柑橘衰退病毒柚分离株的p25/Hinf1 RFLP分析 被引量：5

1

作者 宋震 徐小峰 +1 位作者 杨方云 周常勇 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期28-31,共4页

对123个柑橘衰退病毒柚分离株进行p25/Hinf1 RFLP分析明确:样品中,单一p25/Hinf1 RFLP组群样品占样品总量的82.9%,说明我国田间受侵染柚类中柑橘衰退病毒株系相对较为单一;RFLP组群6的样品占样品总量的79.7%,说明目前柚类生产上的优势... 对123个柑橘衰退病毒柚分离株进行p25/Hinf1 RFLP分析明确:样品中,单一p25/Hinf1 RFLP组群样品占样品总量的82.9%,说明我国田间受侵染柚类中柑橘衰退病毒株系相对较为单一;RFLP组群6的样品占样品总量的79.7%,说明目前柚类生产上的优势流行株属于p25/Hinf1 RFLP组群6,初步认定为强毒株系;柑橘衰退病毒株柚分离株S102、S104、S106、S108属于p25/Hinf1 RFLP组群5,初步认定是弱毒株系。 展开更多

关键词 植物病毒学 柑橘衰退病毒 分离株 限制性片段长度多态性分析

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柑橘衰退病毒侵染对‘赣南早’脐橙植株组织结构及光合作用的影响 被引量：7

2

作者 易龙 陈毅群 +1 位作者 李双花 黄爱军 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期574-581,共8页

【目的】了解柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)侵染对‘赣南早’脐橙植株组织微形态结构变化及光合特性的影响,以便进一步探明CTV对寄主的侵染特性和致病机制,为生产上病害的防控提供参考依据。【方法】通过石蜡切片等技术观测... 【目的】了解柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)侵染对‘赣南早’脐橙植株组织微形态结构变化及光合特性的影响,以便进一步探明CTV对寄主的侵染特性和致病机制,为生产上病害的防控提供参考依据。【方法】通过石蜡切片等技术观测感染CTV的‘赣南早’脐橙植株及其健康植株叶片、枝条和根部组织微形态结构,利用紫外可见分光光度计和光合仪分别测定叶片光合色素、丙二醛(MDA)含量、净光合速率和胞间CO2浓度变化,结合叶片叶绿体超微结构电镜观察,分析CTV侵染对寄主组织结构、光合器和生理功能的影响。【结果】受CTV侵染后‘,赣南早’脐橙植株叶片栅栏组织细胞间隙增大、排列松散,枝条木质部出现凹陷点、结构皱缩,根部细胞萎缩、内含物减少,叶绿体结构发生畸变;叶绿素a、b以及叶绿素总含量分别下降23.9%、16.3%和21.4%,MDA含量增加了28.5%,叶片净光合速率下降25.7%,胞间CO2浓度上升12.1%。【结论】通过分析发现CTV侵染后植株组织结构、光合器形态、叶片光合色素和MDA含量、净光合速率和胞间CO2浓度都发生了显著变化,CTV侵染影响植株叶绿体结构和光和能力降低碳水化合物制造能力,影响木质部结构萎缩阻碍光合产物向地下运输,患病植株根部细胞萎缩、内含物减少,致根系吸收和向枝叶输送水分养分能力下降,进而引起枝叶生长衰弱。 展开更多

关键词 '赣南早’脐橙 柑橘衰退病毒 组织结构 叶绿体 光合特性

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柑橘衰退病毒弱毒株筛选方法研究进展 被引量：4

3

作者 唐萌 金鑫 周彦 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期707-711,共5页

柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的衰退病是一种严重危害世界柑橘产业的病毒病害。随着我国柑橘产业的发展,柑橘衰退病的危害也日趋严重。目前交叉保护技术是防治柑橘衰退病最有效的手段。现有研究表明,由于CTV存在复杂的... 柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的衰退病是一种严重危害世界柑橘产业的病毒病害。随着我国柑橘产业的发展,柑橘衰退病的危害也日趋严重。目前交叉保护技术是防治柑橘衰退病最有效的手段。现有研究表明,由于CTV存在复杂的株系分化现象,导致弱毒株筛选仍存在诸多困难。对运用生物学方法、血清学检测以及分子生物学技术鉴定CTV弱毒株的最新研究进展予以综述,同时就现有交叉保护防治技术的不足和解决途径进行讨论和展望,旨在为更好地防治柑橘衰退病提供借鉴。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 交叉保护 弱毒株筛选

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柑橘衰退病毒基因RNAi载体的构建 被引量：1

4

作者 李芳 邓子牛 +2 位作者 赵亚 李大志 戴素明 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期140-144,共5页

基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体p CAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板... 基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体p CAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板设计正向片段和反向片段,先后与骨架载体连接,成功构建了3个RNAi载体(分别命名为ds2301–p25、ds2301–p20和ds2301–p23),并将载体ds2301–p23注射入墨西哥莱蒙叶片。制作p23基因的地高辛标记探针,用Northern杂交检测是否有si RNA产生。结果表明:用Northern杂交可以检测到p23特异的si RNA,在墨西哥莱蒙叶片中瞬时表达的农杆菌ds2301–p23可以发生RNAi,表达有效的si RNA。本研究中构建的骨架载体可以广泛用于RNAi载体的构建,含有柑橘衰退病毒基因片段的3个载体可以用于基因功能分析及具有CTV抗性的柑橘种质资源获得。 展开更多

关键词 柑橘 柑橘衰退病毒 RNAI载体 载体构建

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柑橘衰退病毒的纯化及血清学检测 被引量：3

5

作者 王彩霞 张清明 +1 位作者 洪霓 王国平 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2008年第1期10-13,共4页

以4-6月份采集感染柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）样品L5的茎尖、叶柄和皮组织为材料,采用改进的病毒提纯方法获得了CTV的提纯病毒液。用提纯CTV免疫大耳白兔,所获抗血清的间接-ELISA效价为1：25600。利用制备的CTV多克隆... 以4-6月份采集感染柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）样品L5的茎尖、叶柄和皮组织为材料,采用改进的病毒提纯方法获得了CTV的提纯病毒液。用提纯CTV免疫大耳白兔,所获抗血清的间接-ELISA效价为1：25600。利用制备的CTV多克隆抗体建立了A蛋白夹心（PAS-）ELISA、点免疫印迹（DIBA）和直接组织印迹（DTBIA）3种ELISA检测方法,并应用于湖北、湖南和江西3省主要柑橘产区CTV的检测,取得了理想的检测效果。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 纯化 抗体制备 血清学检测

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江西柑橘主产区柑橘衰退病毒分离株组群分析 被引量：3

6

作者 易龙 赖晓桦 +1 位作者 卢占军 钟八莲 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期112-114,共3页

为检测江西柑橘主产区柑橘衰退病毒分离株组群的构成情况,运用限制性片段长度多态性(RFLP)对收集自江西柑橘14个主产区果园的CTV分离株进行分析。发现209份样品的CP/HinfⅠ酶切结果中182份样品表现出单一CP/HinfⅠRFLP谱型,占鉴定样品... 为检测江西柑橘主产区柑橘衰退病毒分离株组群的构成情况,运用限制性片段长度多态性(RFLP)对收集自江西柑橘14个主产区果园的CTV分离株进行分析。发现209份样品的CP/HinfⅠ酶切结果中182份样品表现出单一CP/HinfⅠRFLP谱型,占鉴定样品总数的87.1%,其中以CP/HinfⅠRFLP第3和第1组群的分离株构成为主,分别占样品总数的55.5%和26.8%;混合CP/HinfⅠRFLP组群样品占12.9%。本次检测中发现有1个分离株为第4组群,5个分离株为第5组群,可能为潜在的弱毒分离株。本次试验中检测的江西柑橘样品以CTV单一组群感染为主。 展开更多

关键词 江西 柑橘衰退病毒 限制性片段长度多态性分析

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柚新老枝叶中柑橘衰退病毒的DTBIA检测 被引量：5

7

作者 宋震 邹敏 +3 位作者 徐小峰 唐科志 刘英 周常勇 《西南园艺》 2005年第B05期43-45,共3页

应用直接组织印迹免疫法(Direct Tissue Blot Immuno-Assay，DTBIA)检测了中国农业科学院柑橘研究所品种资源圃的212株柚植株，呈柑橘衰退病毒阳性的有94株，占样品总量的44.3％。进一步对85株DTBIA阳性柚植株的新老枝叶进行检测，结果... 应用直接组织印迹免疫法(Direct Tissue Blot Immuno-Assay，DTBIA)检测了中国农业科学院柑橘研究所品种资源圃的212株柚植株，呈柑橘衰退病毒阳性的有94株，占样品总量的44.3％。进一步对85株DTBIA阳性柚植株的新老枝叶进行检测，结果初步明确CTV在柚植株中存在不均匀分布现象，其中，新茎的平均CTV检出率最高．为77．9％．其次为新叶的77．1％；老叶和老茎的CTV检出率相对较低，分别为40．5％和38．7％。 展开更多

关键词 柚 柑橘衰退病毒 DTBIA 分布 直接组织印迹免疫法

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柑橘衰退病毒检测试剂研制及其分子特性研究 被引量：2

8

作者 洪霓 王国平 +2 位作者 王彩霞 张建坤 姜波 《湖北植保》 2009年第F06期49-51,共3页

关键词 柑橘衰退病毒 分子特性 检测试剂 株系分化 砧木种类 virus 柑橘病害 柑橘品种

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通过单蚜传毒纯化柑橘衰退病毒（CTV）分离物 被引量：1

9

作者 徐小峰 宋震 +2 位作者 周彦 邹敏 周常勇 《西南园艺》 2005年第B05期37-39,共3页

对龙凤C、立间、FJ59和0号4种CTV(柑橘衰退病毒)毒源分别用单头橘蚜传毒进行分离纯化。用直接组织点免疫(DTBIA)和P25衣壳蛋白基因所表现出来限制性片段长度多态性(RFLP)对各毒源的蚜传阳性率和组群特征进行分析。从271株受毒植物中共获... 对龙凤C、立间、FJ59和0号4种CTV(柑橘衰退病毒)毒源分别用单头橘蚜传毒进行分离纯化。用直接组织点免疫(DTBIA)和P25衣壳蛋白基因所表现出来限制性片段长度多态性(RFLP)对各毒源的蚜传阳性率和组群特征进行分析。从271株受毒植物中共获得31株感染CTV的阳性株。4种毒源的阳性检出率分别为：25．0％、3．7％、3．1％和17．8％。有22株仅带有单一组群CTV，其中从龙凤C获得6株Ⅰ组群，3株Ⅲ组群；从FJ59获得1株Ⅰ组群；从0号获得7株潜伏侵染的Ⅰ组群，2株Ⅲ组群；从立间获得出3株Ⅳ组群CTV。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 单蚜传毒 RFLP 分离 纯化 组群特征 橘蚜

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柑橘衰退病毒中国分离物HB1的血清学特性研究

10

作者 王彩霞 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期212-214,共3页

利用3种不同来源的柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）抗体（PAb-L5、PAb-I、MAbs-S4）对武汉地区发生的CTV进行检测,筛选到一个表现特异血清学性状的分离物CTV-HB1,该分离物仅同来源于中国的多克隆抗体PAb-L5发生血清学反应。... 利用3种不同来源的柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）抗体（PAb-L5、PAb-I、MAbs-S4）对武汉地区发生的CTV进行检测,筛选到一个表现特异血清学性状的分离物CTV-HB1,该分离物仅同来源于中国的多克隆抗体PAb-L5发生血清学反应。为揭示该血清学差异的分子机制,对CTV-HB1和其他几个分离物CP基因序列进行了分析,结果显示：CTV-HB1CP基因与其他19个分离物的核苷酸序列相似性在90.4%-99.4%,但CTV-HB1和CTV-L5的CP基因氨基酸序列间仅存在3个位点的变异,暗示：此3个氨基酸位点可能与CTV-HB1的血清学特性有关。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 CP基因 抗体 序列分析

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柑橘衰退病毒柚类分离物CP基因的克隆及原核表达分析

11

作者 王彩霞 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2009年第2期139-142,共4页

以来自湖北省的HB柚柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)分离物(CTV-HB1)为材料,利用RT-PCR技术对其CP基因进行克隆,序列分析结果表明:CTV-HB1与典型茎陷点分离物SY568和NUagA的核苷酸和推定氨基酸的序列相似性均在97%以上,而与CT... 以来自湖北省的HB柚柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)分离物(CTV-HB1)为材料,利用RT-PCR技术对其CP基因进行克隆,序列分析结果表明:CTV-HB1与典型茎陷点分离物SY568和NUagA的核苷酸和推定氨基酸的序列相似性均在97%以上,而与CTV速衰分离物T36和弱毒分离物T385和T30的核苷酸和氨基酸序列相似性较低,均在95%以下。将CP基因片段连接到表达载体,转化大肠杆菌后诱导重组蛋白的表达。SDS-PAGE和Westen-blot分析结果表明,经IPTG诱导后产生了预期大小的重组蛋白,该蛋白可与CTV-L5提纯病毒制备的多克隆抗体发生特异性免疫反应。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 外壳蛋白 基因克隆 原核表达

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柑橘衰退病毒侵染对寄主植物同工酶及酸性病程相关蛋白表达的影响 被引量：4

12

作者 范旭东 王彩霞 +2 位作者 叶刚 王国平 洪霓 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期77-81,共5页

以柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)不同致病力株系接种寄主植物,比较分析了寄主植物体内过氧化物酶(peroxidase,POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性变化特点。结果表明,该病毒侵染对这2种酶活性的影响因寄主品种和... 以柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)不同致病力株系接种寄主植物,比较分析了寄主植物体内过氧化物酶(peroxidase,POD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性变化特点。结果表明,该病毒侵染对这2种酶活性的影响因寄主品种和CTV株系而异,CTV强毒和弱毒株系侵染均导致墨西哥莱檬植株中POD活性明显降低;在甜橙上,CTV强毒株系接种植株中POD活性则显著性提高,而弱毒株系接种对POD的活性无明显影响;在对该病毒具有较高抗性的枳壳中,接种CTV不同株系对POD活性均无明显影响。而在接种强毒株系N25的墨西哥莱檬中PPO活性有所增强,在枳壳上则表现为接种植株的PPO活性降低,在甜橙上PPO活性无明显的变化。POD、PPO和酯酶(esterase,EST)同工酶酶谱分析的结果显示,CTV弱毒株系接种枳壳后诱导产生了2条新的EST同工酶谱带,而在其他CTV接种植株上均未诱导表达新的POD、PPO及EST酶谱。酸性病程相关蛋白分析结果显示,CTV强毒株系在甜橙上诱导产生有6条明显的酸性病程相关蛋白条带。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 过氧化物酶 多酚氧化酶 酯酶 病程相关蛋白

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柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用 被引量：5

13

作者 申世凯 曾婷 +3 位作者 乔兴华 陈力 任杰群 周彦 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2652-2660,共9页

【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)引起,是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测,建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,设计3对特异性引物和探... 【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)引起,是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测,建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,设计3对特异性引物和探针,通过引物筛选,以及优化引物浓度、反应时间和反应温度等条件,建立CTV的反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RT-RPA-LFD)快速检测方法,明确其灵敏度,并用于田间疑似样品的检测。【结果】建立了CTV的RT-RPA-LFD检测方法:最佳检测引物为RPA-1F/R,对应探针为RPA-P,最佳反应条件为40℃,25 min,且与其他5种柑橘病毒无交叉反应。该方法的灵敏度是RT-PCR的100倍,最低可检测到2.12×10^(1)拷贝·μL^(-1)的CTV核酸,与RT-qPCR相当。采用RT-RPA-LFD法在67份田间样品中检测出CTV阳性样品41份,与RT-PCR法检测结果一致。【结论】建立的CTV RT-RPA-LFD法具有操作简单、快速、结果可视等优点,适合基层植保工作者对田间样品开展快速检测。 展开更多

关键词 柑橘 柑橘衰退病毒 反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条 快速检测

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江西赣州柑橘衰退病毒种群构成变化研究 被引量：3

14

作者 张兴铠 赵金发 +2 位作者 王莹 周常勇 周彦 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期35-40,共6页

通过研究柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的种群构成,探究江西赣州纽荷尔脐橙上茎陷点型衰退病暴发的原因.从赣州的10个区县采集了199份疑似感染了CTV的纽荷尔脐橙样品,对阳性样品进行了8种基因型的检测,结果发现,有112份样品... 通过研究柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的种群构成,探究江西赣州纽荷尔脐橙上茎陷点型衰退病暴发的原因.从赣州的10个区县采集了199份疑似感染了CTV的纽荷尔脐橙样品,对阳性样品进行了8种基因型的检测,结果发现,有112份样品感染了CTV,且均含有2种及2种以上的基因型.最常见的基因型组合为T36+VT+T3+T30+S1+RB和T36+VT+T3+T68,分别占总数的13.4%和9.8%.与2004-2007年采集的CTV样品相比,2019-2020年采集的样品中新出现了RB,T30和HA16-5基因型,且T36和RB基因型的检出率显著上升.赣州CTV的种群结构发生了改变,RB和HA16-5基因型可能是引起赣州纽荷尔脐橙上茎陷点型衰退病暴发的原因. 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 基因型 种群构成

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胡柚上柑橘衰退病毒的分子检测

15

作者 武晓云 刘琦 +1 位作者 郭玉双 武小霞 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期130-134,共5页

胡柚是我国东部地区重要的柑桔栽培品种。近年来,一种以叶片黄化为主要症状的新病害在胡柚种植区暴发流行。通过血清学和分子生物学检测,研究首次从黄化的胡柚叶片中检测到柑橘衰退病毒。系统进化分析表明,分离的CTV CS-7分离物与P09.18... 胡柚是我国东部地区重要的柑桔栽培品种。近年来,一种以叶片黄化为主要症状的新病害在胡柚种植区暴发流行。通过血清学和分子生物学检测,研究首次从黄化的胡柚叶片中检测到柑橘衰退病毒。系统进化分析表明,分离的CTV CS-7分离物与P09.18、NZRB-TH30等分离物具有较近的进化关系,而与T30等强毒株系有较大的遗传距离,表明CS-7可能代表一个新的可引起胡柚植株黄化症状的株系。 展开更多

关键词 胡柚 黄斑病 柑橘衰退病毒 系统进化分析

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基于p23基因的野生柑橘和栽培柑橘上衰退病毒分离株间的遗传特征分析 被引量：1

16

作者 易龙 周常勇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期828-834,共7页

【目的】比较分析野生柑橘与栽培柑橘上衰退病毒(CTV)分离株间的分子遗传特征,为深入解析CTV的遗传进化提供相关依据。【方法】运用RT-PCR对我国云南、广西、四川、湖南、江西等省(区)的11个野生柑橘上的CTV分离株和4个国内栽培甜橙及... 【目的】比较分析野生柑橘与栽培柑橘上衰退病毒(CTV)分离株间的分子遗传特征,为深入解析CTV的遗传进化提供相关依据。【方法】运用RT-PCR对我国云南、广西、四川、湖南、江西等省(区)的11个野生柑橘上的CTV分离株和4个国内栽培甜橙及柚上的CTV强弱毒代表株分离株的p23基因进行扩增、测序,所获序列与Gen Bank收录的具有代表性的国外CTV分离株的相应基因序列进行比对分析。【结果】野生柑橘与国内外栽培柑橘上CTV分离株的p23基因序列相似率为87.7%~99.3%;密码子中碱基含量GC%<AT%,密码子转换数多于颠换数,第3位的碱基替换数最多,其次为第1位,最少是第2位;非同义突变与同义突变的比值(dN/dS)小于1,表明p23基因在进化过程中承受着净化选择。系统聚类分析表明,来自于野生柑橘上的11个CTV分离株在构建的系统发育树中分属不同的簇支,与不同来源地具有较高相似性和较低遗传距离的栽培柑橘上的CTV分离株构成同一组群。【结论】野生柑橘与栽培柑橘上的CTV分离株在碱基含量、密码子转换和颠换率及非同义突变与同义突变比值(dN/dS)等遗传特征方面均表现出一致性,系统发育分析表明,野生柑橘上CTV分离株基于p23基因序列的聚类关系与其地理来源之间无明显相关性。 展开更多

关键词 野生柑橘 栽培柑橘 柑橘衰退病毒 p23基因 遗传特征

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重庆柑橘主产区衰退病毒组群分析 被引量：2

17

作者 李小松 周彦 +2 位作者 周常勇 吕婵娟 王志刚 《西南园艺》 2006年第2期4-5,44,共3页

柑橘衰退病毒(CTV)存在严重的株系混合侵染现象,因此需要用一定的方法对混合株系进行识别。本文应用CPGs/HinfⅠ对采自重庆市6个主要柑橘产区的92个CTV阳性样品进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,结果发现在甜橙上既有单一株系侵染(CP... 柑橘衰退病毒(CTV)存在严重的株系混合侵染现象,因此需要用一定的方法对混合株系进行识别。本文应用CPGs/HinfⅠ对采自重庆市6个主要柑橘产区的92个CTV阳性样品进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,结果发现在甜橙上既有单一株系侵染(CPGs/HinfⅠRFLP组群以3为主),也有混合株系侵染(CPGs/HinfⅠRFLP组群以1、3或1、3、6组群为主),而在柚类上只带单一的CPGs/HinfⅠRFLP6组群。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 RFLP分析 甜橙 柚

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柑橘3种病毒类病原多重RT-PCR检测技术的建立及应用

18

作者 袁琳凯 马崇欢 +5 位作者 李丁山 陈志炜 江宵烽 丁新伦 张洁 吴祖建 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期339-344,共6页

【目的】建立柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)、柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和啤酒花矮化类病毒(hop stunt viroid,HSVd)的多重RT-PCR检测体系。【方法】设计多重RT-PCR引物,分析其特异性,确... 【目的】建立柑橘黄化脉明病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)、柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和啤酒花矮化类病毒(hop stunt viroid,HSVd)的多重RT-PCR检测体系。【方法】设计多重RT-PCR引物,分析其特异性,确定其最佳浓度比、最适退火温度及灵敏度,在此基础上对福建地区的柑橘样品进行检测。【结果】确定了CYVCV-F/R、CTV-F/R和HSVd-F/R等3对引物的最佳浓度比例为1∶1∶2,最适退火温度为52.9℃,灵敏度结果显示该体系可检测模板稀释到10^(-2)的阳性样品。应用该体系对采自福建部分地区的157份柑橘样品进行检测,结果发现,CYVCV、CTV和HSVd的检出率分别为47.1%、56.7%和22.9%。【结论】成功建立了柑橘CYVCV、CTV和HSVd病原的多重RT-PCR检测方法,为该类病害的检测提供准确、快速的检测方法。 展开更多

关键词 柑橘黄化脉明病毒 柑橘衰退病毒 啤酒花矮化类病毒 多重RT-PCR

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广西柑橘衰退病和黄脉病调查及其病原病毒的遗传多样性分析 被引量：5

19

作者 耿雪欣 高方栏 +3 位作者 梁文馨 梁洲勇 何新华 邹承武 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期84-91,共8页

为明确柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和柑橘黄脉病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)在广西柑橘上的发生、分布及其遗传变异情况,于2020年至2021年对百色、北海、崇左、贵港、桂林、河池、贺州、来宾、柳州、南... 为明确柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)和柑橘黄脉病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)在广西柑橘上的发生、分布及其遗传变异情况,于2020年至2021年对百色、北海、崇左、贵港、桂林、河池、贺州、来宾、柳州、南宁、梧州和玉林等12个柑橘产区进行了病毒病调查。采用RT-PCR对采集样品进行了病毒检测,并基于病毒分离物外壳蛋白(coat protein,CP)基因的核苷酸序列进行比对分析,构建系统发育树。结果表明:采集的737份柑橘样品中,CTV的检出率为20.62%,CYVCV检出率为18.32%,CTV的检出率略高于CYVCV。病毒复合侵染的现象在采集的柑橘样品中普遍存在,CTV和CYVCV复合侵染率高达34.50%。对RT-PCR产物测序共获得12个CTV分离物和6个CYVCV分离物的CP基因序列。遗传多样性分析发现,CTV和CYVCV的CP基因序列都较保守,CTV分离物的遗传进化与地理来源、寄主来源均没有明显相关性,但CYVCV分离物的遗传进化与地理位置具有相关性,而与寄主来源无明显相关性。上述研究结果可为深入了解CTV和CYVCV在广西的流行情况以及柑橘病毒病的检疫和防控提供参考。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 柑橘黄脉病毒 病原检测 遗传多样性分析

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赣南柑橘产区衰退病毒外壳蛋白基因初步分析 被引量：1

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作者 刘志芳 易龙 +1 位作者 卢占军 高玉霞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期15-20,共6页

【目的】对江西赣南柑橘果园感染衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）样品的外壳蛋白（CP）基因进行克隆及序列遗传信息分析,为利用弱毒株交叉保护法预防该地区CTV的蔓延奠定基础。【方法】运用RT-PCR扩增样品的CP基因并测序,应用软... 【目的】对江西赣南柑橘果园感染衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）样品的外壳蛋白（CP）基因进行克隆及序列遗传信息分析,为利用弱毒株交叉保护法预防该地区CTV的蔓延奠定基础。【方法】运用RT-PCR扩增样品的CP基因并测序,应用软件检测CP序列基因重组,分析碱基含量,再将所测序列与10个外国CTV分离株计算核苷酸遗传距离,比对序列同源性及构建系统发育树。【结果】214份柑橘样品中有78份感染了CTV,发病率为36.4%。78个样品中仅有一个存在基因重组现象;78个CTV分离株CP基因全长序列均为672 bp,无碱基缺失、插入等现象,CP基因平均GC含量为52.8%,AT（U）为47.2%;所有样品核苷酸遗传距离在0~0.072,与10个已知CTV分离株CP基因核苷酸遗传距离在0~0.106。78个样品的CP基因核苷酸及其推导氨基酸序列同源性分别为89.1%~100.0%和92.3%~100.0%,与10株已知CTV分离株的同源性分别为76.5%~98.9%和73.6%~99.5%。系统进化分析结果表明,78个分离样品与10株已知CTV分离株可聚为四大类群,第Ⅰ类群包含49个分离样品和7个症状不同的已知CTV分离株（6个强毒型和1个弱毒型）;第Ⅱ类群包含21个样品,国外强毒株系Qaha和引发茎陷点、速衰症状的Mexico-ctv株系聚于此类群;第Ⅲ类群仅由采自瑞金的CRJ14组成;第Ⅳ类群包括一个国外强毒株系HA16-5和采自江口、宁都的样品。【结论】赣南柑橘产区CTV分离株的CP基因保守性较高,序列存在一定程度的变异;各分离株间亲缘性较高但关系复杂,大部分样品与强毒型和茎陷点型分离株相关。 展开更多

关键词 柑橘衰退病毒 外壳蛋白基因 序列分析 基因重组

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