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用气孔保卫细胞叶绿体计数法鉴定烟草染色体倍性方法初探 被引量:16
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作者 杨艳琼 何丽萍 +1 位作者 和凤美 王荔 《种子》 CSCD 北大核心 2002年第3期24-25,56,共3页
经不同浓度秋水仙碱液加倍处理的烟草花粉植株 ,用叶片气孔保卫细胞叶绿体计数法鉴定染色体倍性。研究表明 :气孔保卫细胞叶绿体数平均值差异极显著 ,单倍体 95 %以上的叶绿体数在 14个以下 ,双倍体 95 %以上的叶绿体数则在 14个以上。... 经不同浓度秋水仙碱液加倍处理的烟草花粉植株 ,用叶片气孔保卫细胞叶绿体计数法鉴定染色体倍性。研究表明 :气孔保卫细胞叶绿体数平均值差异极显著 ,单倍体 95 %以上的叶绿体数在 14个以下 ,双倍体 95 %以上的叶绿体数则在 14个以上。经开花结实验证其准确率达 91% ,且展开到第 展开更多
关键词 气孔 细胞 叶绿体 计数法 烟草 气孔保卫细胞 染色体倍性鉴定 花粉植株
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利用流式细胞术鉴定桑树染色体倍性的方法 被引量:16
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作者 杨静 宋勤霞 +3 位作者 宁军权 孙自余 钱永华 焦锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期8-17,共10页
利用流式细胞术可以快速、准确地鉴定植物染色体倍性,但需要针对不同植物样本的制备及具体操作对应用方法进行选择和优化。为了建立适合桑树染色体倍性快速鉴定的流式细胞术应用方法,以桑树幼叶为材料,比较以不同解离液及机械解离方法... 利用流式细胞术可以快速、准确地鉴定植物染色体倍性,但需要针对不同植物样本的制备及具体操作对应用方法进行选择和优化。为了建立适合桑树染色体倍性快速鉴定的流式细胞术应用方法,以桑树幼叶为材料,比较以不同解离液及机械解离方法和不同离心漂洗次数制作样本用流式细胞术检测的效果,并用不同染色体倍性桑品种的幼叶为材料,以效果最佳的方法进行验证试验。优化的样本制备方案为:采集0.2 g桑树幼叶,置于预冷的平面玻璃上,加入Mg SO4解离液后,用双面刀片快速切碎,转移至培养皿中静置3~5 min,用300目细胞筛网过滤至1.5 m L离心管中,得到500μL单细胞核悬浮液,再加入PI溶液(最终质量浓度为50μg/m L)和RNase A溶液(最终质量浓度为30μg/m L),4℃避光环境下染色30 min,经300目细胞筛网过滤后用流式细胞仪检测。如果采集叶片后不能立即进行检测,可在-80℃下保存待测。试验结果还表明,用在-80℃保存10 d和40 d的冷冻幼叶与用新鲜幼叶制备的样本所得到的检测效果相似。初步建立的适合桑树染色体倍性鉴定的流式细胞术应用方法效果最佳,具有细胞碎片少、主峰清晰、杂峰少等优点。 展开更多
关键词 桑树 染色体倍性鉴定 流式细胞术 单细胞核悬浮液
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