水稻应用上的巨大潜力。
关键词
哈茨木霉
抗药性
标记菌株
TUV-13
野生型
菌
株
T2-16
杂交水稻
种子活力
生长势
Keywords
Trichoderma harzianum
Drug-resistant marker strain TUV-13
Original strain T2-16
Hybrid rice
Seed vigor
Growth
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
花生青枯菌GFPuv标记菌株的构建和致病性分析
黄金玲
吴雨霜
唐慧全
黄敏怡
杨瑞雪
王强
杨永
谭晓丹
《广东农业科学》
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
假单胞菌JK45菌株lux基因标记及在土壤中的存活
韦兵
唐欣昀
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
21
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下载PDF
职称材料
3
木霉菌对杂交水稻生长影响差异的研究
罗秀娟
梁志怀
魏林
罗赫荣
安哲宇
陈玉荣
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010
3
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职称材料
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