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腐殖酸钠和枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾生长性能、抗氧化能力和免疫酶活的影响 被引量：1
1
作者 张千 郭薇 +3 位作者 莫爱杰 杨慧君 顾泽茂 袁勇超 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第3期112-119,共8页
为选出适宜的饲料添加剂增强克氏原螯虾的抗逆性,提高养殖经济效益,试验选取(13.59±0.25)g克氏原螯虾360尾,随机分为4个处理组,分别投喂基础饲粮(对照)、添加0.5%枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)、添加0.5%腐殖酸钠(sodium hum... 为选出适宜的饲料添加剂增强克氏原螯虾的抗逆性,提高养殖经济效益,试验选取(13.59±0.25)g克氏原螯虾360尾,随机分为4个处理组,分别投喂基础饲粮(对照)、添加0.5%枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)、添加0.5%腐殖酸钠(sodium humate,HNa)和联合添加0.5%腐殖酸钠+0.5%枯草芽孢杆菌(BS+HNa)的饲料,探究腐殖酸钠和枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾生长、抗氧化能力和免疫酶活的影响。结果显示:生长性能方面,BS、HNa和BS+HNa组的饲料系数均显著低于对照组,蛋白质效率显著高于对照组;BS+HNa组的饲料系数显著高于BS和HNa组,增重率、特定增长率和蛋白质效率显著高于对照组。抗氧化性能方面,BS+HNa组血淋巴和肝胰腺组织的过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)水平显著高于其他各组,丙二醛(MDA)含量显著低于其他各组,超氧化物歧化酶(SOD)水平显著高于对照组,并且腐殖酸钠和枯草芽孢杆菌对试验虾MDA的降低产生了显著的交互作用。免疫酶活方面,BS、HNa和BS+HNa组血淋巴和肝胰腺组织的碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性显著高于对照组,且BS+HNa组活性显著高于BS和HNa组。以上结果表明,单独或联合添加0.5%腐殖酸钠和0.5%枯草芽孢杆菌均能改善克氏原螯虾生长性能、抗氧化能力和免疫性能,且联合添加的效果优于单独添加,建议克氏原螯虾养殖中联合使用腐殖酸钠和枯草芽孢杆菌。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 腐殖酸钠 枯草芽孢杆菌 生长性能 抗氧化能力 免疫酶活
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组合策略提高枯草芽孢杆菌中几丁二糖脱乙酰酶的胞外表达
2
作者 刘杨韬 李阳阳 +1 位作者 贾士儒 侯颖 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第10期233-242,共10页
几丁二糖脱乙酰酶(diacetylchitobiose deacetylase,Dac)能够将乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)水解成生物活性物质氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN),而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis ... 几丁二糖脱乙酰酶(diacetylchitobiose deacetylase,Dac)能够将乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)水解成生物活性物质氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN),而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis BS-P43-NMK-T0为出发菌株,首先筛选了12种信号肽,其中,信号肽NprB引导Dac分泌能力最强,并且优化其功能区域后,重组菌株BS-P43-NMK-T4-N1的胞外酶活力达到69.83 U/mL;随后,筛选了3个诱导型启动子,其中启动子P grac100诱导表达效果最好,优化诱导条件后重组菌株BS-NMK-T4-N1-Pgrac的胞外酶活力提高至88.92 U/mL;当发酵条件为接种量4%、葡萄糖20 g/L(碳源)和营养肉汤10 g/L(氮源),胞外Dac酶活力达到127.59 U/mL,而在摇瓶中补加葡萄糖可以使Dac活性进一步提高至144.25 U/mL;最后,在3 L发酵罐中进行放大培养,胞外Dac活性为319.63 U/mL,是出发菌株胞外Dac活性的7.09倍。该研究为酶转化法制备GlcN的工业化生产提供基础研究。 展开更多
关键词 几丁二糖脱乙酰酶 枯草芽孢杆菌 信号肽 启动子 发酵优化
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基于沸石咪唑骨架材料的产D-阿洛酮糖3-差向异构酶重组枯草芽孢杆菌固定化研究
3
作者 张晗 尹子璐 +4 位作者 王雅珣 李飞胜 郭庆彬 丁文涛 王昌禄 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第8期284-292,共9页
为提高产D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-allulose 3-epimerase,DAE)工程菌在全细胞催化生产D-阿洛酮糖中的稳定性和重复利用性,降低D-阿洛酮糖生产成本,以沸石咪唑骨架-8(zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)为材料对产DAE重组枯草芽... 为提高产D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-allulose 3-epimerase,DAE)工程菌在全细胞催化生产D-阿洛酮糖中的稳定性和重复利用性,降低D-阿洛酮糖生产成本,以沸石咪唑骨架-8(zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)为材料对产DAE重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)进行固定化研究。通过乙酸锌、2-甲基咪唑与菌体共沉淀制备固定化细胞,利用扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱和X射线衍射等手段进行表征,证明成功制备了ZIF-8包覆的固定化重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis-DAE@ZIF-8。利用正交试验优化制备条件,当Zn^(2+)与2-甲基咪唑摩尔浓度比为1∶4,菌体添加量15 g/L,低温静置1 h时,复合材料比酶活最高,达344.81 U/g,活性回收率为77.75%。B.subtilis-DAE@ZIF-8在60℃、pH值7.5下表现最佳,60℃下半衰期为10.75 h,为游离细胞的1.46倍。B.subtilis-DAE@ZIF-8具有较好的重复使用性,重复催化10批次后,酶活力残留45.67%,转化率达20.08%,研究结果为D-阿洛酮糖的高效生物转化提供了参考。 展开更多
关键词 D-阿洛酮糖3-差向异构酶 枯草芽孢杆菌 细胞固定化 沸石咪唑骨架 D-阿洛酮糖
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枯草芽孢杆菌HB-011全基因分析及酶学研究
4
作者 姬帅 王新宇 +3 位作者 孙家佳 张晓彤 章圣龙 张智 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第9期40-49,共10页
该研究以酶活性为评价指标,通过苯胺蓝脱色法,从自然界特殊环境中筛选出一株对木质素具有高效降解能力的产漆酶细菌,生理生化指标和16S rDNA分子生物学鉴定结果表明该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为Bacillus subtilis HB... 该研究以酶活性为评价指标,通过苯胺蓝脱色法,从自然界特殊环境中筛选出一株对木质素具有高效降解能力的产漆酶细菌,生理生化指标和16S rDNA分子生物学鉴定结果表明该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为Bacillus subtilis HB-011。通过GO、COG、KEGG和CAZY数据库注解Bacillus subtilis HB-011全基因分析初步推测了其降解木质素相关途径。酶学性质研究实验表明,发酵漆酶在pH值2~6、温度20~55℃条件下具有较好的稳定性。菌株Bacillus subtilis HB-011在降解木质素方面具有很好的应用潜力。该研究为高效降解木质素漆酶的研究提供了菌种储备和理论依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 漆酶 基因组测序 酶学性质
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枯草芽孢杆菌漆酶与阴离子型聚丙烯酰胺微观作用机理
5
作者 王方略 张力雯 +2 位作者 张东晨 吴学凤 邓胜松 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3873-3885,共13页
阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)常用于煤泥水的澄清处理,产生大量的含聚污水将对选煤厂周边环境造成不利影响.为探究漆酶降解HPAM的微观作用机理,采用对接模拟了HPAM及其脱氨产物聚丙烯酸(PAA)结构模型与枯草芽孢杆菌漆酶(Lac)的结合,根据-CD... 阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)常用于煤泥水的澄清处理,产生大量的含聚污水将对选煤厂周边环境造成不利影响.为探究漆酶降解HPAM的微观作用机理,采用对接模拟了HPAM及其脱氨产物聚丙烯酸(PAA)结构模型与枯草芽孢杆菌漆酶(Lac)的结合,根据-CDOCKER_Energyscore打分最高原则筛选出Lac的最适底物,然后对该最适复合物分别进行基于亲和力虚拟突变和不同温度下的分子动力学(MD)模拟.结合模式分析表明,Lac对HPAM-3享有最高亲和力,且其结合最好,因此HPAM-3是该酶的最适底物;HPAM比PAA易被Lac降解;Lac可容纳一定碳链长度的HPAM和PAA.相互作用分析表明,Lac-HPAM-3亲和力最大主要原因是盐桥;TYR133通过形成氢键以稳定Lac-HPAM-2、Lac-HPAM-3和Lac-HPAM-4,而ARG487通过形成疏水以稳定所有的酶-底物复合物.基于亲和力虚拟突变分析表明,TYR118、TYR133、ARG487和LYS135是Lac降解HPAM-3的关键残基;LYS135和ARG487分别通过形成盐桥和疏水来最大限度地影响酶同底物的亲和力.MD分析表明,Lac-HPAM-3在298 K时总相互作用能、酶骨架RMSD及所有残基RMSF皆最低,因此该复合物在298 K时结合稳定性最佳;308 K时由于酶骨架RMSD最大,导致底物偏离最初对接位置,因此Lac-HPAM-3在308 K时结合稳定性最差.这些数据为揭示HPAM酶降解过程奠定基础,为将来突变试验来改造酶提供位点支持. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌漆酶(lac) 阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM) 对接 基于亲和力虚拟突变 分子动力学(MD)
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枯草芽孢杆菌QM11漆酶基因克隆表达及序列分析
6
作者 由庆 徐伟 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期225-228,共4页
为获得高效表达的产漆酶工程菌,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的漆酶(cotA)基因在大肠杆菌中表达。用PCR的方法从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QM11基因组中扩增cotA基因,连接载体pET22b构建成表达载体pET22b-cotA,转化至E.coli... 为获得高效表达的产漆酶工程菌,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的漆酶(cotA)基因在大肠杆菌中表达。用PCR的方法从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QM11基因组中扩增cotA基因,连接载体pET22b构建成表达载体pET22b-cotA,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,最终通过SDS-PAGE检测蛋白表达情况。克隆得到的cotA基因含有1542个核苷酸,由513个氨基酸组成,预测相对分子量为58 ku,理论等电点为5.91,无信号肽,二级结构以β-折叠和无规卷曲为主,其中β-折叠占26.71%,无规卷曲占52.05%,与NCBI已公布的Bacillus subtilis漆酶cotA基因(Gen Bank:GQ184294.1)碱基序列有12个碱基的差异,其编码的氨基酸序列有4个发生了改变。通过SDS-PAGE检测,目标蛋白相对分子质量约为54 ku,与预测相对分子量基本相符。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 漆酶 基因克隆 序列分析 表达载体构建 诱导表达
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枯草芽孢杆菌的分离鉴定及酶系分布的研究 被引量：20
7
作者 胡德朋 唐家毅 +2 位作者 曹昱 王永华 杨博 《水产科学》 CAS 北大核心 2008年第2期86-88,共3页
从池底污泥中分离1株产芽孢杆菌,经菌落形态及主要生理生化特性鉴定为枯草芽孢杆菌。对此菌发酵过程中产酶情况作了研究,结果表明,菌株能够分泌淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶,具有用于研制微生态制剂的潜力。
关键词 枯草芽孢杆菌 酶系分布 分离鉴定
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枯草芽孢杆菌Czk1诱导橡胶树抗病性相关防御酶系研究 被引量：15
8
作者 唐文 梁艳琼 +5 位作者 许沛冬 张驰成 吴伟怀 郑肖兰 贺春萍 易克贤 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期576-582,共7页
【目的】研究生防枯草芽孢杆菌Czk1对橡胶树体内防御酶活性的影响,探讨其诱导橡胶树抗病性机理,为Czk1在生物防治领域的应用打下基础。【方法】以过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧... 【目的】研究生防枯草芽孢杆菌Czk1对橡胶树体内防御酶活性的影响,探讨其诱导橡胶树抗病性机理,为Czk1在生物防治领域的应用打下基础。【方法】以过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)5种防御酶作为植物抗病性反应指标,用Czk1菌株发酵液1倍原液及10、100倍稀释液喷洒处理橡胶叶片,以喷洒LB液体培养基为对照,于不同时段测定各防御酶活性;按照生防菌与炭疽病菌接种顺序的不同,测定橡胶树炭疽病菌及生防菌对橡胶植株抗性相关酶活性的影响。【结果】经Czk1发酵液10倍稀释液处理的橡胶树叶片中CAT、POD、PAL和PPO 4种酶活性最高,诱导植株抗病性效果最佳,各酶活峰值分别达4264.62、28946.18、186.67和53.70 U/g,为对照组的5.24、6.34、3.19和3.38倍;而叶片中SOD活性最高的为Czk1发酵液1倍原液处理组,酶活峰值为1344.53 U/g,为对照组的5.19倍。先喷洒Czk1发酵液后接种病原菌的处理组,橡胶树叶片CAT、SOD、POD、PAL和PPO活性均显著高于其他处理组,各酶活峰值分别为4129.02、640.96、7416.94、173.35和71.59 U/g,为对照组的4.20、2.08、2.50、2.56和7.64倍。【结论】喷施生防菌Czk1稀释液可促使橡胶树抗病相关酶活性升高,诱导橡胶植株产生系统抗性。诱导抗性可能是枯草芽孢杆菌防治橡胶树真菌病害的重要机制之一。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 橡胶树炭疽病 诱导抗病性 防御酶
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纳豆枯草芽孢杆菌对犊牛断奶前后瘤胃发酵和酶活的影响 被引量：27
9
作者 张海涛 王加启 +6 位作者 卜登攀 栾绍宇 王蕾 周荣 邓露芳 周凌云 魏宏阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期5-11,共7页
本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌在犊牛瘤胃中可能的作用机理。选取24头7日龄左右中国荷斯坦奶牛公犊牛,分为试验1、2组及对照组。试验1、2组犊牛直接饲喂N1型和Na型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液,当各组犊牛开食料采食量达到... 本试验旨在研究纳豆枯草芽孢杆菌在犊牛瘤胃中可能的作用机理。选取24头7日龄左右中国荷斯坦奶牛公犊牛,分为试验1、2组及对照组。试验1、2组犊牛直接饲喂N1型和Na型纳豆枯草芽孢杆菌菌液,对照组不饲喂菌液,当各组犊牛开食料采食量达到规定要求时断奶。断奶时每组随机选取4头犊牛屠宰,剩余12头犊牛继续饲喂,8周后屠宰。结果表明:①在断奶时及断奶后8周,试验1组犊牛瘤胃pH显著低于对照组和试验2组(P<0.05);②断奶时及断奶后8周两处理组犊牛瘤胃总挥发性脂肪酸显著低于对照组(P<0.05);断奶早期3组犊牛瘤胃食糜中乙酸的摩尔百分比差异不显著,而断奶后8周试验1组犊牛瘤胃中乙酸的摩尔百分比较对照组低(P<0.05);与对照组相比,断奶时试验组犊牛瘤胃中丙酸的摩尔百分比显著降低(P<0.05),而断奶后8周各组间无显著差异;③断奶早期试验2组犊牛瘤胃中氨氮浓度显著低于对照组(P<0.05),试验1组氨氮浓度较对照组略低,但无显著差异;断奶后8周两处理组犊牛瘤胃中氨氮浓度显著低于对照组(P<0.05);④整个试验期对照组犊牛瘤胃中性蛋白酶活性显著高于两试验组(P<0.05),而外切葡聚糖酶活性显著低于两试验组(P<0.05),各组犊牛瘤胃中β-葡萄糖苷酶和内切葡聚糖酶活性无显著差异。本试验说明在犊牛生长的不同时期,不同类型纳豆枯草芽孢杆菌的饲喂效果不尽相同。日粮中添加纳豆枯草芽孢杆菌有利于瘤胃的发育,从而促进犊牛生长。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 犊牛 挥发性脂肪酸 瘤胃发酵 酶活
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低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌对5-16周龄五龙鹅肠道发育、微生物菌群结构及血清酶活性的影响 被引量：14
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作者 张名爱 杨文娇 +5 位作者 张泽楠 王宝维 史雪萍 岳斌 葛文华 郑惠文 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期3175-3183,共9页
本试验旨在研究低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌对5~16周龄五龙鹅肠道发育、微生物菌群结构及血清酶活性的影响。试验选用29日龄五龙鹅360只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10只(公母各占1/2)。Ⅰ组为最适铜添加组(铜添加水平为16 mg/kg,... 本试验旨在研究低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌对5~16周龄五龙鹅肠道发育、微生物菌群结构及血清酶活性的影响。试验选用29日龄五龙鹅360只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10只(公母各占1/2)。Ⅰ组为最适铜添加组(铜添加水平为16 mg/kg,未添加枯草芽孢杆菌);Ⅱ~Ⅵ组为枯草芽孢杆菌添加组,铜添加水平分别为0、4、8、12、16 mg/kg,枯草芽孢杆菌添加水平均为250mg/kg。试验期12周。结果表明:1)Ⅱ~Ⅵ组的空肠绒毛高度和绒腺比极显著高于Ⅰ组(P<0.01),空肠隐窝深度显著或极显著低于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01);Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ组的空肠肠壁厚度显著高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅱ~Ⅵ组之间的空肠绒毛高度、肠壁厚度和绒腺比无显著差异(P>0.05);Ⅱ组的空肠隐窝深度显著低于Ⅴ和Ⅵ组(P<0.05)。2)Ⅱ~Ⅵ组的盲肠大肠杆菌数量极显著低于Ⅰ组(P<0.01),盲肠双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著或极显著高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01)。Ⅱ~Ⅵ组之间的盲肠大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量差异不显著(P>0.05)。3)Ⅳ组的血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅴ组血清谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组血清ALT、AST、LDH活性与Ⅰ组差异不显著(P>0.05)。Ⅳ组血清碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组血清AKP活性显著低于Ⅰ组(P<0.05)。由此可见,低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌能够促进五龙鹅肠道发育,优化微生物菌群结构;铜对鹅肠道发育及微生物菌群结构影响较小。适宜的枯草芽孢杆菌和铜添加水平能够维护机体健康,相互间具有协同作用。 展开更多
关键词 铜 枯草芽孢杆菌 鹅 肠道发育 微生物菌群结构 酶活性
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产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究 被引量：42
11
作者 韩学易 陈惠 +3 位作者 吴琦 梁如玉 高凤菊 胥兵 《四川农业大学学报》 CSCD 2006年第2期178-181,共4页
以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5... 以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。 展开更多
关键词 纤维素酶 枯草芽孢杆菌 产酶条件
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枯草芽孢杆菌BS-05产纤维素酶条件的研究 被引量：10
12
作者 涂宗财 江国忠 +2 位作者 刘益东 刘成梅 张秋婷 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期181-183,187,共4页
以实验室筛选的枯草芽孢杆菌产纤维素酶菌株BS-05为出发菌株,对其产纤维素酶条件进行了研究。实验结果表明,菌株BS-05产纤维素酶的最佳条件是:以2%的CMC-Na为碳源,2%的蛋白胨和2%的酵母粉为氮源,产酶培养基初始pH为7,装液量为60mL/250mL... 以实验室筛选的枯草芽孢杆菌产纤维素酶菌株BS-05为出发菌株,对其产纤维素酶条件进行了研究。实验结果表明,菌株BS-05产纤维素酶的最佳条件是:以2%的CMC-Na为碳源,2%的蛋白胨和2%的酵母粉为氮源,产酶培养基初始pH为7,装液量为60mL/250mL,接种量5%,在37℃,150r/min下培养48h。在此条件下,该菌株产酶能力最强,羧甲基纤维素酶活力CMCA达195.46U/mL,滤纸酶活力FPA达174.52U/mL。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纤维素酶 产酶条件 优化
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解淀粉芽孢杆菌芽孢漆酶在染料脱色中的应用 被引量：9
13
作者 栗君 李国富 +5 位作者 卢磊 潘俊波 赵敏 王天女 徐腾飞 王靖瑶 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期125-129,共5页
解淀粉芽孢杆菌LC03的芽孢漆酶具有较好的稳定性,通过制备具有漆酶活性的芽孢悬液,研究了芽孢漆酶对4种合成染料RB亮蓝、活性黑、靛红和结晶紫的脱色效果,并筛选出促进染料脱色的漆酶介体,同时考察了酶浓度、介体浓度对模拟染料废水脱... 解淀粉芽孢杆菌LC03的芽孢漆酶具有较好的稳定性,通过制备具有漆酶活性的芽孢悬液,研究了芽孢漆酶对4种合成染料RB亮蓝、活性黑、靛红和结晶紫的脱色效果,并筛选出促进染料脱色的漆酶介体,同时考察了酶浓度、介体浓度对模拟染料废水脱色的影响。结果表明:RB亮蓝﹑活性黑和靛红在无介体时不能被脱色,在乙酰丁香酮(ACE)介导下的脱色率都超过了60.00%;在pH9.0时,芽孢漆酶-介体系统对模拟染料废水脱色的酶浓度和介体浓度分别为88.64U/L和0.5mmol/L时,2h后脱色率可超过80.00%,表明该芽孢漆酶在染料废水的处理上具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 漆酶 介体 染料脱色
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枯草芽孢杆菌2-3-2的抗线虫作用和产酶条件与酶特性 被引量：7
14
作者 陶树兴 张娟妮 +3 位作者 郭贤 柴霞 魏园媛 冯晓磊 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期45-49,共5页
为了研究枯草芽孢杆菌2-3-2抗线虫作用与几丁质酶活的关系,对几丁质酶的产酶条件进行优化并探讨酶的特性,通过盆栽试验测定了抗线虫效果,用DNS定糖法测定了几丁质酶活力.实验结果表明:枯草芽孢杆菌2-3-2对南方根结线虫防治效果显著,其... 为了研究枯草芽孢杆菌2-3-2抗线虫作用与几丁质酶活的关系,对几丁质酶的产酶条件进行优化并探讨酶的特性,通过盆栽试验测定了抗线虫效果,用DNS定糖法测定了几丁质酶活力.实验结果表明:枯草芽孢杆菌2-3-2对南方根结线虫防治效果显著,其抗线虫作用与几丁质酶活性呈正相关.几丁质酶产酶培养基组成为(g/L):胶体几丁质65,酵母膏1,葡萄糖5,KH2PO40.7,K2HPO40.5,MgSO4·7H2O 0.5,FeSO40.01,NaCl 0.5,微量盐1mL/L;起始pH 7.0,温度为30℃、培养时间为72h.与优化前相比,酶活性提高了1.59倍,达到35.17×10-10 mol/s.枯草芽孢杆菌2-3-2几丁质酶最适反应温度为40℃,最适pH为7.0;温度高于50℃及碱性条件下酶活力下降. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗线虫作用 几丁质酶 产酶条件 酶特性
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重组青霉素G酰化酶在枯草芽孢杆菌中的表达条件优化 被引量：10
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作者 黄鹤 杨晟 +2 位作者 李仁宝 黄晓冬 袁中一 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-177,共5页
为获得巨大芽孢杆菌青霉素 G酰化酶 (PGA)的高产菌株和条件 ,构建了分泌表达 PGA的基因工程枯草杆菌菌株 ,对表达条件进行了优化 .以 LB作为初始培养基 ,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌 PGA产量的影响 .实验发现重组细胞... 为获得巨大芽孢杆菌青霉素 G酰化酶 (PGA)的高产菌株和条件 ,构建了分泌表达 PGA的基因工程枯草杆菌菌株 ,对表达条件进行了优化 .以 LB作为初始培养基 ,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌 PGA产量的影响 .实验发现重组细胞产酶不再需要变温和苯乙酸诱导 .充足的通气量和适当浓度的淀粉可使细胞密度及 PGA表达量大为提高 .表达条件优化后 ,菌体 A60 0由 3提高到 2 0 ,PGA的表达量由 3～ 6U/ml提高到 35～ 40 U/ml,为目前生产用巨大芽孢杆菌表达量的 6倍 . 展开更多
关键词 青霉素G酰化酶 巨大芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 基因表达条件 优化
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枯草芽孢杆菌产酶规律及酶学性质研究 被引量：12
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作者 高永生 朱丽云 +2 位作者 朱贵州 费瑶 章宇星 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第19期11964-11965,11968,共3页
[目的]研究浙江建德分离得到的枯草芽孢杆菌淀粉酶的产酶规律和酶学性质。[方法]将分离得到的枯草芽孢杆菌发酵培养,研究其淀粉酶产酶规律,并研究了温度、pH、金属离子对酶学性质的影响。利用双倒数曲线法获得该酶的米氏常数Km。[结果]... [目的]研究浙江建德分离得到的枯草芽孢杆菌淀粉酶的产酶规律和酶学性质。[方法]将分离得到的枯草芽孢杆菌发酵培养,研究其淀粉酶产酶规律,并研究了温度、pH、金属离子对酶学性质的影响。利用双倒数曲线法获得该酶的米氏常数Km。[结果]随着发酵时间的延长,发酵液中淀粉酶的含量提高。在培养30h时,产酶量达到最高。该淀粉酶的最佳反应温度和pH分别为40℃和7.5。该酶具有一定的热稳定性,对酸碱条件较敏感。Na+、K+、Ca2+、Mg2+对该酶具有激活作用,Pb2+、Hg2+对该酶具有显著的抑制作用,Cu2+的影响不显著。该淀粉酶的米氏常数Km为2.31×10-3mol/L。[结论]该研究对该菌株淀粉酶的开发及工业应用具有较强的指导意义。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 淀粉酶 酶学性质 KM
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侧孢短芽孢杆菌碱性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢杆菌WB600中的高效表达 被引量：11
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作者 郭菁 田宝玉 +3 位作者 蔡婉玲 黄薇 江贤章 黄建忠 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第2期165-171,共7页
侧孢短芽孢杆菌G4菌株在侵染线虫的过程中可以分泌蛋白酶,降解线虫体壁,从而帮助细菌侵入宿主体内.在本文中,侧孢短芽孢杆菌的胞外蛋白酶BLG4基因经克隆后插入到改造后的枯草芽孢杆菌表达载体pWT22中,构建重组表达质粒pWT22-BLG4.构建... 侧孢短芽孢杆菌G4菌株在侵染线虫的过程中可以分泌蛋白酶,降解线虫体壁,从而帮助细菌侵入宿主体内.在本文中,侧孢短芽孢杆菌的胞外蛋白酶BLG4基因经克隆后插入到改造后的枯草芽孢杆菌表达载体pWT22中,构建重组表达质粒pWT22-BLG4.构建成功的重组质粒通过化学转化法转入枯草芽孢杆菌蛋白酶缺失菌株WB600中,转化子pWT22-BLG4/WB600在IPTG(1.0 mmol.L-1)的诱导下,发酵液上清中的蛋白酶活可达到620 U.mL-1,高于出发菌株G4的BLG4酶活(240 U.mL-1).经SDS-PAGE分析,重组子pWT22-BLG4/WB600产生了一条分子质量约为30 ku的条带,该条带的大小与侧孢短芽孢杆菌G4上清发酵液中BLG4条带的大小一致.而未经IPTG诱导的重组子pWT22-BLG4和经IPTG诱导的WB600则未出现该条带.结果证明侧孢短芽孢杆菌G4的碱性蛋白酶基因BLG4已在枯草芽孢杆菌WB600中获得了成功表达.重组蛋白酶具有与侧孢短芽孢杆菌G4产生的BLG4蛋白酶同样的酶学性质.同时,重组蛋白酶具有明显的杀线虫和体壁降解能力,表明其在线虫生物防治中将有广泛的应用前景. 展开更多
关键词 侧孢短芽孢杆菌 侵染性蛋白酶 枯草芽孢杆菌 高效表达 酶学特性 线虫
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2个枯草芽孢杆菌源纤维素酶基因的克隆、融合表达及其酶学性质分析 被引量：8
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作者 丁轲 邱静静 +7 位作者 罗伟光 李旺 李元晓 曹平华 何万领 赵龙妹 王玉琴 张春杰 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期2725-2733,共9页
本试验旨在构建不同纤维素酶的融合表达系统及探讨融合纤维素酶的酶学性质。利用PCR技术从实验室前期分离的枯草芽孢杆菌中分别扩增2个纤维素酶基因Cel42和Cel22,设计一段柔性接头(GSGGGS),通过酶切连接将2个纤维素酶基因构建在一个开... 本试验旨在构建不同纤维素酶的融合表达系统及探讨融合纤维素酶的酶学性质。利用PCR技术从实验室前期分离的枯草芽孢杆菌中分别扩增2个纤维素酶基因Cel42和Cel22,设计一段柔性接头(GSGGGS),通过酶切连接将2个纤维素酶基因构建在一个开放阅读框(ORF)内,插入到pET32a(+)中构建重组表达载体pET32a(+)-Cel42-Cel22,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,并对其酶学性质进行研究。结果表明:本试验成功克隆了2个纤维素酶基因Cel42和Cel22,并构建了重组表达系统BL21(DE3)/pET32a(+)-Cel42-Cel22,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)估计其分子质量约为101 ku,粗酶液中葡聚糖内切酶活性为57.62 U/mL,葡聚糖外切酶活性为32.57 U/mL。试验所得融合纤维素酶Cel42-Cel22的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0,温度在30~70℃范围内时可维持70%以上的纤维素酶活性,pH在4.0~9.0范围内时可保持75%以上的纤维素酶活性,除Mn^(2+)外的其他金属离子对纤维素酶的活性均具有一定的抑制作用,其中Hg^(2+)和Cu^(2+)对的抑制作用较明显。由此可见,本试验在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出了融合纤维素酶Cel42-Cel22,且该酶具有一定的活性,可适应较宽广的温度和pH范围,对金属离子敏感。 展开更多
关键词 纤维素酶 枯草芽孢杆菌 克隆 融合表达 酶学性质
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响应面法优化重组枯草芽孢杆菌产脂肪氧合酶条件 被引量：14
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作者 章栋梁 钟蔚 +3 位作者 张充 吕凤霞 别小妹 陆兆新 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期324-329,共6页
采用Plackett-Burman设计法,对影响重组枯草芽孢杆菌发酵产脂肪氧合酶的7个相关因子进行筛选,并建立枯草芽孢杆菌产脂肪氧合酶的最佳工艺。结果表明对重组菌发酵产酶具有显著影响的因子是乳糖、发酵时间和发酵温度。依据Plackett-Burma... 采用Plackett-Burman设计法,对影响重组枯草芽孢杆菌发酵产脂肪氧合酶的7个相关因子进行筛选,并建立枯草芽孢杆菌产脂肪氧合酶的最佳工艺。结果表明对重组菌发酵产酶具有显著影响的因子是乳糖、发酵时间和发酵温度。依据Plackett-Burman设计法的筛选结果,进一步采用响应面中心组合设计(Central Composite Design)对显著影响因子的最佳水平和交互作用进行研究,通过模型方程的3-D图和等高线图发现,当乳糖浓度为16.9g/L、发酵时间为88.49 h、发酵温度为29.71℃和装液量为61.31ml时,出现酶活最大预测值164.90 U/ml,验证试验证实了在上述条件下得出的酶活为167.32U/ml,与预测值高度吻合。优化后的培养基和培养条件使得重组脂肪氧合酶产量较优化前提高了2.37倍。 展开更多
关键词 脂肪氧合酶 枯草芽孢杆菌 条件优化 Plackett.Burman设计 响应曲面法
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D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达 被引量：11
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作者 贾敏 沐万孟 +1 位作者 张涛 江波 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1129-1135,共7页
将D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPE)基因利用PCR进行扩增,与枯草芽孢杆菌载体p MA5连接,构建重组质粒p MA5-cbdpe。重组质粒转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800感受态细胞,利用卡那霉素筛选和PCR鉴定,获得一株DPE重组枯草芽孢杆菌菌... 将D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPE)基因利用PCR进行扩增,与枯草芽孢杆菌载体p MA5连接,构建重组质粒p MA5-cbdpe。重组质粒转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800感受态细胞,利用卡那霉素筛选和PCR鉴定,获得一株DPE重组枯草芽孢杆菌菌株。该重组菌株无需诱导即可产生DPE酶,18 h时酶活可达6.8 U/m L。该酶最适p H为7.0,最适温度为55℃,与大肠杆菌表达的DPE酶酶学性质相似。结果表明,DPE酶可在枯草芽孢杆菌中表达。 展开更多
关键词 D-阿洛酮糖3-差向异构酶 D-阿洛酮糖 枯草芽孢杆菌 酶学性质
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