柑桔衰退病毒RB和VT基因型实时定量PCR检测方法建立和应用

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作者 周俊 韩镕琰 +3 位作者 张晓男 方书洁 杨欣悦 易龙 《中国南方果树》 北大核心 2024年第4期18-24,共7页

为定量检测样品中柑桔衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)RB和VT基因型含量,以RB基因型的p33基因、VT基因型的ORF1a基因为靶标,建立了RB和VT基因型的特异性实时定量PCR方法。该方法检测RB和VT基因型质粒浓度下限均为2×10^(1) cop... 为定量检测样品中柑桔衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)RB和VT基因型含量,以RB基因型的p33基因、VT基因型的ORF1a基因为靶标,建立了RB和VT基因型的特异性实时定量PCR方法。该方法检测RB和VT基因型质粒浓度下限均为2×10^(1) copies/μL,灵敏度为普通PCR的1000倍;对RB和VT基因型进行检测,质粒拷贝数对数(x)与Ct值(y)的标准曲线方程分别为y=-3.3255 x+37.8453和y=-3.2737 x+36.2839,R^(2)分别为0.9991和0.9954,扩增效率分别为99.85%和102.05%;方法的重复性良好,组内和组间Ct值变异系数均小于2.07%。对田间样品检测发现,不同样品之间RB基因型含量差异和VT基因型含量差异均较大。该方法特异性强,灵敏度高,适用于田间样品检测。 展开更多

关键词 柑桔衰退病毒 RB基因型 VT基因型 实时定量RT-PCR

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柑桔衰退病毒相关研究进展

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作者 周彦 《中国南方果树》 北大核心 2024年第2期1-8,共8页

柑桔衰退病毒引起的柑桔衰退病是一种广泛分布于世界各柑桔主产区的重要柑桔病毒病害,对柑桔产业的危害极大。随着我国柑桔产业的快速发展,近年来柑桔衰退病在我国多个柑桔产区暴发,造成了严重的经济损失。为了给深入开展柑桔衰退病毒... 柑桔衰退病毒引起的柑桔衰退病是一种广泛分布于世界各柑桔主产区的重要柑桔病毒病害,对柑桔产业的危害极大。随着我国柑桔产业的快速发展,近年来柑桔衰退病在我国多个柑桔产区暴发,造成了严重的经济损失。为了给深入开展柑桔衰退病毒研究和有效防控柑桔衰退病提供参考,根据已有研究文献报道,就柑桔衰退病毒的起源、类型、传播方式、蛋白功能、病毒与寄主的互作关系、茎陷点症状形成、蚜传机理,以及防治方法进行了综述。 展开更多

关键词 柑桔衰退病毒 病毒起源 蛋白功能 致病机理 蚜传机理

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本地早柑桔衰退病毒病的交叉保护研究 被引量：5

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作者 崔伯法 崔圣为 +2 位作者 王洪祥 翁法令 龚吉强 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期433-438,共6页

1995～1996年从黄岩不同桔区的'本地早'(Citrus succosa)桔树采样,经指示植物墨西哥莱檬(Citrus auranti folia)鉴定,得到18个柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)分离毒株.根据茎陷点数/cm2划分,其中有弱毒分离株7株,中毒... 1995～1996年从黄岩不同桔区的'本地早'(Citrus succosa)桔树采样,经指示植物墨西哥莱檬(Citrus auranti folia)鉴定,得到18个柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)分离毒株.根据茎陷点数/cm2划分,其中有弱毒分离株7株,中毒株5株和强毒株6株.网室试验的结果显示,在墨西哥莱檬上预先接种弱毒或中毒分离株后再以强毒株挑战接种的处理,其茎陷点数/cm2比仅接种强毒株的处理显著减少,其生长量也明显大于仅接种强毒株的植株,显示了明显的交叉保护作用.田间试验是以枳壳或以枸头橙为砧木的本地早,分别以不同毒性的CTV毒株接种后移植田间.在移植后第5～7年进行调查.结果证明,以弱毒或中毒分离株接种的植株,和以弱毒株预接种后再接种强毒株的植株,其3年的年均小果率均显著低于单接强毒株的植株,也显著低于未接种的田间植株.说明CTV弱毒株或中毒株的预接种对CTV的强毒株再侵染和田间毒株的自然侵染有明显的保护作用.同时,选择带弱毒株、中毒株和强毒株的田间定点病树各3株,连续3年调查产量及树体生长量.结果显示,感染弱毒株或中毒株的病树,产量高于重病树,小果率低于重病树,说明CTV的交叉保护现象在自然界存在. 展开更多

关键词 柑桔 本地早 柑桔衰退病毒 交叉保护

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柑桔衰退病毒弱毒株及其筛选方法 被引量：3

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作者 周彦 周常勇 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期73-76,共4页

不同研究方法揭示了柑桔衰退病毒存在着复杂的株系分化现象。本文用分子生物学技术与生物学鉴定相结 合的方法区别柑桔衰退病毒强弱毒株,利用其弱毒株交叉保护机理为筛选有保护作用的弱毒株提供了强有力的手 段。

关键词 植物病理学 柑桔衰退病毒 弱毒株 交叉保护 鉴定

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甜橙品种(系)对柑桔衰退病毒多态性的影响 被引量：3

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作者 陈洪明 周彦 李中安 《中国南方果树》 北大核心 2011年第2期1-4,共4页

柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)存在复杂的株系分化现象,运用弱毒株交叉保护防治柑桔衰退病时需了解不同类型柑桔对CTV构成的影响。通过CTV分离株CT14和CT36分别嫁接接种28个甜橙品种(系)的研究发现,具有单一p25/HinfⅠRFLP... 柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)存在复杂的株系分化现象,运用弱毒株交叉保护防治柑桔衰退病时需了解不同类型柑桔对CTV构成的影响。通过CTV分离株CT14和CT36分别嫁接接种28个甜橙品种(系)的研究发现,具有单一p25/HinfⅠRFLP组群构成的CT14在不同甜橙品种(系)上的组群构成和SSCP(单链构象多态性)图谱没有明显的变化;混有多个组群的CT36在不同的甜橙品种(系)上其组群构成和SSCP图谱差异明显,其中p25/HinfⅠRFLP第1组群的检出率最高。 展开更多

关键词 甜橙品系 柑桔衰退病毒 株系构成

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蚜虫体内柑桔衰退病毒分子生物学检测研究进展 被引量：1

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作者 李玲娣 田晓 刘金香 《中国南方果树》 北大核心 2012年第4期42-46,共5页

由柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的柑桔衰退病是具有经济重要性的病害,褐色桔蚜是CTV的最有效传播介体。应用分子生物学方法检测蚜虫体内CTV已被研究多年。本文重点阐述了定性检测和定量检测,介绍了反转录PCR(RT-PCR)、... 由柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的柑桔衰退病是具有经济重要性的病害,褐色桔蚜是CTV的最有效传播介体。应用分子生物学方法检测蚜虫体内CTV已被研究多年。本文重点阐述了定性检测和定量检测,介绍了反转录PCR(RT-PCR)、反转录巢式PCR(RT-nes-ted-PCR)以及实时RT-PCR(Real-time RT-PCR)的应用,并对这些技术应用于研究CTV蚜传机理和CTV-介体-寄主三者的互作关系方面做了简要展望。 展开更多

关键词 分子检测 柑桔衰退病毒 蚜虫

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柑桔衰退病毒基因组学研究进展

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作者 姜波 钟云 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第9期70-72,共3页

柑桔衰退病毒(CTV)是柑桔普遍存在的一种重要病毒病害,因其自身基因变异和寄主的不同而产生不同的症状,给防治CTV带来一定困难。为防治柑桔衰退病,需要研究CTV本身的相关特征。从CTV的基因组学上的特征综述了国内外在CTV基因组学最新的... 柑桔衰退病毒(CTV)是柑桔普遍存在的一种重要病毒病害,因其自身基因变异和寄主的不同而产生不同的症状,给防治CTV带来一定困难。为防治柑桔衰退病,需要研究CTV本身的相关特征。从CTV的基因组学上的特征综述了国内外在CTV基因组学最新的科研进展。 展开更多

关键词 柑桔衰退病毒 基因构成 变异 复制 调控

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柑桔衰退病毒分子生物学检测及基因型分析技术研究进展

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作者 陶珍珍 周常勇 《中国南方果树》 北大核心 2014年第4期19-21,共3页

由柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的柑桔衰退病是一种严重为害世界柑桔种植业的病害。随着我国柑桔产业的发展,柑桔衰退病为害日趋严重。为了解CTV分子生物学检测及基因型分析技术研究的进展,对相关文献报道进行了综述。

关键词 柑桔衰退病毒 分子生物学检测 基因型分析

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柑桔衰退病毒JY基因型在我国的发生分布及其分子特征

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作者 李双花 周俊 +2 位作者 游平 黄爱军 易龙 《中国南方果树》 北大核心 2023年第3期1-8,共8页

柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是对柑桔产业具有毁灭性危害的病原之一。柑桔衰退病毒JY基因型(Genbank登录号为ON094625)是最近在来自湖南江永的一份道县野桔材料上获得的。为了明确JY基因型在我国的发生状况及其分子特征,对... 柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是对柑桔产业具有毁灭性危害的病原之一。柑桔衰退病毒JY基因型(Genbank登录号为ON094625)是最近在来自湖南江永的一份道县野桔材料上获得的。为了明确JY基因型在我国的发生状况及其分子特征,对9个柑桔主产区(福建、浙江、广东、广西、湖北、重庆、四川、江西和湖南)的栽培柑桔以及4个地区[湖南的江永、宜章(莽山)和道县,江西的崇义]的野生柑桔进行JY基因型分子检测,并对分离物的ORF1b、p33、p25、p23基因进行分析。结果表明,仅在来自湖南江永自然生态中的道县野桔样品中检出JY基因型阳性样品(46个样品中检出12个JY基因型阳性样品),说明JY基因型在我国的发生分布并不广泛。ORF1b、p33、p25、p23基因序列多样性、遗传分化和分子变异分析表明,JY基因型12个分离物间核苷酸和氨基酸序列相似性(>96.8%)极高;JY基因型分离物与CTV其他基因型分离物存在明显的遗传分化,ORF1b、p33、p25、p23基因序列的平均核苷酸序列相似性分别为79.2%~92.7%、80.8%~85.9%、90.5%~93.6%、87.5%~91.8%,而平均氨基酸序列相似性分别为89.5%~98.1%、80.8%~84.4%、93.7%~97.3%、85.4%~91.6%;遗传分化系数(Fst)均明显高于0.25;JY基因型种群与其他基因型种群的差异非常大(分子变异大于43%,p值为0.001),且基因交流小(Nm=0.396)。ORF1b、p33、p25、p23基因单独及4个基因联合的系统发育分析,表明JY基因型12个分离物均与JY-2聚集在同一簇,且独立于现有CTV其他基因型之外,进一步证实JY基因型与CTV其他基因型分离物存在明显的遗传分化,可能为我国特有CTV基因型株系。 展开更多

关键词 柑桔衰退病毒 野生柑桔 基因型 遗传多样性 道县野桔

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柑桔衰退病高效简便检测试剂盒的研制及应用 被引量：1

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作者 宋震 唐科志 +2 位作者 周彦 刘科宏 周常勇 《中国南方果树》 北大核心 2006年第6期15-17,共3页

关键词 柑桔衰退病毒 检测试剂盒 应用 简便 逆转录聚合酶链式反应 VIRUS 太平洋地区 地中海地区

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柑桔衰退病及其防治 被引量：1

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作者 徐明 周常勇 刘金香 《中国南方果树》 北大核心 2008年第3期24-25,共2页

关键词 柑桔衰退病毒 柑桔生产 防治 VIRUS 太平洋地区 地中海地区 果树树种 社会发展

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