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甘蓝抗枯萎病基因FOC1植物表达载体构建及遗传转化
被引量：
1
1
作者
刘洁
马建
+3 位作者
雷蕾
孙超
康俊根
颉建明
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期429-436,共8页
为研究甘蓝枯萎病抗性基因FOC1的抗性功能,利用前期克隆的FOC1基因,以pBI121质粒为植物表达载体,采用同源重组法构建FOC1基因的过表达载体;将构建好的重组质粒采用冻融法转入根癌农杆菌LBA4404菌株中,并通过农杆菌介导的甘蓝外植体转化...
为研究甘蓝枯萎病抗性基因FOC1的抗性功能,利用前期克隆的FOC1基因,以pBI121质粒为植物表达载体,采用同源重组法构建FOC1基因的过表达载体;将构建好的重组质粒采用冻融法转入根癌农杆菌LBA4404菌株中,并通过农杆菌介导的甘蓝外植体转化法对感病甘蓝进行遗传转化,利用载体特异引物对获得的转基因植株进行PCR鉴定。结果表明,最终成功构建FOC1基因的过表达载体pBI121-35S-FOC1,并已成功整合到受体甘蓝基因组中。
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关键词
甘蓝
抗
枯萎病基因
pBI121质粒
载体构建
遗传转化
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职称材料
基于BSA-seq技术对西瓜抗枯萎病生理小种1的基因定位
被引量：
1
2
作者
李超汉
朱丽华
+4 位作者
尤佳琪
杨红娟
李青竹
宋荣浩
顾卫红
《上海农业学报》
2024年第2期11-19,共9页
西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)引起的土传真菌病害,是西瓜生产的限制因子。本研究以西瓜抗病种质“V13-9-3”和感病种质“W16-1”为亲本,构建了“W16-1”דV13-9-3”的F1、F2群体。苗期人...
西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)引起的土传真菌病害,是西瓜生产的限制因子。本研究以西瓜抗病种质“V13-9-3”和感病种质“W16-1”为亲本,构建了“W16-1”דV13-9-3”的F1、F2群体。苗期人工接种结果显示:F1植株表现抗病,F2群体的抗病∶感病分离比为3∶1,表明西瓜枯萎病生理小种1的抗性遗传受显性单基因控制。利用BSA技术,采用SNP指数和InDel指数法,将西瓜抗枯萎病基因Fon-1定位在1号染色体上2.20 Mb和2.32 Mb区域内,将这2种方法的定位结果取交集,最终将目标抗病基因区域缩小在2.20 Mb之内,该区域包含8个非同义突变基因和1个移码突变基因。利用荧光定量PCR检测这9个突变基因在接种枯萎病菌5 d和10 d后的表达量变化,发现抗病亲本“V13-9-3”中有7个基因的表达量显著高于感病亲本“W16-1”。研究通过结合SNP指数和InDel指数分析可以快速进行基因初定位,为西瓜抗枯萎病的分子机理研究提供理论依据。
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关键词
西瓜
枯萎病
抗
枯萎病基因
基因
定位
SNP指数
InDel指数
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职称材料
甘蓝基因组细菌人工染色体文库的构建
被引量：
1
3
作者
邢苗苗
田多成
+3 位作者
李海龙
姚丽君
冀瑞琴
康俊根
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2014年第5期23-28,共6页
细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片...
细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片段平均大小约97 kb,空载率<3%,覆盖甘蓝基因组约10.9倍,筛选到甘蓝任一基因的概率为99.99%,这些结果表明,构建的文库质量较好,可用于后续分析。构建的甘蓝BAC文库不仅可用于枯萎病基因的克隆,而且为克隆其他重要的功能基因及基因组学等的研究奠定了基础。
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关键词
甘蓝
细菌人工染色体文库
枯萎病基因
克隆
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职称材料
题名
甘蓝抗枯萎病基因FOC1植物表达载体构建及遗传转化
被引量：
1
1
作者
刘洁
马建
雷蕾
孙超
康俊根
颉建明
机构
甘肃农业大学园艺学院
北京市农林科学院蔬菜研究中心农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期429-436,共8页
基金
"十二五"国家科技支撑计划(2012BAD02B01
2014BAD01B08)
+1 种基金
国家自然科学基金(31372065)
北京市科委项目(Z141105002314020)~~
文摘
为研究甘蓝枯萎病抗性基因FOC1的抗性功能,利用前期克隆的FOC1基因,以pBI121质粒为植物表达载体,采用同源重组法构建FOC1基因的过表达载体;将构建好的重组质粒采用冻融法转入根癌农杆菌LBA4404菌株中,并通过农杆菌介导的甘蓝外植体转化法对感病甘蓝进行遗传转化,利用载体特异引物对获得的转基因植株进行PCR鉴定。结果表明,最终成功构建FOC1基因的过表达载体pBI121-35S-FOC1,并已成功整合到受体甘蓝基因组中。
关键词
甘蓝
抗
枯萎病基因
pBI121质粒
载体构建
遗传转化
Keywords
Brassica oleracea
Fusarium wilt resistance genes
pBI121 vector
Plant expression vector
Genetic transformation
分类号
S436.35 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
基于BSA-seq技术对西瓜抗枯萎病生理小种1的基因定位
被引量：
1
2
作者
李超汉
朱丽华
尤佳琪
杨红娟
李青竹
宋荣浩
顾卫红
机构
上海市农业科学院设施园艺研究所
上海市农业科学院林木果树研究所
上海市农业科学院生态环境保护研究所
出处
《上海农业学报》
2024年第2期11-19,共9页
基金
上海市2020年度“科技创新行动计划”农业科技领域项目(20392000100)
上海市科技兴农项目(2021-02-08-00-12-F00754)
上海市农业科学院“卓越团队”建设计划[沪农科卓(2022)020]。
文摘
西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)引起的土传真菌病害,是西瓜生产的限制因子。本研究以西瓜抗病种质“V13-9-3”和感病种质“W16-1”为亲本,构建了“W16-1”דV13-9-3”的F1、F2群体。苗期人工接种结果显示:F1植株表现抗病,F2群体的抗病∶感病分离比为3∶1,表明西瓜枯萎病生理小种1的抗性遗传受显性单基因控制。利用BSA技术,采用SNP指数和InDel指数法,将西瓜抗枯萎病基因Fon-1定位在1号染色体上2.20 Mb和2.32 Mb区域内,将这2种方法的定位结果取交集,最终将目标抗病基因区域缩小在2.20 Mb之内,该区域包含8个非同义突变基因和1个移码突变基因。利用荧光定量PCR检测这9个突变基因在接种枯萎病菌5 d和10 d后的表达量变化,发现抗病亲本“V13-9-3”中有7个基因的表达量显著高于感病亲本“W16-1”。研究通过结合SNP指数和InDel指数分析可以快速进行基因初定位,为西瓜抗枯萎病的分子机理研究提供理论依据。
关键词
西瓜
枯萎病
抗
枯萎病基因
基因
定位
SNP指数
InDel指数
Keywords
Watermelon
Fusarium oxysporum
Fusarium wilt-resistance gene
Gene mapping
SNP-index
InDel-index
分类号
S651 [农业科学—果树学]
S436.5 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
甘蓝基因组细菌人工染色体文库的构建
被引量：
1
3
作者
邢苗苗
田多成
李海龙
姚丽君
冀瑞琴
康俊根
机构
沈阳农业大学园艺学院
北京市农林科学院蔬菜研究中心
河北农业大学园艺学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2014年第5期23-28,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31171958)
"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD02B01
+3 种基金
2012BAD50G01)
国家高技术研究发展计划项目"863"项目(2012AA100103
2012AA100105
2012AA020103)
文摘
细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片段平均大小约97 kb,空载率<3%,覆盖甘蓝基因组约10.9倍,筛选到甘蓝任一基因的概率为99.99%,这些结果表明,构建的文库质量较好,可用于后续分析。构建的甘蓝BAC文库不仅可用于枯萎病基因的克隆,而且为克隆其他重要的功能基因及基因组学等的研究奠定了基础。
关键词
甘蓝
细菌人工染色体文库
枯萎病基因
克隆
Keywords
Brassica oleracea
Bacterial artificial chromosome library
Fusarium wilt resistant gene
Clone
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蓝抗枯萎病基因FOC1植物表达载体构建及遗传转化
刘洁
马建
雷蕾
孙超
康俊根
颉建明
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于BSA-seq技术对西瓜抗枯萎病生理小种1的基因定位
李超汉
朱丽华
尤佳琪
杨红娟
李青竹
宋荣浩
顾卫红
《上海农业学报》
2024
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
甘蓝基因组细菌人工染色体文库的构建
邢苗苗
田多成
李海龙
姚丽君
冀瑞琴
康俊根
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2014
1
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