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枯草芽孢杆菌纤溶酶基因在转基因烟草组织中的分泌表达 被引量:5
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作者 王瑞刚 徐萍 +4 位作者 李高 张子义 王彦 吴自荣 王水平 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1383-1388,共6页
克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其前导肽序列。通过农杆菌EHA105介导转化,获得转基因烟草植株。其BSFE的表达水平为叶片42.97±28.59U·g-1FW、茎15.14±10.57U·g-1FW和根25.... 克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其前导肽序列。通过农杆菌EHA105介导转化,获得转基因烟草植株。其BSFE的表达水平为叶片42.97±28.59U·g-1FW、茎15.14±10.57U·g-1FW和根25.55±14.71U·g-1FW。其内源BSFE信号肽可在转基因烟草中行使蛋白转运功能,使BSFE具有分泌表达特性。这一系统可用于建立利用植物组织分泌表达外源蛋白的系统模型。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌纤溶酶 转基因 烟草 分泌表达
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枯草芽孢杆菌纤溶酶植物根系分泌表达生物反应器模型的建立 被引量:2
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作者 王福慧 郭荣启 +3 位作者 伊莉佳 郭琳 聂利珍 王瑞刚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第13期5302-5304,共3页
[目的]枯草芽孢杆菌纤溶酶是一种碱性丝氨酸蛋白水解酶,具有强烈的纤溶活性,临床上可用于预防和治疗血栓栓塞性疾病,可用于开发新型溶栓药物。[方法]该研究采用PCR法克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶基因及其前导肽序列,通过农杆菌介导转化野生... [目的]枯草芽孢杆菌纤溶酶是一种碱性丝氨酸蛋白水解酶,具有强烈的纤溶活性,临床上可用于预防和治疗血栓栓塞性疾病,可用于开发新型溶栓药物。[方法]该研究采用PCR法克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶基因及其前导肽序列,通过农杆菌介导转化野生型拟南芥,并利用纤维蛋白平板法检测BSFE纤溶活性。[结果]通过农杆菌介导转化获得转BSFE基因拟南芥,PCR检测证实BSFE基因已在转基因拟南芥基因组内整合,纤溶活性检测进一步证实BSFE可在转基因拟南芥体内表达,并可通过组织及根系分泌型表达,建立植物组织及根系分泌表达外源蛋白的系统模型。[结论]该研究为进一步阐明外源蛋白分泌表达机理及建立植物根系分泌生物反应器提供依据。 展开更多
关键词 根系 分泌 生物反应器 枯草芽孢杆菌纤溶酶
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生长因子对枯草芽孢杆菌纤溶酶在转基因烟草根系中分泌表达的调节 被引量:1
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作者 王瑞刚 张子义 +2 位作者 刘国军 吴自荣 王水平 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期707-713,共7页
根系可分泌表达枯草芽孢杆菌纤溶酶B a c illu s s u b tilis f i b r i n o l y t i c e n z y m e,B S F E的转基因烟草在0、8、16和24h的光照条件下,在25℃、30℃和昼30℃鲆?25℃、16h?8h光暗培养条件下和通气与不通气的水培处理下,... 根系可分泌表达枯草芽孢杆菌纤溶酶B a c illu s s u b tilis f i b r i n o l y t i c e n z y m e,B S F E的转基因烟草在0、8、16和24h的光照条件下,在25℃、30℃和昼30℃鲆?25℃、16h?8h光暗培养条件下和通气与不通气的水培处理下,其水培液B S F E活性呈抛物线型变化趋势.延长光照时间可加快其根系向水培液中分泌B S F E,峰值出现提前,但培养后期水培液B S F E活性急剧降低.四个时间处理相比,8、16h光照处理能维持该转基因烟草根系B S F E分泌的较高水平.建议生产中使用16h以上光照培养,适当缩短培养液更新周期,以8~10d为宜.昼30℃鲆?25℃培养条件下水培液B S F E活性在峰值出现前介于30℃和25℃培养条件之间,而峰值出现后则高于30℃和25℃培养条件,说明温度对器官生长、代谢的影响是造成3种温度处理下水培液B S F E活性差异的主要原因.通气处理可提高该转基因烟草根系B S F E的分泌水平.但在1~15d的培养期内,通气处理与不通气处理间不存在显著差异.这说明通气处理对短时间培养并不必要. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌纤溶酶 转基因烟草 最适温度 通气 根系分泌
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枯草芽孢杆菌纤溶酶的生物分析方法及其在猕猴体内的药动学研究
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作者 蔡永明 陈拯民 +1 位作者 孙超渊 刘昌孝 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第1期27-31,共5页
目的:研究猕猴单次静脉滴注注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)的药动学。方法:6只猕猴静脉滴注BSFE2.5mg/kg,采用ELISA法测定动物的血药浓度,实验数据用DAS2.0药动程序拟合并计算药动参数。结果:6只猕猴静脉滴注2.5mg/kg的BSFE,浓度-时间... 目的:研究猕猴单次静脉滴注注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)的药动学。方法:6只猕猴静脉滴注BSFE2.5mg/kg,采用ELISA法测定动物的血药浓度,实验数据用DAS2.0药动程序拟合并计算药动参数。结果:6只猕猴静脉滴注2.5mg/kg的BSFE,浓度-时间数据经药代动力学参数计算,表明药物消除符合二房室模型。6只猕猴的达峰时间(tmax)均为0.5h,峰浓度(Cmax)均值为(592.3±150.9)μg/L;平均消除t1/2β为(5.78±1.19)h;平均清除率(CL)为(4.42±1.19)L.h-1.kg-1;药时AUC0-24.5h均值为(557.1±211.1)μg.L-1.h。结论:本试验所建立的双抗体夹心ELISA法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适于BFSE的药代动力学研究。 展开更多
关键词 注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶 ELISA 药动学 猕猴
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