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鮻耳石锶标记阈值及标记效率研究
1
作者 张博伦 王硕 +2 位作者 郭彪 郑德斌 曾祥茜 《天津农业科学》 CAS 2024年第9期62-67,共6页
为确定鮻耳石锶标记48 h的最低外源添加浓度,以鮻稚鱼为研究对象,进行不同外源Sr^(2+)质量浓度(2.5、5、10、15、20、40、80 mg·L^(-1))对鮻耳石标记效果的研究。结果表明:添加浓度为20 mg·L^(-1)以上的外源Sr^(2+),鮻耳石均... 为确定鮻耳石锶标记48 h的最低外源添加浓度,以鮻稚鱼为研究对象,进行不同外源Sr^(2+)质量浓度(2.5、5、10、15、20、40、80 mg·L^(-1))对鮻耳石标记效果的研究。结果表明:添加浓度为20 mg·L^(-1)以上的外源Sr^(2+),鮻耳石均出现“高锶标记环”,并且在成活率方面无明显差异;增加外源Sr^(2+)质量浓度,可以提高耳石Sr/Ca值波峰数值和标记环宽度,但标准化标记效率明显下降。综上,鮻耳石锶标记具有较强的可行性和安全性,笔者推荐将海水Sr^(2+)浓度提升至20 mg·L^(-1)且标记48 h作为优化标记模式,可有效降低小规格鮻的大规模标记成本。 展开更多
关键词 鮻 耳石 锶标记 阈值 标记效率
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Csf1r^(Cre)介导的黄色荧光素蛋白可有效标记各组织定居巨噬细胞
2
作者 李晓宇 赵殿元 +2 位作者 张胜权 杨靖 唐丽 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1567-1573,共7页
目的构建Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)报告基因小鼠,检测Csf1r^(Cre)介导黄色荧光素蛋白(YFP)标记单核细胞及不同组织定居巨噬细胞的效率。方法Rosa26^(YFP)突变小鼠具有一个loxP侧翼的STOP序列,后跟插入Rosa26基因座的黄色荧光蛋白基因(YFP... 目的构建Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)报告基因小鼠,检测Csf1r^(Cre)介导黄色荧光素蛋白(YFP)标记单核细胞及不同组织定居巨噬细胞的效率。方法Rosa26^(YFP)突变小鼠具有一个loxP侧翼的STOP序列,后跟插入Rosa26基因座的黄色荧光蛋白基因(YFP)。当与表达Csf1r^(Cre)重组酶的小鼠交配时,STOP序列被删除,并在双突变后代Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)的表达组织中观察到YFP表达。将Csf1r^(Cre)小鼠与Rosa26^(YFP)小鼠交配,通过PCR筛选出Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)报告基因小鼠。分离成年Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)小鼠的血液及骨髓单核细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞和脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Csf1r^(Cre)介导YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果Csf1r^(Cre)Rosa26^(YFP)报告基因小鼠中肾脏、肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞表达YFP中位数为93.25%、92.45%、91.10%、94.70%,血液单核细胞表达YFP中位数为98.20%,骨髓单核细胞表达YFP中位数为93.90%。结论Csf1r^(Cre)可以介导YFP对各组织定居巨噬细胞以及骨髓和血液单核细胞进行示踪。同时,Csf1r^(Cre)可用作这些细胞的基因条件性敲除工具鼠。 展开更多
关键词 Csf1r^(Cre)重组酶 报告基因小鼠 流式细胞术 组织定居巨噬细胞 单核细胞 细胞标记效率
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地高辛3′末端标记检测效率的分析
3
作者 郑海霞 王玉国 冯智富 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第12期4888-4889,4893,共3页
[目的]为核酸杂交试验提供依据。[方法]利用3个不同长度的核酸探针进行3′末端地高辛标记,并对标记效率进行检测,研究探针的长度和浓度及其在尼龙膜上的固定方法对其信号强度的影响。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明地高辛标记的探针... [目的]为核酸杂交试验提供依据。[方法]利用3个不同长度的核酸探针进行3′末端地高辛标记,并对标记效率进行检测,研究探针的长度和浓度及其在尼龙膜上的固定方法对其信号强度的影响。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明地高辛标记的探针比未标记探针滞后,说明标记较为成功。检测信号强度随探针摩尔浓度的降低而降低。探针的固定方法对信号强度也有一定的影响。紫外交联和高温烘烤均能使检测信号增强,而使用紫外交联的信号强度较高。[结论]地高辛检测的信号强度与探针的长度、浓度、固定方法以及核酸与膜的结合效率有关。 展开更多
关键词 核酸探针 地高辛标记 标记效率
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小鼠骨髓来源巨噬细胞的SILAC代谢标记及生物质谱分析 被引量：1
4
作者 王通 郭嘉慧 +3 位作者 陈智鹏 银兴峰 马文心 崔毅峙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期881-884,共4页
目的作为模型细胞之一,小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)是药理学、药效学研究的重要工具和对象。然而,由于巨噬细胞增殖能力较弱,代谢标记细胞内蛋白一直是巨噬细胞生物学中的一个难题。因此,本研究以SILAC(stable i-sotope labeling with am... 目的作为模型细胞之一,小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)是药理学、药效学研究的重要工具和对象。然而,由于巨噬细胞增殖能力较弱,代谢标记细胞内蛋白一直是巨噬细胞生物学中的一个难题。因此,本研究以SILAC(stable i-sotope labeling with amino acids in cell culture)方法标记BMM。方法小鼠骨髓细胞的分离,以M-CSF诱导6 d并制备BMM,同时,SILAC标记细胞内蛋白;进而,裂解细胞并收集蛋白质,以SDS-PAGE进行初步分离,经胶内酶解成肽段,再通过质谱分析测定,统计得其标记效率。结果小鼠骨髓细胞在分化6 d时点成熟BMM可占细胞总数的0.965。以70 ku条带为研究对象,d 6、8和d 10鉴定到重链赖氨酸标记蛋白数分别为18、12和13个。其中,有8个蛋白在该3个时点中均被检出。统计结果表明3个时点的重链赖氨酸蛋白标记效率分别为(90.62±0.03)%、(90.23±0.03)%和(90.40±0.02)%,达到了SILAC研究的要求。结论该方法解决了BMM的SILAC标记问题,可为以巨噬细胞为研究对象的药理学研究提供有效的研究手段。 展开更多
关键词 小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM) SILAC 质谱 标记效率 蛋白质组 定量
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基于改进连通域检测算法的电力工程图纸识别技术 被引量：4
5
作者 樊冬梅 严文豆 +1 位作者 梁毅 刘巍巍 《沈阳工业大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期361-366,共6页
针对电力工程图纸识别中存在无法整体标记粘连字符以及标记效率较低的问题,提出了基于数学形态膨胀处理及简化决策树的连通域标记算法。利用可灵活设定的结构元素对输入图像进行膨胀处理,实现了对粘连字符的整体标记;通过分析相邻像素... 针对电力工程图纸识别中存在无法整体标记粘连字符以及标记效率较低的问题,提出了基于数学形态膨胀处理及简化决策树的连通域标记算法。利用可灵活设定的结构元素对输入图像进行膨胀处理,实现了对粘连字符的整体标记;通过分析相邻像素的各种可能性,设计了一种基于简化决策树的高效连通域标记算法,进而提升了电力工程图纸的识别效率。仿真结果表明,与传统方法相比,所提算法在实现整体标记粘连字符的同时,显著提高了算法的执行效率,其执行时间约为传统方法的1/2。 展开更多
关键词 电力工程图纸 字符定位 字符提取 连通域标记 粘连字符 决策树简化 数学形态膨胀 标记效率
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