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查菲埃立克体P28蛋白抗原免疫印迹调查犬单核细胞埃立克体病 被引量:2
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作者 蹇锐 温博海 +1 位作者 潘华 刘世忠 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期11-13,共3页
目的 以查菲埃立克体P2 8蛋白抗原免疫印迹法对犬单核细胞埃立克体病作流行病学调查 ,为该病的防治提供依据。方法 收集广东犬埃立克体病发生地的犬血清 ,用基因工程制备的查菲埃立克体P2 8融合蛋白抗原与犬血清作免疫印迹 ,检测犬血... 目的 以查菲埃立克体P2 8蛋白抗原免疫印迹法对犬单核细胞埃立克体病作流行病学调查 ,为该病的防治提供依据。方法 收集广东犬埃立克体病发生地的犬血清 ,用基因工程制备的查菲埃立克体P2 8融合蛋白抗原与犬血清作免疫印迹 ,检测犬血清中的抗P2 8抗体。结果  2 12份犬血清行免疫印迹 ,89份 (42 % )阳性 ;这些阳性反应的血清绝大部分来自广州市和深圳市的野外工作犬 ,而南海市观赏犬的血清均为阴性。广西省南宁市的野外工作犬的 36份标本仅 3份为弱阳性。高水平的P2 8抗体出现在 4~ 10月 ,与当地蜱的活动期平行。结论 犬单核细胞埃立克体病在我国为局部流行 。 展开更多
关键词 查菲埃立克体p28蛋白抗原 免疫印迹 调查 立克 流行病 血清学分析
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用查菲埃立克体P28融合蛋白作免疫印迹诊断犬埃立克体感染 被引量:4
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作者 蹇锐 温博海 +2 位作者 方玉强 潘华 刘世忠 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期11-13,共3页
目的 建立以查菲埃立克体P2 8融合蛋白为抗原的诊断犬埃立克体感染的免疫印迹。方法 诱导PinPointTMXa- 3 /P2 8重组质粒在Ecoli细胞内高效表达查菲埃立克体P2 8融合蛋白 ,以该重组蛋白作抗原与犬血清行免疫印迹。结果 P2 8融合蛋白... 目的 建立以查菲埃立克体P2 8融合蛋白为抗原的诊断犬埃立克体感染的免疫印迹。方法 诱导PinPointTMXa- 3 /P2 8重组质粒在Ecoli细胞内高效表达查菲埃立克体P2 8融合蛋白 ,以该重组蛋白作抗原与犬血清行免疫印迹。结果 P2 8融合蛋白与已知的 3份犬埃立克体感染血清呈阳性反应 ,与正常犬血清反应为阴性 ,在 165份来自犬埃立克体病疫区的待检犬血清中有 4 3份 ( 2 6% )与P2 8反应阳性。结论 查菲埃立克体P2 8融合蛋白可作为犬埃立克体感染的特异性诊断抗原 ,以其建立的免疫印迹可用于犬埃立克体病的诊断。 展开更多
关键词 立克 免疫印迹 抗原 融合蛋白 查菲埃立克
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查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达
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作者 陈亮 严延生 +2 位作者 翁育伟 王惠榕 于恩庶 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期13-16,共4页
目的 克隆查菲埃立克体 12 0kDa膜表面免疫决定性蛋白基因 ,并使之在原核表达系统中表达。方法 查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染DH82细胞 40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P12 0蛋白基因序列设计特异性引物 ,套式PCR扩增查菲埃... 目的 克隆查菲埃立克体 12 0kDa膜表面免疫决定性蛋白基因 ,并使之在原核表达系统中表达。方法 查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染DH82细胞 40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P12 0蛋白基因序列设计特异性引物 ,套式PCR扩增查菲埃立克体P12 0蛋白基因部分片段 ,将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与 pUC18载体连接 ,在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下 ,定向插入原核表达载体pProEXHTb构建 pProEXHTb/P12 0重组质粒。将重组质粒转化E .coliDH5α ,并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达。结果 裁短成 10 80bp的查菲埃立克体P12 0蛋白基因克隆到 pUC18载体 ,用IPTG诱导 pProEXHTb/P12 0重组质粒转化的E .coliDH5α ,表达一分子量大小约为 47kDa的融合蛋白。结论 查菲埃立克体 12 0kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达 ,为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础。 展开更多
关键词 查菲埃立克 蛋白抗原 基因克隆 表达
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