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染色质重塑因子1在肺癌中过表达并促进肺癌增殖能力 被引量:4
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作者 张秀伟 郝凤霞 +4 位作者 贺佳妮 谢玲玲 付琳 董千泽 李庆昌 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期821-825,共5页
目的检测染色质重塑因子1(Rsf-1)对肺癌增殖能力的影响,初步探讨Rsf-1促进肺癌增殖的分子机制。方法应用Western blot方法筛选Rsf-1高表达人肺癌H1299、H460细胞系,通过小干扰RNA(si RNA)方法干扰内源性Rsf-1表达,并检测干扰效率。应用... 目的检测染色质重塑因子1(Rsf-1)对肺癌增殖能力的影响,初步探讨Rsf-1促进肺癌增殖的分子机制。方法应用Western blot方法筛选Rsf-1高表达人肺癌H1299、H460细胞系,通过小干扰RNA(si RNA)方法干扰内源性Rsf-1表达,并检测干扰效率。应用集落形成、流式细胞术检测Rsf-1干扰前后肺癌细胞增殖能力的变化。应用Western blot检测干扰内源性Rsf-1表达前后肺癌细胞中增殖相关因子的变化。结果 Western blot结果显示:肺癌细胞中Rsf-1蛋白表达水平明显高于正常支气管上皮HBE细胞系,其中H1299、H460细胞中存在非常明显的Rsf-1高表达。转染Rsf-1特异的si RNA于高表达Rsf-1的H1299和H460细胞后,其克隆形成明显少于对照组(H1299细胞中对照组和干扰组分别为123±15和83±9;H460细胞中对照组和干扰组分别为218±18和112±17)(P<0.05)。流式细胞术结果显示:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中G1期细胞比例增多(H1299细胞中对照组和干扰组分别为56%±5%和71%±7%;H460细胞中对照组和干扰组分别为53%±4%和70%±6%),S期细胞比例减少(H1299细胞中对照组和干扰组分别为17%±2%和11%±5%;H460细胞中对照组和干扰组分别为19%±2%和10%±5%)。细胞周期相关蛋白检测结果:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中cyclin D1和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p ERK)水平明显下调。干扰Rsf-1在下调H1299和H460细胞p ERK蛋白表达的作用结果与应用细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂U0126相似。结论 Rsf-1可通过cyclin D1/ERK相关通路促进肺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 染色质重塑因子1 肺癌 小干扰RNA 磷酸化细胞外调节蛋白激酶 CYCLIND1
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雷公藤甲素调控宫颈癌顺铂耐药和血管生成相关研究 被引量:1
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作者 马爱迪 张玥 +2 位作者 蒋奇欣 曲琰 张秋华 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第17期2572-2577,2583,共7页
目的:探讨雷公藤甲素通过微小核糖核酸-138-5p(miR-138-5p)/染色质重塑因子1(RSF-1)调控宫颈癌顺铂(DDP)耐药和血管生成的相关机制。方法:选用人宫颈癌细胞(HeLa)、人胚肾细胞(293T)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行体外实验,建立HeLa/DD... 目的:探讨雷公藤甲素通过微小核糖核酸-138-5p(miR-138-5p)/染色质重塑因子1(RSF-1)调控宫颈癌顺铂(DDP)耐药和血管生成的相关机制。方法:选用人宫颈癌细胞(HeLa)、人胚肾细胞(293T)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行体外实验,建立HeLa/DDP耐药细胞株,按简单随机法将HeLa/DDP分为顺铂+HeLa/DDP组、雷公藤甲素+顺铂+HeLa/DDP组、雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p抑制剂(miR-138-5p inhibitor)+HeLa/DDP组、雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+小干扰核酸染色质重塑因子1(si-RSF-1)+HeLa/DDP组,将293T分为空白对照模拟物(NC mimic)组、miR-138-5p mimic组,将HUVEC分为顺铂+HUVEC组、雷公藤甲素+顺铂+HUVEC组、雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+HUVEC组、雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+si-RSF-1+HUVEC组。检测各组细胞增殖率、迁移能力、miR-138-5p和RSF-1水平并验证RSF-1与miR-138-5p的靶向关系和对其细胞小管形成的影响。结果:与顺铂+HeLa/DDP组比较,雷公藤甲素+顺铂+HeLa/DDP组细胞24、48、72 h增殖率、迁移能力降低(均P<0.05);与顺铂+HeLa/DDP组比较,雷公藤甲素+顺铂+HeLa/DDP组中miR-138-5p水平明显升高,而RSF-1明显降低(均P<0.05);与雷公藤甲素+顺铂+HeLa/DDP组比较,雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+HeLa/DDP组miR-138-5p表达水平明显降低,而RSF-1明显升高(均P<0.05);与雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+HeLa/DDP组比较,雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+si-RSF-1+HeLa/DDP组miR-138-5p水平无明显差异(P>0.05),而RSF-1明显降低(P<0.05);与NC mimic组比较,miR-138-5p mimic组共转染RSF-1-野生型质粒(RSF-1-WT)萤光素酶活性降低;与顺铂+HUVEC组比较,雷公藤甲素+顺铂+HUVEC组管状结构生成数量明显降低;与雷公藤甲素+顺铂+HUVEC组比较,雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+HUVEC组管状结构生成数量明显降低;与雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+HUVEC组比较,雷公藤甲素+顺铂+miR-138-5p inhibitor+si-RSF-1+HUVEC组管状结构生成数量明显降低(均P<0.05)。结论:雷公藤甲素可改善宫颈癌细胞的DDP耐药性以及血管生成,其作用机制可能与miR-138-5p/RSF-1途径有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 宫颈癌 微小核糖核酸-138-5p 染色质重塑因子1 顺铂 耐药性 血管生成 细胞增殖
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