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枯草芽孢杆菌发酵花生纳豆的研制及其挥发性风味物质分析
1
作者 汪琴 王宁伟 +5 位作者 李玟君 胡澳 郭兵兵 刘婧盈 关叶霞 李玮 《中国酿造》 北大核心 2025年第7期167-172,共6页
以花生为原料,采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵制备花生纳豆。以感官评分和纳豆激酶活性的综合评分为响应值,通过单因素试验及响应面试验对花生纳豆的发酵工艺进行优化,并采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)检测花... 以花生为原料,采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵制备花生纳豆。以感官评分和纳豆激酶活性的综合评分为响应值,通过单因素试验及响应面试验对花生纳豆的发酵工艺进行优化,并采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC-MS)检测花生纳豆的挥发性风味成分。结果表明,花生纳豆的最佳发酵工艺条件为枯草芽孢杆菌接种量12%,发酵时间34 h,发酵温度39℃,在此优化条件下,花生纳豆的感官评分为88.12分,纳豆激酶活性为1127.32 U/g,综合评分为90.70分。从花生纳豆中共检出38种挥发性风味物质,其中2,5-二甲基吡嗪(20.72%)、2,3,5-三甲基吡嗪(3.89%)、乙醇(18.19%)、D-柠檬烯(2.51%)、长叶烯(2.05%)、异戊醛(2.24%)的相对含量较高。相较于传统发酵纳豆,花生纳豆中未检测到含硫类化合物、乙酸及丙酸等酸臭味物质,具有较好的感官品质。 展开更多
关键词 花生纳豆 枯草芽孢杆菌 感官评价 纳豆激酶 挥发性风味物质
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枯草芽孢杆菌产纳豆激酶的复合诱变选育及发酵条件优化
2
作者 叶丽莎 高梦迪 +3 位作者 程婉冰 庞凤萍 邓立高 李坚斌 《应用化工》 CSCD 北大核心 2024年第11期2562-2568,共7页
使用紫外线和离子束对枯草芽孢杆菌进行了诱变,比较并筛选出稳定的高产纳豆激酶菌株,并对突变优势菌株的发酵条件进行了优化,以进一步提高酶活。研究结果显示,最终获得了具有高酶活和较强稳定性的菌株B subtilis IB-2。离子束诱变菌株B ... 使用紫外线和离子束对枯草芽孢杆菌进行了诱变,比较并筛选出稳定的高产纳豆激酶菌株,并对突变优势菌株的发酵条件进行了优化,以进一步提高酶活。研究结果显示,最终获得了具有高酶活和较强稳定性的菌株B subtilis IB-2。离子束诱变菌株B subtilis IB-2酶活达到320 FU/mL,比初始菌株提高了19.4%。其最佳发酵工艺条件为:发酵时间33.5 h、接种量7.5%、种龄9 h、温度37℃、转速200 r/min,纳豆激酶酶活达到355.07 FU/mL,与预测值基本一致,纳豆激酶活力较优化前提高了10.2%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 紫外诱变 离子束诱变 响应面优化
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枯草芽孢杆菌LJ的分离鉴定及其对凡纳滨对虾幼体弧菌病防治效果 被引量：2
3
作者 刘岭萍 谭玉冰 +6 位作者 薛明 王优阳 陈丽莹 梁喜 华郡 梁华芳 温崇庆 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期34-41,共8页
【目的】从对虾肠道分离鉴定拮抗病原弧菌的益生菌,对其生物安全性及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼体弧菌病的控制效果进行评价,以促进益生菌对对虾弧菌病的防治效果。【方法】利用平板划线法从虾肠分离细菌,根据拮抗病原弧菌... 【目的】从对虾肠道分离鉴定拮抗病原弧菌的益生菌,对其生物安全性及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼体弧菌病的控制效果进行评价,以促进益生菌对对虾弧菌病的防治效果。【方法】利用平板划线法从虾肠分离细菌,根据拮抗病原弧菌活性筛选潜在益生菌株,结合表型特征、16S rRNA和rpoB基因序列对目标菌株进行鉴定,利用纸片扩散法测试其对17种抗菌药物敏感性。通过水体添加目标菌评价其对凡纳滨对虾幼体感染副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的生物防治效果。【结果】从对虾肠道分离筛选得到一株对副溶血弧菌、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和坎氏弧菌(Vibrio campbellii)均有明显拮抗作用的菌株LJ;LJ不溶血且无多重耐药性,被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。水体添加1×10^(5)和1×10^(6)cfu/mL LJ均可显著提高感染副溶血弧菌的对虾幼体存活率和变态率(P<0.05),且高剂量处理组效果更明显;未添加病原菌条件下,高浓度(5×10^(7)cfu/mL)LJ对幼体无害,并能显著促进幼体存活和变态。【结论】对虾肠源枯草芽孢杆菌LJ生物安全性高,可有效拮抗病原弧菌和提高感染副溶血弧菌凡纳滨对虾幼体的存活率。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌LJ 益生菌 弧菌 拮抗 生物防控 凡纳滨对虾 药敏
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纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达 被引量：14
4
作者 黄磊 谢玉娟 +3 位作者 李申 李丹 梁凤来 刘如林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期199-202,共4页
以纳豆芽孢杆菌HL-1全基因组DNA为模板,PCR分别扩增编码信号肽、前导肽及成熟肽的前纳豆激酶原基因序列(pre-pro-NK),编码前导肽、成熟肽的纳豆激酶原基因序列(pro-NK)和只编码成熟肽的纳豆激酶基因序列(NK),构建了大肠杆菌表达质粒pET2... 以纳豆芽孢杆菌HL-1全基因组DNA为模板,PCR分别扩增编码信号肽、前导肽及成熟肽的前纳豆激酶原基因序列(pre-pro-NK),编码前导肽、成熟肽的纳豆激酶原基因序列(pro-NK)和只编码成熟肽的纳豆激酶基因序列(NK),构建了大肠杆菌表达质粒pET28a-NK表达前纳豆激酶原基因及大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pHT315-NK表达纳豆激酶原基因和纳豆激酶基因,实现了纳豆激酶基因在大肠杆菌及枯草芽孢杆菌中的表达,并进行了活性分析。 展开更多
关键词 纳豆激酶基因 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 表达
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纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛断奶前后瘤胃发酵和酶活的影响 被引量：27
5
作者 张海涛 王加启 +6 位作者 卜登攀 栾绍宇 王蕾 周荣 邓露芳 周凌云 魏宏阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期5-11,共7页
本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌在犊牛瘤胃中可能的作用机理。选取24头7日龄左右中国荷斯坦奶牛公犊牛,分为试验1、2组及对照组。试验1、2组犊牛直接饲喂N1型和Na型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液,当各组犊牛开食料采食量达到... 本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌在犊牛瘤胃中可能的作用机理。选取24头7日龄左右中国荷斯坦奶牛公犊牛,分为试验1、2组及对照组。试验1、2组犊牛直接饲喂N1型和Na型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液,当各组犊牛开食料采食量达到规定要求时断奶。断奶时每组随机选取4头犊牛屠宰,剩余12头犊牛继续饲喂,8周后屠宰。结果表明:①在断奶时及断奶后8周,试验1组犊牛瘤胃pH显著低于对照组和试验2组(P<0.05);②断奶时及断奶后8周两处理组犊牛瘤胃总挥发性脂肪酸显著低于对照组(P<0.05);断奶早期3组犊牛瘤胃食糜中乙酸的摩尔百分比差异不显著,而断奶后8周试验1组犊牛瘤胃中乙酸的摩尔百分比较对照组低(P<0.05);与对照组相比,断奶时试验组犊牛瘤胃中丙酸的摩尔百分比显著降低(P<0.05),而断奶后8周各组间无显著差异;③断奶早期试验2组犊牛瘤胃中氨氮浓度显著低于对照组(P<0.05),试验1组氨氮浓度较对照组略低,但无显著差异;断奶后8周两处理组犊牛瘤胃中氨氮浓度显著低于对照组(P<0.05);④整个试验期对照组犊牛瘤胃中性蛋白酶活性显著高于两试验组(P<0.05),而外切葡聚糖酶活性显著低于两试验组(P<0.05),各组犊牛瘤胃中β-葡萄糖苷酶和内切葡聚糖酶活性无显著差异。本试验说明在犊牛生长的不同时期,不同类型纳豆枯草芽孢杆菌的饲喂效果不尽相同。日粮中添加纳豆枯草芽孢杆菌有利于瘤胃的发育,从而促进犊牛生长。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 犊牛 挥发性脂肪酸 瘤胃发酵 酶活
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日粮中添加纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛消化道发育的影响 被引量：25
6
作者 张海涛 王加启 +6 位作者 卜登攀 栾绍宇 邓露芳 周凌云 周振峰 魏宏阳 孙鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期5-9,共5页
本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛断奶早期和断奶后8周消化道生长发育的影响。选取24头7日龄中国荷斯坦奶牛公犊,随机分为3个处理,每个处理8头犊牛,试验1、2组犊牛分别饲喂Na型和N1型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液。饲喂... 本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛断奶早期和断奶后8周消化道生长发育的影响。选取24头7日龄中国荷斯坦奶牛公犊,随机分为3个处理,每个处理8头犊牛,试验1、2组犊牛分别饲喂Na型和N1型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液。饲喂的牛奶中添加纳豆枯草芽孢杆菌菌液,连续饲喂直到开食料采食量达到规定要求时断奶;断奶时各组随机选取4头犊牛屠宰,余下4头犊牛继续饲养,8周后屠宰,称胴体重。结果表明,试验1组犊牛断奶早期瘤网胃重量明显高于对照组(P<0.05);试验2组犊牛断奶早期及断奶后8周瘤胃pH显著低于对照组(P<0.05),且与对照组相比,断奶早期皱胃pH显著下降(P<0.05);试验1组犊牛断奶早期及断奶后8周十二指肠长度较对照组相比明显缩短;断奶后8周两处理组犊牛回肠长度显著小于对照组(P<0.05);此外,饲喂纳豆枯草芽孢杆菌还可显著降低犊牛十二指肠和空肠前段食糜的pH(P<0.05)。本试验结果表明,饲喂纳豆枯草芽孢杆菌有利于营养物质消化,促进犊牛生长。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 犊牛 消化道发育
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高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌优选及发酵工艺条件优化 被引量：9
7
作者 张杰 葛武鹏 +2 位作者 张静 陈瑛 吴晓勇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期202-205,209,共5页
以黄豆为主料,添加不同辅料,采用不同处理方式,以产酶活力为指标研究三株枯草芽孢杆菌发酵性能,筛选优势菌株进行固态发酵,确定最优工艺条件。结果表明:在三株受试菌种中BS21076发酵性能最优,活菌数及纳豆激酶活力均较高;最优固态发酵... 以黄豆为主料,添加不同辅料,采用不同处理方式,以产酶活力为指标研究三株枯草芽孢杆菌发酵性能,筛选优势菌株进行固态发酵,确定最优工艺条件。结果表明:在三株受试菌种中BS21076发酵性能最优,活菌数及纳豆激酶活力均较高;最优固态发酵条件为:大豆90℃下烘炒5min,破碎度为四瓣,魔芋精粉添加量3%,接种量为8%,37℃下发酵24h;在此条件下,酶活力可达(3582.48±83.13)U/g,较传统发酵NK活力极显著(p<0.01)提高。 展开更多
关键词 纳豆激酶 枯草芽孢杆菌 工艺优化
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枯草芽孢杆菌纳豆激酶分离纯化及酶学性质 被引量：6
8
作者 王刚 郭明珠 陈光 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第15期231-234,共4页
利用30%～70%饱和度的硫酸铵沉淀,Sephadex G-50凝胶过滤层析对浅盘发酵纳豆激酶进行分离纯化并对其酶学性质进行初步研究。以纤维平板法测定纳豆激酶活力,SDS-PAGE检验纯化效果。结果表明:纯化后纳豆激酶为电泳纯,分子质量约27.518kD,... 利用30%～70%饱和度的硫酸铵沉淀,Sephadex G-50凝胶过滤层析对浅盘发酵纳豆激酶进行分离纯化并对其酶学性质进行初步研究。以纤维平板法测定纳豆激酶活力,SDS-PAGE检验纯化效果。结果表明:纯化后纳豆激酶为电泳纯,分子质量约27.518kD,纯化倍数和酶活回收率分别为19和42.1%,纳豆激酶最适温度为50℃,最适宜pH值为8.0。 展开更多
关键词 纳豆激酶 枯草芽孢杆菌 纯化 酶学特性
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纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌对绵羊生长性能、消化性能和血清生化指标的影响 被引量：7
9
作者 张俊瑜 丛少波 +2 位作者 臧长江 张志军 王文奇 《中国饲料》 北大核心 2019年第19期34-38,共5页
为研究纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto,BN)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)对绵羊生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响,试验将体重相近的30只羊分为基础饲粮组(CK组)、基础饲粮+BN组(A组)、基础饲粮+BN+BS组(B组),每... 为研究纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto,BN)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)对绵羊生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响,试验将体重相近的30只羊分为基础饲粮组(CK组)、基础饲粮+BN组(A组)、基础饲粮+BN+BS组(B组),每组10只。结果表明:(1)与CK组相比,A组平均日增重(ADG)提高32.29g(P<0.05),B组提高68.00g(P<0.01),A组和B组之间差异不显著(P>0.05)。(2)B组粗蛋白质的表观消化率比CK组显著提高16.31%(P<0.01),A组与CK组之间差异不显著(P>0.05)。(3)与CK组相比,A组血清尿素氮降低23.44%(P>0.05)、B组显著下降44.69%(P<0.01)。综上,在本试验条件下,饲粮中添加BN可显著提高绵羊的ADG,但复合添加BS的效果更好。同时,饲粮中复合添加BN和BS可显著提高绵羊对粗蛋白质的表观消化率、降低血清尿素氮含量。 展开更多
关键词 纳豆芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 绵羊 生长性能 血清生化指标
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犊牛饲用纳豆枯草芽孢杆菌液体培养条件的优化 被引量：6
10
作者 邓露芳 王加启 +4 位作者 姜艳美 卜登攀 魏宏阳 周凌云 王金枝 《饲料工业》 2008年第6期37-40,共4页
纳豆枯草芽孢杆菌作为犊牛直接饲用微生物对增强犊牛机体免疫和促进胃肠发育有益,然而以豆类物质为发酵底物的微生物制剂不适用于犊牛。本研究采用纳豆枯草芽孢杆菌液体培养方法,对培养条件的氮源、碳源、接菌量、装液量、转速和温度进... 纳豆枯草芽孢杆菌作为犊牛直接饲用微生物对增强犊牛机体免疫和促进胃肠发育有益,然而以豆类物质为发酵底物的微生物制剂不适用于犊牛。本研究采用纳豆枯草芽孢杆菌液体培养方法,对培养条件的氮源、碳源、接菌量、装液量、转速和温度进行正交试验,结果表明,在葡萄糖1%、蔗糖1%、大豆蛋白胨6%、胰蛋白胨4%、接种量2%、装液量5ml/dl、180r/min、37℃的培养条件下,发酵24h时,660nm吸光度值达到1.1475。而后进行不同装液量试验,结果表明1000ml容器装液量为400ml时,菌体细胞数量达到最高(4.6×1010个/ml)。 展开更多
关键词 犊牛饲用微生物 纳豆枯草芽孢杆菌 液体培养
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四株纳豆枯草芽孢杆菌的分离筛选与鉴定及其对瘤胃发酵的影响 被引量：1
11
作者 李吉楠 孙鹏 +3 位作者 赵圣国 李发弟 王加启 卜登攀 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期5-13,共9页
采用酪蛋白平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板初筛法、菌落形态和16SrRNA序列比对分别从无菌大豆(DD)、接种稻草的大豆(DC)、市售纳豆(ND)以及实验室储存菌株纳豆枯草芽孢杆菌NY-3(NY)中分离、筛选、鉴定出4株产蛋白酶和纤维素酶活性较... 采用酪蛋白平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板初筛法、菌落形态和16SrRNA序列比对分别从无菌大豆(DD)、接种稻草的大豆(DC)、市售纳豆(ND)以及实验室储存菌株纳豆枯草芽孢杆菌NY-3(NY)中分离、筛选、鉴定出4株产蛋白酶和纤维素酶活性较高的纳豆枯草芽孢杆菌;通过体外批次发酵试验,向日粮底物中添加1.5×1011cfu筛选出的四株菌,取0h和24h的瘤胃液样测定各个发酵参数.结果表明:与对照组相比,添加纳豆枯草芽孢杆菌(DC组、DD组、ND组、NY组)并不影响瘤胃液pH值(P=0.883),但显著提高瘤胃液中NH3-N值(P<0.05)和挥发性脂肪酸(VFA)各成分的浓度(P<0.05);与对照组相比,DC组的乙酸/丙酸差异不显著(P>0.05),但是DD、ND组和NY组均有显著降低(P<0.05). 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 体外发酵 挥发酸 瘤胃
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纳豆枯草芽孢杆菌对老陈醋中阿魏酸的影响 被引量：2
12
作者 董红兵 蔡凯 +4 位作者 黄程 龚元元 汪超 祁勇刚 张亮子 《中国调味品》 CAS 北大核心 2022年第1期72-76,共5页
以纳豆枯草芽孢杆菌为研究对象,用于以玉米为原料的老陈醋发酵。结果表明,糖化酒精发酵第3天接种5.0%的纳豆枯草芽孢杆菌种子液,醋酸发酵结束时的醋汁中阿魏酸含量高达59.36 mg/L。纳豆枯草芽孢杆菌分别接种于玉米、麸皮和谷糠浆液,阿... 以纳豆枯草芽孢杆菌为研究对象,用于以玉米为原料的老陈醋发酵。结果表明,糖化酒精发酵第3天接种5.0%的纳豆枯草芽孢杆菌种子液,醋酸发酵结束时的醋汁中阿魏酸含量高达59.36 mg/L。纳豆枯草芽孢杆菌分别接种于玉米、麸皮和谷糠浆液,阿魏酸含量随着发酵时间的延长均先显著增大而后缓慢减小,均在24 h时达到最大值,分别为3.729,1.018,0.661 g/L,而谷糠不粉碎时,阿魏酸缓慢增加,至36 h时其含量为0.087 g/L,仅为粉碎谷糠发酵24 h时的13.16%。采用老陈醋传统酿造工艺,接种纳豆枯草芽孢杆菌酿造的老陈醋,阿魏酸含量为32.45 mg/L,是不接种老陈醋的3.7倍、高粱特级老陈醋的近10倍。添加纳豆枯草芽孢杆菌种子液,提高了老陈醋阿魏酸含量,为工业化生产提供了理论基础。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 老陈醋 阿魏酸 糖化 醋酸发酵
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以豆粕粉为氮源的枯草芽孢杆菌液态发酵生产纳豆激酶 被引量：6
13
作者 董艳山 高丽 +3 位作者 何加亨 胡彪群 范青云 王业富 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期109-114,共6页
枯草芽孢杆菌液态发酵通常采用蛋白胨作为氮源生产纳豆激酶,导致生产成本过高,发酵液中酶活性较低。采用价格低廉的豆粕粉作为氮源不仅大幅度降低了原料成本,而且显著提高了发酵液中的酶活性。在摇瓶实验中优化确定豆粕粉最佳添加量,并... 枯草芽孢杆菌液态发酵通常采用蛋白胨作为氮源生产纳豆激酶,导致生产成本过高,发酵液中酶活性较低。采用价格低廉的豆粕粉作为氮源不仅大幅度降低了原料成本,而且显著提高了发酵液中的酶活性。在摇瓶实验中优化确定豆粕粉最佳添加量,并在此基础上优化确定了最佳接种量、发酵液初始p H、发酵时间。最终摇瓶发酵液中酶活达到5 471 IU/m L,是等量胰蛋白胨作为氮源发酵的3.6倍。上述摇瓶发酵参数进一步在7 L发酵罐和200 L中试水平发酵罐进行验证,并优化确定发酵过程中控制溶氧水平为30%,纳豆激酶活性分别达到6 717 IU/m L和4 236 IU/m L。 展开更多
关键词 豆粕粉 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 发酵
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植物内生枯草芽孢杆菌纳豆激酶同源基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1
14
作者 姜嵛 梁晨 姜国勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期97-99,共3页
利用基因组学和生物信息学的方法,从一种植物内生枯草芽孢杆菌菌株Bs0922的基因组DNA中克隆了纳豆激酶的同源基因NK-Bs0922,长度为1 149 bp。通过重组和转化在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了一个大小为48.0 kD的重组蛋白。
关键词 内生菌 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 同源基因
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低嘌呤、高纳豆激酶活性枯草芽孢杆菌SH21筛选及发酵条件优化 被引量：8
15
作者 庞远祥 谢远红 +2 位作者 金君华 刘慧 张红星 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期194-199,共6页
采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的方法,从自然发酵大酱中筛选获得1株高产纳豆激酶(nattokinase,NK)的菌株SH21,经16S rRNA基因序列鉴定其为枯草芽孢杆菌。以NK酶活力及嘌呤含量为指标,通过单因素试验和响应面法优化枯草芽孢杆菌SH21液体... 采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的方法,从自然发酵大酱中筛选获得1株高产纳豆激酶(nattokinase,NK)的菌株SH21,经16S rRNA基因序列鉴定其为枯草芽孢杆菌。以NK酶活力及嘌呤含量为指标,通过单因素试验和响应面法优化枯草芽孢杆菌SH21液体发酵条件。在单因素试验的基础上,得出碳源、氮源、pH、接种量、发酵温度、发酵时间对菌株发酵液中NK酶活力和嘌呤含量的影响。采用Plackett-Burman设计筛选得到pH、接种量和发酵温度3个显著因素,结合Box-Behnken设计中心组合试验并进行响应面分析。优化后的发酵条件为pH 6.0,接种量3%,发酵温度38℃,在此条件下,NK酶活力由166.99 U/mL提升到204.52 U/mL,提高了1.22倍,嘌呤含量由75.4 mg/L降低到51.27 mg/L,降低了32%。该研究为进一步开发高NK酶活性、低嘌呤产量的枯草芽孢杆菌发酵产品奠定了研究基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 嘌呤 发酵优化 响应面法
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枯草芽孢杆菌MX-6产纳豆激酶特性分析 被引量：4
16
作者 满丽莉 向殿军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期42-47,共6页
分离鉴定溶栓酶高产菌株,对其所产溶栓酶的类型、相对分子质量及发酵曲线进行特性分析。从中国豆豉中分离一株纤溶酶高产菌株MX-6,经个体形态、菌落形态及16S r DNA基因同源性比对,确定该菌株为枯草芽孢杆菌。应用聚合酶链式反应(polyme... 分离鉴定溶栓酶高产菌株,对其所产溶栓酶的类型、相对分子质量及发酵曲线进行特性分析。从中国豆豉中分离一株纤溶酶高产菌株MX-6,经个体形态、菌落形态及16S r DNA基因同源性比对,确定该菌株为枯草芽孢杆菌。应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)克隆到1 473 bp的纤溶酶编码基因apr N,根据推测氨基酸序列与同源序列的多序列比对及系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-polyacrylamide gels electrophoresis,SDS-PAGE)确定枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的相对分子质量约28 ku,与预测的相对分子质量27 712. 72 u相吻合。枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的发酵曲线结果显示在72 h达到纳豆激酶最大合成量,在纤维蛋白平板上的溶圈直径高达21. 60 mm。为更好地实现纳豆激酶的开发及应用提供一定的理论依据和方法参考。 展开更多
关键词 纳豆激酶 筛选鉴定 枯草芽孢杆菌 特性分析
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来源于豆豉的枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的稳定性研究 被引量：4
17
作者 满丽莉 向殿军 《中国调味品》 CAS 北大核心 2019年第7期25-28,33,共5页
以中国豆豉中筛选到的1株纤溶酶高产菌株——枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,应用聚合酶链式反应(PCR)成功扩增到1473bp的纤溶酶编码基因aprN,系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。研究了纳豆激酶对热、pH、金属离子、化学物质、抑制剂... 以中国豆豉中筛选到的1株纤溶酶高产菌株——枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,应用聚合酶链式反应(PCR)成功扩增到1473bp的纤溶酶编码基因aprN,系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。研究了纳豆激酶对热、pH、金属离子、化学物质、抑制剂和变性剂的稳定性及传代稳定性。结果表明:纳豆激酶在-20,4,30~50℃的热稳定性较好,pH在3~11之间酶活性相对稳定,Mg2+、Ca2+对纳豆激酶具有显著的激活作用,K+、Fe2+对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而Mn2+、Zn2+、Cu2+、Al3+、Ba2+有显著的抑制作用,Hg2+导致纳豆激酶完全失活,牛血清蛋白、明胶、蛋白胨能够显著提高纳豆激酶的稳定性,丙二醇、海藻酸钠对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而乙醇显著降低纳豆激酶的稳定性。PMSF导致纳豆激酶的活性完全丧失,EDAT和DTT对纳豆激酶的活性基本无影响,10mmol/L的SDS显著降低纳豆激酶的稳定性,说明此纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶,不是金属酶,不含二硫键,且具有良好的传代稳定性。结果显示该酶的稳定性较好,具有开发为溶栓药物的应用价值,有利于纳豆激酶的工业化应用。 展开更多
关键词 纳豆激酶 aprN基因 克隆 枯草芽孢杆菌 稳定性
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纳豆枯草芽孢杆菌对断奶前犊牛生长性能和免疫功能的影响 被引量：2
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作者 Sun 孙鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期243-243,共1页
本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌对断奶前犊牛生长性能和免疫功能的影响。试验选用12头(7±1)日龄中国荷斯坦公犊牛,随机分为2个处理,每个处理6头牛。将纳豆枯草芽孢杆菌与牛奶混合饲喂给犊牛。犊牛采食量达到体重的2%时断奶,断奶... 本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌对断奶前犊牛生长性能和免疫功能的影响。试验选用12头(7±1)日龄中国荷斯坦公犊牛,随机分为2个处理,每个处理6头牛。将纳豆枯草芽孢杆菌与牛奶混合饲喂给犊牛。犊牛采食量达到体重的2%时断奶,断奶时采集犊牛血液样品,测定血清中IgAI、gEI、gG、IgM及细胞因子含量。结果表明,饲喂纳豆枯草芽孢杆菌提高了犊牛日增重和饲料转化率,提前了犊牛断奶日龄,从而提高了犊牛生长性能。与对照组相比,饲喂纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛血清中IgE、IgA和IgM水平无影响,但可显著提高IgG含量。饲喂纳豆枯草芽孢杆菌可显著提高犊牛血清中γ-干扰素浓度,对白细胞介素-4含量有提高趋势,而对白细胞介素-6和白细胞介素-10无影响。本试验表明犊牛饲喂纳豆枯草芽孢杆菌未激发犊牛体内IgE介导的过敏反应,但却提高了血清中IgG和γ-干扰素水平,说明纳豆枯草芽孢杆菌作为益生菌有益于提高犊牛免疫功能。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 生长性能 免疫功能 犊牛
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纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶发酵条件优化 被引量：42
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作者 梅乐和 胡升 +2 位作者 许静 姚善泾 郑晓冬 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1355-1360,共6页
纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生的一种具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。针对目前常用菌株的产酶活力较低、不能完全满足要求的问题,采用酪蛋白平板初筛—摇瓶复筛的筛选策略,从纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的菌株,该菌株在筛选培养基... 纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生的一种具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。针对目前常用菌株的产酶活力较低、不能完全满足要求的问题,采用酪蛋白平板初筛—摇瓶复筛的筛选策略,从纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的菌株,该菌株在筛选培养基上进行摇瓶培养,发酵液中纳豆激酶的酶活达到970IU/mL.用Plackett Burman方法对影响液体发酵的各因素的效应进行了评价,并筛选出了有显著效应的四个主要因素:胰蛋白胨浓度、种龄、发酵温度和Na2HPO4浓度;在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大产酶条件区域;最后通过中心组合实验及响应面分析优化了纳豆枯草杆菌液体发酵的条件.通过在初始发酵条件和优化发酵条件下的对比研究,液体发酵液中纳豆激酶浓度从1005IU/mL提高到1314IU/mL,表明响应面法优化可成功地用于纳豆枯草杆菌液体发酵的条件优化. 展开更多
关键词 纳豆激酶 纳豆枯草杆菌 Plackett Burman设计 响应面法
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纳豆中纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶的分离过程研究 被引量：20
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作者 黄俊 梅乐和 +4 位作者 胡升 盛清 许静 吴晖 姚善泾 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期518-522,共5页
采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株,与国内公开报道的不同菌株相比,有更好的产酶能力。菌株经过液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵盐析及SephadexG-75凝胶层析... 采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株,与国内公开报道的不同菌株相比,有更好的产酶能力。菌株经过液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵盐析及SephadexG-75凝胶层析、SepharoseCMFastFlow离子交换层析对纳豆激酶进行了分离纯化,两步层析的纯化倍数和酶活回收率分别达到4.75、74.3%和1.32、77%,获得了纯度很高的纳豆激酶。 展开更多
关键词 纳豆 纳豆激酶 纳豆枯草杆菌 分离纯化
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