目的:探讨发酵条件对大肠杆菌工程菌表达重组屋尘螨I类变应原(Der p1)的影响。方法:应用摇瓶发酵试验观察不同诱导时间和不同诱导时机对Der p1表达量的影响。结果:(1)Der p 1基因在E.coliBL21(pBVDP8)菌密度A600nm0.6左右时,4...目的:探讨发酵条件对大肠杆菌工程菌表达重组屋尘螨I类变应原(Der p1)的影响。方法:应用摇瓶发酵试验观察不同诱导时间和不同诱导时机对Der p1表达量的影响。结果:(1)Der p 1基因在E.coliBL21(pBVDP8)菌密度A600nm0.6左右时,42℃最佳诱导时间为4h.(2)工程菌E.coli BL21(pBVDP8)在30℃培养至A600nm为0.5-0.7时,42℃诱导4hDerp 1表达量最高,结论:确定了最适诱导时间和诱导时机,初步形成了一套高表达Der p 1的发酵技术。展开更多
旨在开发防治热带螨过敏症的兽用核酸疫苗,本试验通过对热带无爪螨主要变应原Blo t 5和Blo t 21的基因序列进行密码子优化,构建了热带螨主要变应原融合基因的真核表达载体pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG。为验证该真核表达载体的免疫效果,...旨在开发防治热带螨过敏症的兽用核酸疫苗,本试验通过对热带无爪螨主要变应原Blo t 5和Blo t 21的基因序列进行密码子优化,构建了热带螨主要变应原融合基因的真核表达载体pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG。为验证该真核表达载体的免疫效果,采用皮下注射,以100μg/100μL量的pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG核酸免疫BALB/c小鼠(n=6),通过ELISA检测小鼠血清中特异性IgG、IgG1和IgG2a的水平变化;流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中调节性T细胞的变化。结果显示,真核表达质粒pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG免疫小鼠后可诱导特异性IgG和IgG2a水平升高,且IgG2a/IgG1的比值升高,这暗示免疫后小鼠机体发生偏向Th1型的免疫反应。此外,该核酸疫苗可诱导小鼠产生较高水平的CD4+CD25+Foxp3+T细胞,这表明该真核表达质粒免疫小鼠后可能会诱发免疫抑制。展开更多
目的分析沈阳市中学生变应性鼻炎(AR)的变应原分布特点,提出对本地区青少年AR有针对性的防治策略。方法按照2006年WHO发布的《变应性鼻炎及其对哮喘的影响》(allergic rhinitis and its impacton asthma,ARIA)指南,对沈阳市2000名14~1...目的分析沈阳市中学生变应性鼻炎(AR)的变应原分布特点,提出对本地区青少年AR有针对性的防治策略。方法按照2006年WHO发布的《变应性鼻炎及其对哮喘的影响》(allergic rhinitis and its impacton asthma,ARIA)指南,对沈阳市2000名14~16岁中学生进行问卷调查,确定182名中学生患有AR。行皮肤点刺试验,分析其变应原,并对患者的鼻部症状行视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分和鼻结膜炎相关生活质量问卷(rhinoconjunctivitis quality of lifequestionnaire,RQLQ)进行相关性分析。结果 182例患者中,未检测出变应原者54例,检出1种变应原者15例(11.72%),检出2种变应原者19例(14.84%),检出3种及以上变应原者94例(73.44%)。屋尘螨为最常见变应原,共检出106例。鼻部症状的严重程度和生活质量呈正相关(r=0.653,P<0.001)。结论尘螨是沈阳中学生AR的主要变应原。展开更多
文摘目的:探讨发酵条件对大肠杆菌工程菌表达重组屋尘螨I类变应原(Der p1)的影响。方法:应用摇瓶发酵试验观察不同诱导时间和不同诱导时机对Der p1表达量的影响。结果:(1)Der p 1基因在E.coliBL21(pBVDP8)菌密度A600nm0.6左右时,42℃最佳诱导时间为4h.(2)工程菌E.coli BL21(pBVDP8)在30℃培养至A600nm为0.5-0.7时,42℃诱导4hDerp 1表达量最高,结论:确定了最适诱导时间和诱导时机,初步形成了一套高表达Der p 1的发酵技术。
文摘旨在开发防治热带螨过敏症的兽用核酸疫苗,本试验通过对热带无爪螨主要变应原Blo t 5和Blo t 21的基因序列进行密码子优化,构建了热带螨主要变应原融合基因的真核表达载体pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG。为验证该真核表达载体的免疫效果,采用皮下注射,以100μg/100μL量的pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG核酸免疫BALB/c小鼠(n=6),通过ELISA检测小鼠血清中特异性IgG、IgG1和IgG2a的水平变化;流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中调节性T细胞的变化。结果显示,真核表达质粒pVAX1-PADRE-Blo t 5-21-CpG免疫小鼠后可诱导特异性IgG和IgG2a水平升高,且IgG2a/IgG1的比值升高,这暗示免疫后小鼠机体发生偏向Th1型的免疫反应。此外,该核酸疫苗可诱导小鼠产生较高水平的CD4+CD25+Foxp3+T细胞,这表明该真核表达质粒免疫小鼠后可能会诱发免疫抑制。
文摘目的分析沈阳市中学生变应性鼻炎(AR)的变应原分布特点,提出对本地区青少年AR有针对性的防治策略。方法按照2006年WHO发布的《变应性鼻炎及其对哮喘的影响》(allergic rhinitis and its impacton asthma,ARIA)指南,对沈阳市2000名14~16岁中学生进行问卷调查,确定182名中学生患有AR。行皮肤点刺试验,分析其变应原,并对患者的鼻部症状行视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分和鼻结膜炎相关生活质量问卷(rhinoconjunctivitis quality of lifequestionnaire,RQLQ)进行相关性分析。结果 182例患者中,未检测出变应原者54例,检出1种变应原者15例(11.72%),检出2种变应原者19例(14.84%),检出3种及以上变应原者94例(73.44%)。屋尘螨为最常见变应原,共检出106例。鼻部症状的严重程度和生活质量呈正相关(r=0.653,P<0.001)。结论尘螨是沈阳中学生AR的主要变应原。