秀珍菇染料脱色过氧化物酶基因的克隆及表达分析

1

作者 王伟科 陆娜 +1 位作者 林佳瑶 陈观平 《中国食用菌》 2023年第6期56-61,68,共7页

通过对经低温刺激(10℃)和恒温(26℃)培养的秀珍菇菌丝体进行高通量转录组测序,利用生物信息学分析筛选获得秀珍菇染料脱色过氧化物酶全长基因(命名为PpDypA)。为了探究PpDypA在低温刺激后菌丝体中的功能与表达情况,克隆基因后进行生物... 通过对经低温刺激(10℃)和恒温(26℃)培养的秀珍菇菌丝体进行高通量转录组测序,利用生物信息学分析筛选获得秀珍菇染料脱色过氧化物酶全长基因(命名为PpDypA)。为了探究PpDypA在低温刺激后菌丝体中的功能与表达情况,克隆基因后进行生物信息学分析,结果表明该基因全长为1515 bp,编码504个氨基酸,其蛋白相对分子质量约54.8 kDa。氨基酸序列系统进化分析结果显示,染料脱色过氧化物酶家族具有很高的同源性,PpDypA编码蛋白与紫孢侧耳亲缘关系最近。经实时荧光定量PCR检测,该基因在秀珍菇经过低温处理后表达量显著上升,推测其可能经低温诱导表达,促使菌丝体启动抗氧化防御系统缓解低温逆境胁迫,且促进木质素降解从而为原基形成提供营养和能量。 展开更多

关键词 秀珍菇 染料脱色过氧化物酶基因 克隆 序列分析 表达分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

染料脱色过氧化物酶在木质素降解中的应用研究进展 被引量：1

2

作者 许艳东 杨趁仙 +5 位作者 杨寒香 高梦祥 李天赐 辛颖 段晓杰 朱婷伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期339-347,共9页

在对玉米秸秆、小麦麸皮等植物生物质资源的开发利用过程中发现,木质素结构复杂,难以降解,极大影响了内部活性物质的释放和原料的加工特性。因此,降解木质素是提高植物生物质资源利用价值的重要步骤之一。常用的木质素降解预处理方法有... 在对玉米秸秆、小麦麸皮等植物生物质资源的开发利用过程中发现,木质素结构复杂,难以降解,极大影响了内部活性物质的释放和原料的加工特性。因此,降解木质素是提高植物生物质资源利用价值的重要步骤之一。常用的木质素降解预处理方法有物理法、化学法和生物法,生物法主要是采用微生物或其产生的生物酶对木质素进行降解,其中染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidases EC.1.11.1.19,DyPs)对木质素的处理具有积极作用,并能够降解不同的染料、氧化类胡萝卜素、甲氧基化芳烃等。DyPs与其他真菌过氧化物酶如木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)、锰过氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)存在很大差异,在氨基酸序列、蛋白质结构、催化残基、物理化学性质等方面有很大不同。因此,该文从氨基酸序列、酶学性质等方面综述了DyPs的结构和催化特性,总结了典型的DyPs对木质素的高效降解能力。同时,该文基于基因工程对提高DyPs稳定性和催化活性的研究策略以及DyPs的重要工业应用和面临的挑战进行了综述。 展开更多

关键词 染料脱色过氧化物酶 木质素 降解机理 基因改造

在线阅读 下载PDF 职称材料

合成染料与染料脱色过氧化物酶Il-DyP4相互作用的光谱分析

3

作者 严凤燕 杨阳 荚荣 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第3期91-101,共11页

利用紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法,分析蒽醌类染料(reactive blue 19(RB19),reactive blue 4(RB4))、偶氮类染料(reactive violet 5(RV5),reactive black 5(RB5))及底物2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)与染料... 利用紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法,分析蒽醌类染料(reactive blue 19(RB19),reactive blue 4(RB4))、偶氮类染料(reactive violet 5(RV5),reactive black 5(RB5))及底物2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)与染料脱色过氧化物酶Il-DyP4之间的相互作用.紫外-可见吸收光谱法结果表明,Il-DyP4和上述底物之间均形成了复合物;荧光光谱法结果表明,上述底物均使Il-DyP4产生了荧光淬灭效应,且淬灭类型为静态淬灭,符合紫外-可见吸收光谱的结果.根据双对数方程■,计算出RB19,RB4,RV5,RB5,ABTS与Il-DyP4相互作用的表观结合常数(Ka)分别为:9.386 2×10^(4)L·mol^(-1)(298 K),5.615 7×10^(6) L·mol^(-1)(298 K),1.926 2×10^(6) L·mol^(-1)(288 K),5.277 8×10^(5) L·mol^(-1)(298 K),2.234 6×10^(5) L·mol^(-1)(298 K).热力学参数分析结果表明,上述底物与Il-DyP4的结合依赖于疏水相互作用,是自发的吸热过程. 展开更多

关键词 染料脱色过氧化物酶 紫外-可见吸收光谱 荧光光谱 染料类底物 疏水相互作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

红平菇HP1锰过氧化物酶基因克隆及染料脱色的研究 被引量：4

4

作者 郑苗苗 张令昂 +1 位作者 焦战战 邵淑丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期1757-1763,共7页

采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为... 采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为358.7 U·L-1,提取经优化筛选后的锰过氧化物酶粗酶液,对4种具有不同化学结构的染料进行了脱色试验。结果表明,对异戊二烯类番红在6 h时脱色率为82.6%。因此,显示出红平菇HP1锰过氧化物酶对番红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景。采用RT-PCR和RACE技术,从红平菇HP1菌株中获得编码锰过氧化物酶基因的c DNA及DNA基因的全长序列,基因组大小为1404 bp。比较该锰过氧化物酶基因的c DNA和基因组DNA的全长序列,发现该基因包含5个外显子和4个内含子。c DNA序列的全长为1199 bp,其中包含一个完整的ORF,长度为1095 bp,编码365个氨基酸。 展开更多

关键词 红平菇HP1 锰过氧化物酶 产酶条件 染料脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶对染料脱色的性能比较 被引量：8

5

作者 章燕芳 李华钟 +1 位作者 华兆哲 陈坚 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期17-21,共5页

通过控制培养基中Mn2 +的浓度获得只含有木质素过氧化物酶 (LiP)或锰过氧化物酶 (MnP)的单一酶培养物 ,用于比较LiP和MnP对染料降解脱色的条件和能力的差异。结果表明 ,LiP对橙Ⅰ降解脱色的最佳条件为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 0 ,温度 ... 通过控制培养基中Mn2 +的浓度获得只含有木质素过氧化物酶 (LiP)或锰过氧化物酶 (MnP)的单一酶培养物 ,用于比较LiP和MnP对染料降解脱色的条件和能力的差异。结果表明 ,LiP对橙Ⅰ降解脱色的最佳条件为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 0 ,温度 4 0℃ ;MnP为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 5,温度 4 0℃。最佳条件下 ,考察LiP和MnP作用下染料浓度和染料类型对脱色的影响 ,发现LiP作用下脱色率明显高于MnP作用下的脱色率 ,表明LiP可作用的染料浓度比MnP高 ,可作用的染料范围比MnP大。 展开更多

关键词 黄孢原毛平革菌 木质素过氧化物酶 锰过氧化物酶 脱色 染料 废水处理

在线阅读 下载PDF 职称材料

偏肿革裥菌锰过氧化物酶酶学性质和染料脱色 被引量：3

6

作者 张玉龙 池玉杰 冯连荣 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期73-80,共8页

【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条... 【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检测最适反应温度及温度稳定性、最适反应p H值及p H稳定性;采用lineweaver-Burk双倒数作图法求解米氏动力学常数Km值。研究L.gibbosa菌种培养液和MnP纯酶液对蒽醌类的茜素红、偶氮类的刚果红、杂环类的中性红和三苯基甲烷类的结晶紫等4种不同类型染料的脱色能力。【结果】串联质谱扫描出2条MnP的保守序列肽段,与克隆到的基因Lg-mnp1编码的Lg-MnP1(Gen Bank登录号:ACO92620)序列完全吻合,表明其所代表的酶蛋白Lg-MnP1就是唯一电泳带中主要的蛋白。Lg-MnP1的表观分子量为45.39 k Da,最适反应温度为35℃,在低于40℃的条件下都具有一定的催化能力,但温度超过50℃后迅速失活;其最适反应pH值为3.5,p H超过4.5反应程度就迅速下降,在p H为2~3时最稳定;在以2,6-DMP为底物时,在21℃条件下其米氏常数Km为6.124 mmol·L^(-1)。L.gibbosa培养液对染料在1 h的脱色率分别为茜素红100%、中性红22.17%、刚果红19.09%,对结晶紫的脱色率很低,在36 h脱色率仅为0.018%。纯化后的Lg-MnP1溶液对染料的最大脱色率在2 h分别为中性红100%、刚果红95.55%、茜素红75.85%和结晶紫36.57%。【结论】SDS-PAGE得到的唯一一条电泳带中的MnP是Lg-MnP1。Lg-MnP1是一种中温性、偏酸性的酶,与2,6-DMP的亲和力较大。L.gibbosa含有菌丝的培养液对茜素红具有彻底的降解效果,但Lg-MnP1纯酶液对中性红、刚果红和结晶紫的降解效率要远高于同时含有菌丝、漆酶和MnPs的培养液。 展开更多

关键词 偏肿革裥菌 锰过氧化物酶 纯化 酶学性质 染料脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

EDTA对木质素过氧化物酶在染料脱色中的影响 被引量：6

7

作者 鲁时瑛 李华钟 陈坚 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2002年第4期393-396,共4页

在反应液中含 2mmol/LEDTA时 ,2 4h后染料甲基橙的脱色率比未加EDTA的下降约70 % .添加 2mmol/LEDTA明显地抑制了木质素过氧化物酶 (LiP)对多种染料的脱色 .酶动力学研究表明 :EDTA对LiP的抑制属非竞争性抑制 .添加比EDTA稍大量的Zn2 +... 在反应液中含 2mmol/LEDTA时 ,2 4h后染料甲基橙的脱色率比未加EDTA的下降约70 % .添加 2mmol/LEDTA明显地抑制了木质素过氧化物酶 (LiP)对多种染料的脱色 .酶动力学研究表明 :EDTA对LiP的抑制属非竞争性抑制 .添加比EDTA稍大量的Zn2 + 能解除EDTA对LiP的抑制 ,其他多种金属离子也能减轻EDTA的抑制作用 . 展开更多

关键词 木质素过氧化物酶 乙二胺四乙酸 螯合剂 非竞争性抑制 脱色 染料

在线阅读 下载PDF 职称材料

构巢曲霉锰过氧化物酶转化子菌株对6种染料的脱色 被引量：1

8

作者 张健 池玉杰 于存 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期99-103,共5页

为了获得构巢曲霉(Aspergillus nidulans)锰过氧化物酶转化子菌株TN02A7-Lg-mnp2对不同染料的脱色效果。用分光光度法对酶活性检测的丙二酸钠缓冲溶液的pH进行了优化筛选,用单因素和正交试验对产酶条件进行了优化;检测了优化后的酶液对... 为了获得构巢曲霉(Aspergillus nidulans)锰过氧化物酶转化子菌株TN02A7-Lg-mnp2对不同染料的脱色效果。用分光光度法对酶活性检测的丙二酸钠缓冲溶液的pH进行了优化筛选,用单因素和正交试验对产酶条件进行了优化;检测了优化后的酶液对达旦黄、孔雀石绿、中性红、刚果红、曲利本蓝和结晶紫的脱色效果。菌株酶液对偶氮类的达旦黄、三苯基甲烷类的孔雀绿和杂环类的中性红都有显著的脱色效果,在1 h时脱色率分别为达94.41%、91.43%和90.00%,在16 h时脱色率分别为98.36%、100%和96.47%。酶液对双偶氮的刚果红和曲利本蓝也有不错的脱色效果,在16 h的脱色率分别为96.76%和89.39%。对三苯基甲烷类的结晶紫的脱色效果相对较弱,在16 h的脱色率为67.31%。最终结果表明,菌株TN02A7-Lg-mnp2的酶液对多种染料都有很强的脱色能力,在染料废水处理方面具有极强的应用前景。 展开更多

关键词 构巢曲霉 锰过氧化物酶 转化子 染料脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

共表达谷氨酰-tRNA还原酶增强染料脱色过氧化物酶在大肠杆菌中的表达活性 被引量：1

9

作者 顾鹏帅 潘梅 +1 位作者 丁亮亮 唐蕾 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期45-50,共6页

染料脱色过氧化物酶(dye-decoloorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶类,常因缺乏辅因子而导致催化活性低。将来源于褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的染料脱色过氧化物酶基因(TfuDyP)与大肠杆菌谷氨酰-tRNA... 染料脱色过氧化物酶(dye-decoloorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶类,常因缺乏辅因子而导致催化活性低。将来源于褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的染料脱色过氧化物酶基因(TfuDyP)与大肠杆菌谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA),构建重组质粒phemA-DyP,转化至E.coli BL21中进行共表达。分别以2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和顽固性染料活性蓝19(RB19)、溴酚蓝、溴甲酚绿为底物检测TfuDyP的催化活力以及染料脱色效率。结果表明,诱导后的共表达菌株pAD胞内血红素含量为9. 8μmol/L,而单独过表达基因TfuDyP的菌株pD仅为3. 4μmol/L。TfuDyP纯酶的全波长扫描分析表明,在菌株pAD中DyP酶与血红素的结合度相比pD有较大幅度的提升。pAD菌株表达的DyP酶活力较pD菌株提高了110%,酶活力的提高使其在染料脱色应用方面也得到增强。在pAD菌株培养基中分别添加谷氨酸(Glu)、FeCl2使得胞内血红素含量、DyP酶活力和染料脱色效率比未添加时进一步提高。以上结果为TfuDyP的功能开发奠定了基础,同时也为其他血红素依赖性过氧化物酶的研发提供借鉴。 展开更多

关键词 大肠杆菌 褐色嗜热裂孢菌 血红素 染料脱色过氧化物酶 共表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

红球菌染料脱色过氧化物酶的异源表达及活性分析 被引量：1

10

作者 皮倩 夏荣 唐蕾 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期86-91,共6页

染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。由于能够降解蒽醌类染料,DyP成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活性的方法是DyP后续生产... 染料脱色过氧化物酶(dye-decolorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。由于能够降解蒽醌类染料,DyP成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活性的方法是DyP后续生产应用的关键所在。克隆来自红球菌(Rhodococcus jostii)的染料脱色过氧化物酶基因RhDypB,实现在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的高效表达,并对提高酶活性的方法进行了研究。利用一步克隆技术构建重组菌株pET24b-DypB/BL21,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导使蛋白表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,比较了外源添加血红素合成前体5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)和共表达大肠杆菌血红素合成途径中的谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA)对酶活性的影响。SDS-PAGE显示在40 kDa有明显的目的条带(纯度达到90%),蛋白质量浓度可达100 mg/L。添加5-ALA以及共表达hemA分别使血红素浓度增加至8.9和2.4μmol/L,相应的酶活性提高了102%和93%。RhDypB的可溶性表达与血红素含量的提升,为以血红素作为辅因子的过氧化物酶的相关研究提供依据。 展开更多

关键词 5-氨基乙酰丙酸 大肠杆菌 染料脱色过氧化物酶 谷氨酰-tRNA还原酶 红球菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

产锰过氧化物酶细菌的筛选及其对孔雀石绿脱色的研究 被引量：5

11

作者 杨晔 李国辉 +4 位作者 高剑平 丁重阳 顾正华 张梁 石贵阳 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1180-1183,共4页

从无锡某木材厂的腐木及腐殖土的表层土样中筛选分离得到6株产锰过氧化物酶的细菌,其中产酶最优的一株菌J09经鉴定为草木犀中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti。在优化的条件下,该菌株发酵72 h锰过氧化物酶产量达到最高值,为607.7 U/L。... 从无锡某木材厂的腐木及腐殖土的表层土样中筛选分离得到6株产锰过氧化物酶的细菌,其中产酶最优的一株菌J09经鉴定为草木犀中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti。在优化的条件下,该菌株发酵72 h锰过氧化物酶产量达到最高值,为607.7 U/L。利用粗酶液和发酵培养液对15 mg/L的孔雀石绿进行脱色处理3 h,脱色率分别达到78.5%和89.8%,好氧条件下的脱色率高于厌氧条件的脱色率,孔雀石绿对该菌具有一定的毒性。 展开更多

关键词 锰过氧化物酶 草木犀中华根瘤菌 染料脱色 孔雀石绿

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因工程菌漆酶对蒽醌染料的脱色研究 被引量：10

12

作者 郭梅 路福平 +3 位作者 刘敏尧 李拖平 梁鹏 蒲军 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期133-136,共4页

利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,研究了重组漆酶对蒽醌染料Remazol Brilliant Blue R脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌染料RBBR脱色的最佳pH值为4.5,温度为45℃,当溶液中漆酶活力为10.0U/mL时... 利用基因工程菌甲醇毕赤酵母(PMAD16/pMETαA-Lcc1)培养产生的重组漆酶,研究了重组漆酶对蒽醌染料Remazol Brilliant Blue R脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌染料RBBR脱色的最佳pH值为4.5,温度为45℃,当溶液中漆酶活力为10.0U/mL时,在最适脱色条件下作用14h,粗漆酶和纯化漆酶对蒽醌染料RBBR(80mg/L)的脱色率分别为95.2%和87.5%,重组漆酶可有效地使蒽醌染料RBBR脱色。 展开更多

关键词 基因工程菌 重组漆酶 蒽醌染料RBBR 脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

黄孢原毛平革菌合成锰过氧化物酶的工艺 被引量：11

13

作者 李华钟 章燕芳 +1 位作者 华兆哲 陈坚 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期48-52,共5页

研究了多种营养条件及培养条件对黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium )WX2 13合成锰过氧化物酶的影响 .当培养基中葡萄糖质量浓度为 10 g/L ,酒石酸铵质量浓度为0 .2 g/L,吐温 80质量浓度为 1g/L ,MnSO4 ·H2 O为 0 .14g/... 研究了多种营养条件及培养条件对黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium )WX2 13合成锰过氧化物酶的影响 .当培养基中葡萄糖质量浓度为 10 g/L ,酒石酸铵质量浓度为0 .2 g/L,吐温 80质量浓度为 1g/L ,MnSO4 ·H2 O为 0 .14g/L ,采用苯二甲酸缓冲液 ,最终pH 4 .5 ,2 5 0mL的三角瓶装液量 90mL ,接种量为 1.2× 10 6mL- 1时所获酶活较高 .经条件优化后锰过氧化物酶的活力达到 5 5 9U/L ,比未优化前提高了 36% .加入染料培养 ,发现该酶对所选用的偶氮染料、三苯甲烷类染料。 展开更多

关键词 黄孢原毛平革菌 锰过氧化物酶 脱色 染料 降解 合成工艺 摇瓶培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

红平菇漆酶基因异源表达及对染料脱色的研究 被引量：7

14

作者 郑苗苗 邵淑丽 +2 位作者 张东向 张令昂 焦战战 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第12期84-90,共7页

以白腐菌红平菇Pleurotus djamor RNA为模板,通过RT-PCR(反转录)得到红平菇漆酶Pd-lac1基因的完整CDS序列。构建毕赤酵母表达载体pPICZB-Pd-Lac1(重组表达载体),并通过电转化法导入毕赤酵母Pichia pastoris中,通过PCR结果证明,Pd-lac1的... 以白腐菌红平菇Pleurotus djamor RNA为模板,通过RT-PCR(反转录)得到红平菇漆酶Pd-lac1基因的完整CDS序列。构建毕赤酵母表达载体pPICZB-Pd-Lac1(重组表达载体),并通过电转化法导入毕赤酵母Pichia pastoris中,通过PCR结果证明,Pd-lac1的CDS序列部分阳性转化子已经整合到甲醇毕赤酵母染色体上。经液体摇瓶培养后筛选出蛋白表达较高的酵母工程菌株,漆酶活力达54 U/L。进而研究了重组漆酶对染料脱色的影响。结果表明:重组漆酶对蒽醌类SN4R脱色可达52.8%;杂环类中性红、偶氮类甲基橙和三苯基甲烷类孔雀绿的脱色率低于SN4R,脱色率分别为14.8%、14.5%、0.24%,显示出重组漆酶对SN4R脱色效率具有较大的应用潜力,从而对含蒽醌类染料的废水处理具有更广的应用前景。 展开更多

关键词 红平菇 漆酶基因 毕赤酵母 异源表达 染料脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

偏肿革裥菌漆酶基因克隆及不同染料脱色研究 被引量：4

15

作者 郑苗苗 池玉杰 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期744-750,共7页

染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解.漆酶粗酶液对终浓度为50mg/L的不同化学结构的染料的脱色研究,可快速对蒽醌类茜素红进行脱色可达100%;杂环类中性红、偶氮类刚果红和三苯基甲烷类结晶紫的脱色效果低于茜素红,测试的3种染料均... 染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解.漆酶粗酶液对终浓度为50mg/L的不同化学结构的染料的脱色研究,可快速对蒽醌类茜素红进行脱色可达100%;杂环类中性红、偶氮类刚果红和三苯基甲烷类结晶紫的脱色效果低于茜素红,测试的3种染料均可在没有介体存在的条件下被漆酶脱色,显示出偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)漆酶对茜素红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景.利用PCR和RACE技术首次从该菌株中获得编码漆酶基因的cDNA及其基因组全长序列,基因组大小为2 106bp.通过比较该漆酶基因的cDNA和基因组DNA的全长序列,发现该基因包含11个外显子和10个内含子.cDNA序列的全长为1 982bp,其中包含一个完整的ORF,长度为1 563bp,编码520个氨基酸. 展开更多

关键词 偏肿革裥菌 漆酶基因 染料脱色 结构域

在线阅读 下载PDF 职称材料

白灵菇木质素降解酶系的检测及其染料脱色能力的研究 被引量：3

16

作者 于存 徐红云 池玉杰 《安徽农业科学》 CAS 2014年第6期1784-1787,1882,共5页

[目的]明确白灵菇(Pleurotus ferulae)分泌木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Laccase)的规律,以及白灵菇染料脱色的能力。[方法]利用紫外可见分光光度计,检测4种培养方式下白灵菇木质素降解酶活性,并在此基础上进行了白... [目的]明确白灵菇(Pleurotus ferulae)分泌木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Laccase)的规律,以及白灵菇染料脱色的能力。[方法]利用紫外可见分光光度计,检测4种培养方式下白灵菇木质素降解酶活性,并在此基础上进行了白灵菇对5种染料的脱色研究。[结果]4种培养方式下,可以检测到MnP和Laccase的活性,但并未检测到LiP。添加Mn2+和2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)对MnP和Laccase的产生有抑制作用,而添加青杨木屑可以将MnP的活性提高1.28倍,将Laccase的活性提高3.75倍;白灵菇对中性红和活性黑2种染料的最大脱色率分别为87.12%和86.13%,对活性红和刚果红的最大脱色率分别为45.91%和32.28%,而对结晶紫几乎无脱色能力。[结论]白灵菇产Laccace活性要高于MnP;与脱色活性红、刚果红、结晶紫相比,白灵菇对中性红和活性黑2种染料的脱色更为彻底。 展开更多

关键词 白灵菇 锰过氧化物酶 漆酶 木质素过氧化物酶 染料脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

白腐真菌产锰酶及对酸性蓝45的脱色 被引量：2

17

作者 连小英 于丹 +2 位作者 周成 赵海燕 文湘华 《水处理技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期34-37,50,共5页

为提高白腐真菌在自由悬浮条件下锰过氧化物酶(MnP)的产量,在培养液中投加打结棉线载体,通过载体投加量和培养条件的调整,在载体投加量370g·L-1、转速130r·min-1、温度37℃,葡萄糖和酒石酸氨的质量浓度分别为10g·L-1和0.... 为提高白腐真菌在自由悬浮条件下锰过氧化物酶(MnP)的产量,在培养液中投加打结棉线载体,通过载体投加量和培养条件的调整,在载体投加量370g·L-1、转速130r·min-1、温度37℃,葡萄糖和酒石酸氨的质量浓度分别为10g·L-1和0.8g·L-1条件下,MnP产量从自由悬浮培养的7.10提高到24.5mkat,初始MnP也提前3d出现。以370g·L-1载体投加体系为例,考察其对不同含量酸性蓝45的脱色效果,2d内各含量染料的脱色率均超过94%,同时该体系对酸性蓝45具有一定重复脱色能力,重复脱色次数与染料的含量有关。 展开更多

关键词 白腐真菌 锰过氧化物酶 固定化 染料 脱色

在线阅读 下载PDF 职称材料

一色齿毛菌产MnP的条件优化及对染料的脱色 被引量：4

18

作者 于存 池玉杰 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第7期121-127,共7页

锰过氧化物酶（MnP）是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条... 锰过氧化物酶（MnP）是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条件进行优化;然后对优化后的胞外酶液进行5种染料的脱色研究。结果表明,一色齿毛菌产MnP的最优组合为：果糖10 g·L^-1、硝酸铵0.2 g·L^-1、Mn2＋2.67 mmol·L^-1、pH 5.5、250 mL三角瓶70 mL装液量、150 r·min^-1摇瓶培养、接种=8 mm的菌片9片、在34℃下培养7天后MnP活性高达95.47 U·L^-1,是初始培养条件最高酶活的5.2倍。染料脱色结果表明,一色齿毛菌对3种结构类型的5种染料都有较大程度的脱色,其中8天时对活性黑的脱色最为彻底,脱色率为98.4%;对中性红、结晶紫、活性红和刚果红的脱色率也高达72.3%-89.4%。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 锰过氧化物酶 优化培养 染料脱色 活性黑

在线阅读 下载PDF 职称材料

污水处理系统中染料脱色酵母菌的筛选及脱色性能 被引量：1

19

作者 张昊 李晶 +5 位作者 张帆 蒿洪欣 许园园 刘冬 韩新宽 杨清香 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第4期113-116,共4页

从某印染厂和制药厂的污水处理系统中筛选了21株脱色酵母菌,测定了各菌株对染料RB5,M-3BE、KNR的脱色能力以及锰依赖过氧化物酶(MnP)的产生情况.结果表明,培养72h时有18株酵母菌对RB5,M-3BE的脱色率超过90%,且检测到MnP活性.26SrDNA序... 从某印染厂和制药厂的污水处理系统中筛选了21株脱色酵母菌,测定了各菌株对染料RB5,M-3BE、KNR的脱色能力以及锰依赖过氧化物酶(MnP)的产生情况.结果表明,培养72h时有18株酵母菌对RB5,M-3BE的脱色率超过90%,且检测到MnP活性.26SrDNA序列分析结果表明,脱色酵母菌主要属于Rhodotorula mucilaginosa,Dipodascus capitatus,Torulaspora delbrueckii,Candida parapsilosis,Candida zeylanoides和Debaryomyces hansenii. 展开更多

关键词 污水处理 酵母菌 染料脱色 锰依赖过氧化物酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

选择压力对染料脱色酵母菌活性影响的研究 被引量：1

20

作者 张昊 杨清香 +2 位作者 杨敏 王振宇 李宗义 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期16-18,共3页

一株对染料活性黑5(Reactive Black 5,RB5)具有高效降解活性的酵母菌—Debaryomyces polymor-phus,在传代培养过程中脱色能力及产锰依赖过氧化物酶(MnP)活性逐步降低。研究结果表明,采用向培养体系中反复投加新鲜染料的方法,可以对脱色... 一株对染料活性黑5(Reactive Black 5,RB5)具有高效降解活性的酵母菌—Debaryomyces polymor-phus,在传代培养过程中脱色能力及产锰依赖过氧化物酶(MnP)活性逐步降低。研究结果表明,采用向培养体系中反复投加新鲜染料的方法,可以对脱色酵母菌的生长形成持续性选择压力,从而使菌株的脱色和产MnP活性得以显著提高。 展开更多

关键词 选择压力 酵母菌 染料脱色 锰依赖过氧化物酶

在线阅读 下载PDF 职称材料