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柴胡皂苷D抑制PPA1诱导弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 潘静 孙园园 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第4期591-601,731,共12页
本研究旨在探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SD)通过调节无机焦磷酸酶1(inorganic pyrophosphatase,PPA1)对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)细胞凋亡的影响。使用高表达PPA1的HBL-1和U2932细胞系,采用不同浓度... 本研究旨在探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SD)通过调节无机焦磷酸酶1(inorganic pyrophosphatase,PPA1)对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)细胞凋亡的影响。使用高表达PPA1的HBL-1和U2932细胞系,采用不同浓度的SD处理,通过MTT比色法和TUNEL染色法评估细胞的增殖与凋亡,并通过ELISA和WB分析PPA1的活性及相关蛋白表达。此外,本研究构建细胞移植瘤模型以进行体内验证。结果显示,SD可显著抑制细胞增殖,诱导凋亡,降低PPA1活性及表达,增加剪切的半胱天冬酶-3(cleaved cysteine-aspartic protease 3,cleaved Caspase-3)和B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)水平,减少B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的表达。在细胞移植瘤模型中,PPA1下调组肿瘤体积显著低于PPA1下调对照组,SD处理组肿瘤体积亦显著低于DMSO溶剂对照组。综上所述,SD通过抑制PPA1促进DLBCL细胞凋亡,展现出作为抗DLBCL药物的潜力。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 弥漫性大B细胞淋巴瘤 无机焦磷酸酶1 细胞凋亡
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柴胡皂苷D调控HIF-2α/NF-κB p65通路对食管癌Eca109细胞生长的影响
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作者 王赛 张克克 +1 位作者 冯保荣 蒋士卿 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第8期2215-2225,共11页
目的 探讨柴胡皂苷D(SSD)对食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)Eca109细胞生长和缺氧诱导因子2α(HIF-2α)/核转录因子-κB p65(NF-κB p65)通路的影响。方法 用不同浓度SSD(0、3、6、9、12、15、18、21、24μmol... 目的 探讨柴胡皂苷D(SSD)对食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)Eca109细胞生长和缺氧诱导因子2α(HIF-2α)/核转录因子-κB p65(NF-κB p65)通路的影响。方法 用不同浓度SSD(0、3、6、9、12、15、18、21、24μmol·L^(-1))处理人正常食管鳞状上皮细胞Het-1a和ESCC细胞Eca109筛选SSD的实验浓度。将Eca109细胞分为对照(NC)组、HIF-2α抑制剂(PT2385)组、SSD低、高浓度(SSDL、SSD-H)组、SSD-H+空载慢病毒(LV-NC)组、SSD-H+HIF-2α重组慢病毒(LV-HIF-2α)组。MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞培养液中TNF-α、IL^(-1)β、IL-8水平;Western blot检测细胞增殖、凋亡和HIF-2α/NF-κB p65通路相关蛋白表达;建立Eca109细胞荷瘤裸鼠模型验证SSD对Eca109细胞体内生长的影响。结果 选择6、12μmol·L^(-1)SSD为实验浓度。与NC组比较,PT2385组、SSD-L、SSDH组细胞活力、细胞培养液中TNF-α、IL^(-1)β、IL-8水平、PCNA、Bcl-2、HIF-2α、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平、裸鼠皮下移植瘤体积和肿瘤重量、血清TNF-α、IL^(-1)β、IL-8水平以及HIF-2α、NF-κB p65蛋白阳性表达降低,细胞凋亡率、Bax、Cleaved-caspase3蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01);过表达HIF-2α可显著削弱SSD对Eca109细胞增殖和裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论 SSD可抑制Eca109细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制Eca109细胞荷瘤裸鼠皮下移植瘤生长,其作用可能与抑制HIF-2α/NF-κB p65通路的活化有关。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 食管鳞状细胞癌 增殖 凋亡 缺氧诱导因子2α 核转录因子-ΚB P65
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柴胡皂苷D调节cGAS-STING信号通路改善重症急性胰腺炎大鼠肠损伤
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作者 陈铮月 邓晚秋 +2 位作者 尹建军 刘微 温建立 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第14期1069-1076,共8页
目的:探讨柴胡皂苷D(SSD)调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠损伤的影响。方法:建立SAP大鼠模型,造模成功的SAP大鼠随机分为模型组、SSD低剂量组(12.5 mg/kg)、SSD中剂量... 目的:探讨柴胡皂苷D(SSD)调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠损伤的影响。方法:建立SAP大鼠模型,造模成功的SAP大鼠随机分为模型组、SSD低剂量组(12.5 mg/kg)、SSD中剂量组(25 mg/kg)、SSD高剂量组(50 mg/kg)、阳性药物组(2×10~4 U/kg的乌司他丁)、SSD高剂量+cGAS过表达组(50 mg/kg的SSD+100μL的cGAS重组质粒pcDNA3.1载体),每组12只。另取12只大鼠设为假手术组。各组给予相应药物干预7 d,1次/d。全自动生化分析仪检测血清中脂肪酶、淀粉酶水平;酶联免疫吸附法检测回肠组织中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木素-伊红染色检测胰腺组织和回肠组织病理变化;TUNEL染色检测回肠组织中细胞凋亡;蛋白印迹法检测回肠组织中闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、cGAS、STING蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、回肠组织IL-6、IL-1β、TNF-α、胰腺、回肠组织病理评分、回肠组织中细胞凋亡率、cGAS、STING蛋白表达显著升高,Occludin、ZO-1蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,SSD低、中、高剂量组大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、回肠组织IL-6、IL-1β、TNF-α、胰腺、回肠组织病理评分、回肠组织中细胞凋亡率、cGAS、STING蛋白表达呈剂量依赖性降低,Occludin、ZO-1蛋白表达呈剂量依赖性升高(P<0.05);cGAS过表达可减弱高剂量SSD对SAP大鼠上述指标的作用效果(P<0.05)。结论:SSD可能通过抑制cGAS-STING信号通路,减轻回肠组织炎症反应和细胞凋亡,改善SAP大鼠肠损伤。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 重症急性胰腺炎 环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶 干扰素基因刺激因子 肠损伤
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柴胡皂苷D诱导内质网应激增强胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的机制 被引量:3
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作者 刘桂梅 郑蕊 +6 位作者 刘晓斌 刘永仙 王亚萍 张玉富 张静 靳小燕 刘雨思 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1105-1114,共10页
目的探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)联合替莫唑胺(temozolomide,TMZ)对神经胶质瘤细胞(glioblastoma,GBM)的协同增敏作用及分子机制。方法CCK-8法结合HE染色分析RG-2、U251、LN-4283种GBM细胞系对SSD、TMZ敏感性差异并筛选最佳配伍... 目的探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)联合替莫唑胺(temozolomide,TMZ)对神经胶质瘤细胞(glioblastoma,GBM)的协同增敏作用及分子机制。方法CCK-8法结合HE染色分析RG-2、U251、LN-4283种GBM细胞系对SSD、TMZ敏感性差异并筛选最佳配伍浓度。通过克隆形成实验、HE染色结合Hoechst荧光染色检测联合给药对GBM细胞增殖影响。单丹磺酰胺(monodansylcadaverine,MDC)染色观察GBM细胞自噬小体形成。Western blot结合ICC法检测内质网应激相关因子及凋亡、自噬蛋白表达与分布变化。结果GBM细胞对TMZ敏感性顺序为RG-2>U251>LN-428。SSD联合TMZ给药结果显示出对GBM细胞系增殖的协同抑制作用,并经细胞克隆形成实验证实。与TMZ组相比,Hoechst荧光染色显示联合给药组细胞核亮染数目明显增加。MDC荧光染色发现SSD/TMZ组胞质出现致密浓染绿色颗粒,且较TMZ组相比明显增多。Western blot结果显示,较TMZ组相比,SSD/TMZ组内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP、p-PERK、ATF6表达增高(P<0.05);凋亡蛋白caspase-12、caspase-9、caspase-3、cleaved caspase-3、Bax及自噬蛋白LC3、Beclin-1表达均明显增高(P<0.05)并经ICC实验验证。结论SSD可协同TMZ抑制GBM细胞增殖且诱导其发生凋亡与自噬,通过激活内质网应激途径提高GBM细胞对TMZ化疗敏感性。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 替莫唑胺 神经胶质瘤 增殖 凋亡 自噬 内质网应激
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柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路介导ICCs细胞自噬的机制 被引量:5
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作者 万莹 曾毅 +2 位作者 吕文亮 张思依 徐婧 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第6期1393-1402,共10页
目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代... 目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代ICCs细胞分为对照组、模型组、模型+柴胡皂苷D组、模型+CaMKKβ抑制剂组、模型+柴胡皂苷D+CaMKKβ抑制剂组。透射电镜观察自噬体超微结构,ELISA检测Ghrelin和SP的水平,免疫荧光检测Ca2+和LC-3Ⅱ的表达,Western blot检测LC-3Ⅱ/Ⅰ、CaMKKβ、p-AMPK、Drp1、MFN2、IP3R和RyR的蛋白表达水平。结果谷氨酸诱导的模型组ICCs中LC-3Ⅱ荧光表达增强。柴胡皂苷D干预可降低Ca2+浓度,降低CaMKKβ、AMPK和MFN2水平(P<0.01),增加LC-3Ⅱ/Ⅰ、IP3R、RyR、Drp1、Ghrelin和SP水平(P<0.01)。柴胡皂苷D联合CaMKKβ抑制剂STO-609干预后效果更显著。结论柴胡皂苷D可通过CaMKKβ/AMPK信号通路介导Ca2+外流,影响ICCs细胞过度自噬及胃肠动力相关因子的表达。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 功能性消化不良 ICCs自噬 CaMKKβ/AMPK信号通路
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柴胡醋制前后柴胡皂苷a、b_2、c、d的LC-MS/MS法测定及比较 被引量:26
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作者 许磊 田稷馨 +3 位作者 宋瑞 刘国强 田媛 张尊建 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期334-340,共7页
采用LC-MS/MS法对醋制前后柴胡中的Ⅰ型柴胡皂苷a、c、d与Ⅱ型柴胡皂苷b2进行含量测定,色谱柱为KinetexTMC18(50 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为水-乙腈-甲醇三元梯度洗脱;检测系统为电喷雾离子源(ESI)-三重四级杆质谱仪,ESI负离子模... 采用LC-MS/MS法对醋制前后柴胡中的Ⅰ型柴胡皂苷a、c、d与Ⅱ型柴胡皂苷b2进行含量测定,色谱柱为KinetexTMC18(50 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为水-乙腈-甲醇三元梯度洗脱;检测系统为电喷雾离子源(ESI)-三重四级杆质谱仪,ESI负离子模式检测,待测成分与内标均采用负离子加合物作为选择性反应监测(SRM)的前体离子,以[M+HCOO]-/[M-H]-作为SRM检测离子对。方法学验证结果显示,所建立的方法灵敏度高、专属性好,可作为柴胡生品及醋炙品的质量控制方法。含量测定结果表明,醋制过程引发了由Ⅰ型柴胡皂苷向Ⅱ型的转化,醋制后柴胡皂苷b2的含量明显增加,对柴胡醋炙品的质量控制应同时考虑对Ⅰ、Ⅱ型柴胡皂苷柴胡皂苷进行测定。 展开更多
关键词 柴胡 醋制 柴胡皂苷A 柴胡皂苷b2 柴胡皂苷c 柴胡皂苷d LC-MS/MS
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柴胡皂苷d对大鼠实验性肝癌形成的预防作用 被引量:13
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作者 刘振国 陈红 +4 位作者 程延安 王宝峰 张欣 宋平 党双锁 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期645-647,661,共4页
目的研究柴胡皂苷d(saikosaponin-d,SSd)对大鼠实验性肝癌形成的预防作用。方法采用间断小剂量二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)灌胃诱发大鼠肝癌模型,将90只清洁级雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(10只)、肝癌模型组(20只)、SS... 目的研究柴胡皂苷d(saikosaponin-d,SSd)对大鼠实验性肝癌形成的预防作用。方法采用间断小剂量二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)灌胃诱发大鼠肝癌模型,将90只清洁级雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(10只)、肝癌模型组(20只)、SSd大、中、小剂量组(2.0、1.5、1.0 mg/kg,各20只),SSd治疗组在建立肝癌模型的同时,腹腔注射不同剂量的SSd,实验16周后停止给药,实验第18周处死所有大鼠,比较各组大鼠体重的改变,检测血清肝功指标丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltransferase,GGT)、α-L-岩藻糖苷酶(alpha-L-fucosidase,AFU),并进行肝脏病理组织学检查。结果SSd各剂量组与肝癌模型组比较,血清各项肝功指标水平明显下降,差异有统计学意义,特别是SSd大剂量组(P<0.01);同时SSd治疗组与肝癌模型组相比,肝脏病理组织学镜下观察,癌细胞分化程度高,异型性低。结论SSd对大鼠实验性肝癌形成具有一定的防治作用。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 肝癌 大鼠
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UPLC-QTof-MS测定不同提取条件下柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的转化规律 被引量:14
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作者 郭智 彭冰 +1 位作者 李宗阳 潘瑞乐 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期716-720,共5页
使用UPLC-QTof-MS研究了不同提取条件下柴胡皂苷a、d的转化规律。色谱柱为Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.01%甲酸水溶液;流速为0.45 mL/min。以四极杆串联飞行时间质谱(Q-Tof)为检测器,使用负离... 使用UPLC-QTof-MS研究了不同提取条件下柴胡皂苷a、d的转化规律。色谱柱为Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.01%甲酸水溶液;流速为0.45 mL/min。以四极杆串联飞行时间质谱(Q-Tof)为检测器,使用负离子检测模式,对经过12种不同提取方法提取的柴胡样品(1~12)进行检测。得到柴胡皂苷a、d不同提取方法下的转化规律:酸性常温条件下水解生成柴胡皂苷b1、b2,酸性加热情况下糖苷键水解生成皂苷元;中性、碱性条件下均较稳定。实验结果对柴胡皂苷a、d的提取、分离、分析提供了参考依据。 展开更多
关键词 UPLC-QTof-MS 柴胡皂苷A 柴胡皂苷d 柴胡皂苷b1 柴胡皂苷b2 提取
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HPLC测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量 被引量:33
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作者 白雪梅 田嘉铭 王德宝 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期440-441,共2页
目的:建立同时测定柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的高效液相色谱法。方法:色谱柱:Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm 5μm),柱温:25℃。波长:210 nm,流速:1 mL.m in,流动相:乙腈∶水=50∶50。结果:柴胡皂苷a的线形范围12.5 ng/μL^500 ... 目的:建立同时测定柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的高效液相色谱法。方法:色谱柱:Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm 5μm),柱温:25℃。波长:210 nm,流速:1 mL.m in,流动相:乙腈∶水=50∶50。结果:柴胡皂苷a的线形范围12.5 ng/μL^500 ng/μL,回归方程为:A=6.328C+135.355,r=0.9983,回收率为103.97%;柴胡皂d的线形范围16.25 ng/μL^650 ng/μL,回归方程为:A=6.712C+117.175,r=0.9993,回收率为99.42%。结论:该方法简便、快捷、准确,重复性好,适合于普通实验室。 展开更多
关键词 柴胡 柴胡皂苷A 柴胡皂苷d HPLC
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HPLC-CAD法测定不同产地柴胡药材中柴胡皂苷 被引量:12
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作者 王丽娜 许枏 贾天柱 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期976-979,共4页
目的建立HPLC-CAD法测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷d的含有量。方法柴胡甲醇提取液的分析采用Waters C18柱(4.6 mm×15 0 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温20℃;CAD检测器。结果 3种... 目的建立HPLC-CAD法测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷d的含有量。方法柴胡甲醇提取液的分析采用Waters C18柱(4.6 mm×15 0 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温20℃;CAD检测器。结果 3种柴胡皂苷分别在0.088~8.8μg(r=0.999 1)、0.044~4.4μg(r=0.999 0)、0.088~8.8μg(r=0.998 5)范围内线性关系良好,平均加样回收率99.04%~100.42%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于柴胡药材的质量评价。 展开更多
关键词 柴胡 柴胡皂苷A 柴胡皂苷b2 柴胡皂苷d HPLC-CAd
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柴胡皂苷D对人肝癌HepG2细胞系增殖和裸鼠肝癌形成的抑制作用 被引量:19
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作者 吴勤祥 李好朝 +1 位作者 乔泽强 贾廷印 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1664-1668,共5页
目的:探索柴胡皂苷D(Saikosaponin-d,SSd)对人肝癌Hep G2细胞系增殖和裸鼠肝癌形成的影响。方法:CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡;蛋白印记检测细胞Ki67和cleaved caspase-3表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(... 目的:探索柴胡皂苷D(Saikosaponin-d,SSd)对人肝癌Hep G2细胞系增殖和裸鼠肝癌形成的影响。方法:CCK-8检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡;蛋白印记检测细胞Ki67和cleaved caspase-3表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色分析肿瘤组织细胞凋亡;免疫组化检测肿瘤组织Ki67和cleaved caspase-3表达。结果:柴胡皂苷D组Hep G2细胞增殖能力明显低于对照组,细胞凋亡明显高于对照组(P<0. 05)。与对照组相比,柴胡皂苷D组Hep G2细胞Ki67表达明显减弱,cleaved caspase-3的表达明显增强(P<0. 05)。而且,柴胡皂苷D组裸鼠肿瘤体积明显小于对照组(P<0. 05)。柴胡皂苷D处理可提高小鼠存活率。另外,柴胡皂苷D组裸鼠肿瘤组织细胞凋亡远远高于对照组(P<0. 001)。与对照组相比,柴胡皂苷D组裸鼠肿瘤组织Ki67表达显著降低,cleaved caspase-3表达显著增强(P<0. 01)。结论:柴胡皂苷D可抑制人肝癌Hep G2细胞系增殖及裸鼠肝癌形成。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 肝癌 增殖 凋亡
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柴胡皂苷d对人肝细胞L-O2体外毒性机制探讨 被引量:21
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作者 李涛 江振洲 +5 位作者 王涛 张陆勇 徐晓月 贾晓明 缪文英 闵超 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第4期396-400,共5页
目的:考察柴胡主要成分之一柴胡皂苷d(ssd)体外肝毒性以及主要机制。方法:通过MTT试验、细胞形态学改变、DNAladder、DAPI荧光染色法、乳酸脱氢酶释放率、溶血试验等方法考察ssd对人肝细胞L-O2是否具有毒性作用,进而阐明ssd肝毒性产生... 目的:考察柴胡主要成分之一柴胡皂苷d(ssd)体外肝毒性以及主要机制。方法:通过MTT试验、细胞形态学改变、DNAladder、DAPI荧光染色法、乳酸脱氢酶释放率、溶血试验等方法考察ssd对人肝细胞L-O2是否具有毒性作用,进而阐明ssd肝毒性产生的可能机制。结果:MTT法测得ssd的半抑制浓度(IC50)为2.44μmol/L,5μmol/L处理组细胞形态学发生明显改变,乳酸脱氢酶释放率增高和溶血试验结果发现毒性作用呈剂量依赖性,但DNAladder和DAPI荧光检测均未见明显细胞凋亡。结论:ssd具有较强的体外肝毒性,其机制可能是由于ssd诱导细胞膜通透性增加从而导致细胞损伤或坏死,而不是诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d L-O2肝细胞 体外肝毒性
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HPLC法测定不同产地竹叶柴胡中柴胡皂苷a、d 被引量:5
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作者 王建科 李玮 +1 位作者 林昶 陈敏红 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1715-1718,共4页
目的建立HPLC法同时测定竹叶柴胡中柴胡皂苷a和d并对不同产地的品种进行比较。方法 Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水;检测波长204 nm;柱温40℃;体积流量1.0 mL/min;进样量10μL。结果竹叶柴胡中柴胡皂苷a、... 目的建立HPLC法同时测定竹叶柴胡中柴胡皂苷a和d并对不同产地的品种进行比较。方法 Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水;检测波长204 nm;柱温40℃;体积流量1.0 mL/min;进样量10μL。结果竹叶柴胡中柴胡皂苷a、d的进样量分别在0.147~4.41μg(r=0.999 9)、0.091~2.73μg(r=0.999 7)范围内与峰面积呈良好线性关系,加样回收率分别为101.6%(RSD为2.9%)、100.4%(RSD为2.3%)。结论对10个产地竹叶柴胡中柴胡皂苷a的平均含有量为0.12%,柴胡皂苷d为0.07%,其中以云南禄丰产的含有量最高。 展开更多
关键词 竹叶柴胡 柴胡皂苷A 柴胡皂苷d 高效液相色谱法
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柴胡皂苷-D抑制宫颈癌Hela细胞的分子机制研究 被引量:20
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作者 刘志华 王刚 沈建飞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第12期2931-2934,I0030,共5页
目的:宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,严重影响女性健康。柴胡皂苷是中药柴胡抗炎、抗肿瘤等作用的主要成分,其中柴胡皂苷D效果尤为明显。研究探讨柴胡皂苷D对宫颈癌细胞的作用的分子机制。方法:采用CCK-8法检测柴胡皂苷D对Hela细胞增殖... 目的:宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,严重影响女性健康。柴胡皂苷是中药柴胡抗炎、抗肿瘤等作用的主要成分,其中柴胡皂苷D效果尤为明显。研究探讨柴胡皂苷D对宫颈癌细胞的作用的分子机制。方法:采用CCK-8法检测柴胡皂苷D对Hela细胞增殖的影响,利用流式细胞仪检测柴胡皂苷影响Hela细胞凋亡和细胞周期,同时利用定量PCR法检测细胞周期及凋亡相关基因的表达水平。结果:与对照相比,柴胡皂苷D能够显著抑制Hela细胞的增殖(P<0.01),通过流式细胞检测,发现柴胡皂苷D能够增加细胞凋亡比例(P<0.05),将Hela细胞阻滞在细胞周期G1期。进一步实验发现,柴胡皂苷D能够降低周期素Cyclin D1和Cyclin E,进而影响细胞周期;同时增加凋亡促进基因Bax表达,降低凋亡抑制基因Bcl-2基因表达,从而影响细胞凋亡。结论:柴胡皂苷D通过周期蛋白阻滞Hela细胞周期停滞在G1期,通过影响凋亡相关蛋白诱导Hela细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 柴胡皂苷d 细胞凋亡 细胞周期
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五灵胶囊中柴胡皂苷d在小鼠体内药代动力学研究 被引量:13
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作者 王胜春 赵辉平 皇甫孟君 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期809-811,共3页
目的:探讨五灵胶囊中柴胡皂苷d在小鼠体内药代动力学特征。方法:小鼠ig五灵胶囊,在不同时间点采集血浆,加硫酸胺与乙腈甲醇(4∶1)混合液萃取制备样品液,经RPHPLC测定血浆中柴胡皂苷d的浓度,SIP7软件拟合药动学参数。结果:小鼠ig给药五... 目的:探讨五灵胶囊中柴胡皂苷d在小鼠体内药代动力学特征。方法:小鼠ig五灵胶囊,在不同时间点采集血浆,加硫酸胺与乙腈甲醇(4∶1)混合液萃取制备样品液,经RPHPLC测定血浆中柴胡皂苷d的浓度,SIP7软件拟合药动学参数。结果:小鼠ig给药五灵胶囊(5.5g/kg),五灵胶囊中柴胡皂苷d的药代动力学模型为一级吸收单室模型,其药代动力学参数在第1吸收峰Ka=2.341/h,Ke=0.081/h,Tmax=1.45h,Cmax=83.81ug/ml,T1/2Ke=7.76h;在第2吸收峰Ka=1.321/h,Ke=0.081/h,Tmax=6.48h,T1/2Ke=7.76h。结论:五灵胶囊中柴胡皂苷d在小鼠体内生物药剂学特征是吸收慢,清除也慢。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 五灵胶囊 药代动力学
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二元环糊精体系对柴胡中柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的毛细管电泳分离测定 被引量:3
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作者 李艺 易润青 +1 位作者 刘丹 宋粉云 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期902-906,911,共6页
以磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)和β-环糊精(β-CD)组成二元手性选择体系,用毛细管电泳法对柴胡中的柴胡皂苷a及柴胡皂苷d进行分离测定。考察了缓冲液的组成和浓度、手性选择剂的组成和浓度、进样方式及样品介质等对灵敏度和分离度的影... 以磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)和β-环糊精(β-CD)组成二元手性选择体系,用毛细管电泳法对柴胡中的柴胡皂苷a及柴胡皂苷d进行分离测定。考察了缓冲液的组成和浓度、手性选择剂的组成和浓度、进样方式及样品介质等对灵敏度和分离度的影响。结果表明:采用熔融石英毛细管柱(60 cm×50μm i.d,有效长度为53 cm),以20 mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-20 mmol/L SBE-β-CD-25 mmol/Lβ-CD(pH 9.9)为运行缓冲液,分离电压15 kV,检测波长210 nm,以对硝基苯甲酸为内标,样品重力进样10 s,柴胡皂苷a和柴胡皂苷d可实现基线分离。两者分别在60~300 mg/L(r=0.999 7)和20~100 mg/L(r=0.999 5)范围内呈良好线性,平均加标回收率分别为102%和100%,RSD分别为1.2%和2.3%。该方法专属性强,结果准确可靠,重复性好,可用于柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量的测定。 展开更多
关键词 高效毛细管电泳法(HPCE) 柴胡 柴胡皂苷A 柴胡皂苷d
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柴胡皂苷d对SH-SY5Y细胞一氧化氮及JNK磷酸化水平的影响 被引量:3
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作者 李妍 纪朋艳 +3 位作者 彭顺利 张巍 吕士杰 何哲 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期785-788,共4页
目的 初步探讨不同浓度的柴胡皂苷d(SSd)对SH-SY5Y细胞一氧化氮(NO)及JNK磷酸化水平的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,将SSd溶解于DMSO中,并分别以0~10μmol/LSSd作用于SH-SY5Y细胞48 h,NO试剂盒检测不同浓度的SSd对... 目的 初步探讨不同浓度的柴胡皂苷d(SSd)对SH-SY5Y细胞一氧化氮(NO)及JNK磷酸化水平的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,将SSd溶解于DMSO中,并分别以0~10μmol/LSSd作用于SH-SY5Y细胞48 h,NO试剂盒检测不同浓度的SSd对SH-SY5Y细胞培养基中NO含量的影响,Western blot法检测细胞中t-JNK、p-JNK蛋白表达水平的变化.结果 与对照组相比,4~10 μmol/L SSd作用48 h,细胞培养基中NO浓度明显减少,其中4μmol/L SSd组细胞培养液中NO含量最低(P<0.05);而与对照组相比,4~10 μmol/L SSd预处理的SH-SY5Y细胞中p-JNK/t-JNK蛋白表达量比值明显升高,且10 μmol/L SSd组比值最高(P<0.01).结论 一定浓度的SSd可引起SH-SY5Y细胞NO表达量减少和JNK蛋白磷酸化水平明显升高. 展开更多
关键词 一氧化氮 JNK 柴胡皂苷d SH-SY5Y细胞
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柴胡皂苷D对大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及其机制研究 被引量:29
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作者 黄祎 夏莉 +3 位作者 雷青松 张长江 刘华宝 李麟 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期1410-1420,共11页
目的结合网络药理学分析与动物实验验证,探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及机制。方法网络药理学分析方法获得SSD与自身免疫性肝病的潜在靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白... 目的结合网络药理学分析与动物实验验证,探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及机制。方法网络药理学分析方法获得SSD与自身免疫性肝病的潜在靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络图。利用DAVID数据库对潜在靶点进行KEGG通路富集分析。制备大鼠免疫性肝纤维化模型,SSD干预后ELISA检测大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-18水平,HE染色观察大鼠肝脏病理改变,Western blot检测大鼠肝脏组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、TLR4、Myd88、p65及p-p65蛋白的表达。结果通过筛选获得SSD与自身免疫性肝病的潜在靶点177个,KEGG富集分析得到与免疫系统相关的通路主要包括NOD样受体信号通路等,获得潜在靶点在NOD样受体信号通路中的富集情况。实验研究显示与模型组比较,高剂量SSD可显著降低大鼠血清中ALT和AST水平(P<0.05);病理组织学检测显示SSD可显著改善大鼠肝脏纤维化程度,减轻肝脏损伤;ELISA检测显示中、高剂量SSD可显著降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-18的水平(P<0.05);Western blot检测显示SSD可明显下调NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、TLR4、Myd88和p65蛋白的水平,并抑制p65的磷酸化。结论SSD能减少免疫性肝纤维化大鼠血清中炎性因子释放、减轻肝脏细胞损伤,其机制可能与调控TLR4/NF-κB和NLRP3炎症小体信号通路有关。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 肝纤维化 炎症反应 NOd样受体蛋白3炎症小体 TLR4/NF-κB信号通路
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柴胡皂苷d对抗线粒体损伤保护人肝细胞作用研究 被引量:8
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作者 张娜 李勇 《辽宁中医杂志》 CAS 2021年第12期140-143,226,共5页
目的观察柴胡皂苷d(SSd)对抗线粒体损伤保护人肝细胞的作用,探讨SSd抗氧化应激作用的机制。方法体外培养人正常肝细胞L02,采用H_(2)O_(2)诱导L02细胞氧化应激损伤模型,干预组加入中药单体SSd孵育24 h后再经过H_(2)O_(2)处理细胞,CCK8法... 目的观察柴胡皂苷d(SSd)对抗线粒体损伤保护人肝细胞的作用,探讨SSd抗氧化应激作用的机制。方法体外培养人正常肝细胞L02,采用H_(2)O_(2)诱导L02细胞氧化应激损伤模型,干预组加入中药单体SSd孵育24 h后再经过H_(2)O_(2)处理细胞,CCK8法检测SSd干预L02细胞损伤后细胞活力,试剂盒检测ALT、AST、MDA水平,荧光染色法检测线粒体膜电位(JC-1)、线粒体超氧化物(MitoSox Red)、化学发光发检测ATP水平。结果SSd能抑制L02细胞损伤引起的细胞活力下降,降低氧化应激损伤L02细胞的ALT、AST、MDA水平;抑制JC-1损伤及ATP水平下降,降低MitoSox Red水平。结论SSd对氧化应激损伤的L02细胞有保护作用,与维持线粒体正常功能、降低活性氧水平相关。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 人肝细胞 氧化应激 线粒体功能
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柴胡皂苷元D对C_6大鼠神经胶质瘤细胞内游离Ca^(2+)浓度的影响 被引量:4
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作者 吕晓川 白林 王晓蕾 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第4期250-252,共3页
目的 探讨柴胡皂苷元D (SaikogeninD ,SGD)对C6大鼠神经胶质瘤细胞内游离Ca2 + 浓度 [Ca2 + ]i 的影响。方法 采用Fura 2 /AM荧光指示剂测定SGD引起的C6大鼠神经胶质瘤细胞 [Ca2 + ]i 变化。结果 SGD(1× 10 -5~ 1×10 -4mo... 目的 探讨柴胡皂苷元D (SaikogeninD ,SGD)对C6大鼠神经胶质瘤细胞内游离Ca2 + 浓度 [Ca2 + ]i 的影响。方法 采用Fura 2 /AM荧光指示剂测定SGD引起的C6大鼠神经胶质瘤细胞 [Ca2 + ]i 变化。结果 SGD(1× 10 -5~ 1×10 -4mol/L)剂量依赖性地升高 [Ca2 + ]i,其EC50 为 3 5×10 -5mol/L。SGD的升高 [Ca2 + ]i 作用被Thapsigargin显著降低。 2 aminoethoxydiphenylborate (2 APB ,1× 10 -4mol/L)和U7312 2 (2× 10 -6mol/L )显著降低组胺的升高[Ca2 + ]i 作用 ,但对SGD的升高 [Ca2 + ]i 作用无影响。咖啡因和阿诺碱不影响SGD升高 [Ca2 + ]i。结论 SGD通过独立于肌醇三磷酸 (IP3 )受体系统和阿诺碱受体系统的机制 ,引起细胞内钙释放 ,导致 [Ca2 + ]i 升高。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d C6大鼠 神经胶质瘤 CA^2+ 中药
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