前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9在动脉粥样硬化中多重性效应的研究进展 被引量：1

1

作者 张丹 张小杉 +4 位作者 施依璐 刘笑笑 马岚 赵捷 王雅皙 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第2期245-247,共3页

动脉粥样硬化是大动脉慢性炎症性疾病,是心血管疾病(cardiovascular diseases, CVD)和脑卒中的主要原因[1]。脂质、炎性细胞、泡沫细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)和坏死细胞碎片在血管内壁单层内皮细胞下与... 动脉粥样硬化是大动脉慢性炎症性疾病,是心血管疾病(cardiovascular diseases, CVD)和脑卒中的主要原因[1]。脂质、炎性细胞、泡沫细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)和坏死细胞碎片在血管内壁单层内皮细胞下与内膜空间中积累和转化导致动脉粥样硬化病变,为世界范围内死亡的主要原因,发病及病死率较高[2-4]。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 心血管疾病 卒中 前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9

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类枯草杆菌蛋白酶基因GmSBT1在大豆共生固氮中的功能

2

作者 雷思杰 黄诗宸 +1 位作者 李友国 林会 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期133-139,共7页

为研究SBT(subtilases)家族蛋白在豆科植物共生固氮中的作用机制,分别利用生物信息学分析、时空表达定位、GUS染色定位和基因沉默等方法来研究GmSBT1在大豆-根瘤菌共生中的作用。结果显示:GmSBT1受根瘤菌特异性诱导,在成熟根瘤中高量表... 为研究SBT(subtilases)家族蛋白在豆科植物共生固氮中的作用机制,分别利用生物信息学分析、时空表达定位、GUS染色定位和基因沉默等方法来研究GmSBT1在大豆-根瘤菌共生中的作用。结果显示:GmSBT1受根瘤菌特异性诱导,在成熟根瘤中高量表达,且在根瘤皮层以及含菌细胞中发挥功能。GmSBT1-RNAi植株地上鲜质量、瘤质量、固氮酶活显著降低。结果表明,GmSBT1蛋白对根瘤的形成和发育以及根瘤的固氮具有重要的作用。 展开更多

关键词 蛋白酶 类枯草杆菌蛋白酶 根瘤菌 共生固氮 大豆

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枯草杆菌蛋白酶改善大豆分离蛋白功能特性的研究 被引量：10

3

作者 张洪 黄建韶 +1 位作者 王云 陈善云 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期27-29,共3页

利用枯草杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法改性,改性后的大豆分离蛋白的功能特性得到很大的提高。改性大豆分离蛋白的性质与改性程度(水解度DH)有关,随着水解度的增加,蛋白质的溶解性能提高,粘度下降,体外可消化性指数随水解度的增加... 利用枯草杆菌蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法改性,改性后的大豆分离蛋白的功能特性得到很大的提高。改性大豆分离蛋白的性质与改性程度(水解度DH)有关,随着水解度的增加,蛋白质的溶解性能提高,粘度下降,体外可消化性指数随水解度的增加而提高。 展开更多

关键词 枯草杆菌蛋白酶 大豆分离蛋白 酶法改性 功能特性

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枯草杆菌蛋白酶水解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究 被引量：6

4

作者 陈中 杨晓泉 彭志英 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第6期23-26,共4页

采用改进的BAPNA法探讨了枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解作用 ,通过实验确定了最适反应条件为 :反应温度 4 0～ 60℃、pH值 7.5～ 8.5、酶活力≥ 4 00 0 0units/mL以及 4 0min的反应时间 .

关键词 枯草杆菌蛋白酶 水解 大豆胰蛋白酶抑制剂

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类枯草杆菌蛋白酶的生物学功能及其在农牧业疾病控制中的应用 被引量：2

5

作者 廖素环 张民秀 +2 位作者 施李鸣 黄伟坚 韦英益 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期13897-13899,共3页

综述国内外研究类枯草杆菌蛋白酶基因在生物生长过程中参与表型的稳定性、致病性和自噬等重要生理功能及其在农牧业疾病控制中的应用前景。

关键词 类枯草杆菌蛋白酶 表型的稳定性 毒力因子 自噬 疾病控制

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枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化研究 被引量：1

6

作者 万娟 陈中 +1 位作者 杨晓泉 周伟伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期42-45,共4页

研究了枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)对大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)酶解活性的影响。实验在50℃,pH7.5条件下反应1h,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化程度,用SDS-PAGE方法和分子排阻色谱法... 研究了枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)对大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)酶解活性的影响。实验在50℃,pH7.5条件下反应1h,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定枯草杆菌蛋白酶对大豆胰蛋白酶抑制剂的水解钝化程度,用SDS-PAGE方法和分子排阻色谱法研究其蛋白酶钝化敏感性。结果证明,枯草杆菌蛋白酶可以水解大部分的抑制剂,并通过SDS-PAGE进一步证实了比色法得出的结论。而由分子排阻色谱图可以分析得出抑制剂经枯草杆菌蛋白酶酶解后,活性降低。分析认为,可能是由于抑制剂中二硫键被打断使得其结构发生改变,同时生成大量复杂的小分子多肽物质。因此,可以推断大豆胰蛋白酶抑制剂的稳定性与二硫键的存在有关。 展开更多

关键词 大豆胰蛋白酶抑制剂 枯草杆菌蛋白酶 水解 钝化

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枯草杆菌蛋白酶促大豆分离蛋白聚集:蛋白质和酶浓度以及热处理的影响(英文) 被引量：1

7

作者 于泓鹏 唐传核 +1 位作者 曾庆孝 杨晓泉 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第2期142-149,共8页

研究了大豆分离蛋白的枯草杆菌蛋白酶水解产物的聚集行为。加入枯草杆菌蛋白酶后,大豆蛋白分离物被迅速降解为分子量小于6.5 kDa小分子组分,这些组分相互作用形成大的聚集物。水解液的浊度变化趋势呈S型,底物浓度大于3.2%(酶浓度为750 U... 研究了大豆分离蛋白的枯草杆菌蛋白酶水解产物的聚集行为。加入枯草杆菌蛋白酶后,大豆蛋白分离物被迅速降解为分子量小于6.5 kDa小分子组分,这些组分相互作用形成大的聚集物。水解液的浊度变化趋势呈S型,底物浓度大于3.2%(酶浓度为750 U/mL)时蛋白质的浓度对聚集过程的影响更明显,此临界浓度主要取决于酶浓度。适当的预热处理有利于酶促聚集。由于聚集物能溶于SDS和尿素,说明非共价键(主要是疏水相互作用、氢键和离子键)对聚集物的形成有特别重要的作用。最后并提出了酶促聚集的机理。 展开更多

关键词 大豆分离蛋白 枯草杆菌蛋白酶 聚集 相互作用力

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枯草杆菌蛋白酶与3,4-二羟基-2-蒽醌磺酸钠的作用机理 被引量：2

8

作者 王兴明 丁立生 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期459-463,共5页

用UV光谱法研究了枯草杆菌蛋白酶 (BSP)在pH =4 2 0的酸性溶液中与 3,4 二羟基 2 蒽醌磺酸钠(ARS)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为 5 15nm ,与试剂相比红移 95nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定 ,结果表... 用UV光谱法研究了枯草杆菌蛋白酶 (BSP)在pH =4 2 0的酸性溶液中与 3,4 二羟基 2 蒽醌磺酸钠(ARS)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为 5 15nm ,与试剂相比红移 95nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定 ,结果表明 ,表观摩尔吸光系数εB1=5 89× 10 3 L/ (mol·cm) ,εB2 =4 6 8×10 3 L/ (mol·cm) ,结合数n1=13和n2 =4 5 ,积累平衡常数 β1=5 2 7× 10 4L/mol和 β2 =3 5 4× 10 5L/mol。第 1类结合数完全符合BSP空间构象中活性中心的作用原子数。研究发现 ,该反应基本符合Scatchard模型 ,BSP与ARS之间的作用以电荷力为主、疏水力为辅。 展开更多

关键词 枯草杆菌蛋白酶 二羟基蒽醌磺酸钠 积累平衡常数

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刚地弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的研究进展 被引量：1

9

作者 郑斌 尹志奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期93-97,共5页

刚地弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶是虫体粘附、入侵宿主细胞过程中的一种重要蛋白酶。研究发现弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶的催化区域高度保守;蛋白酶有多个作用底物,并与虫体的运动及毒力相关。本文对已发现的弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的结构... 刚地弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶是虫体粘附、入侵宿主细胞过程中的一种重要蛋白酶。研究发现弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶的催化区域高度保守;蛋白酶有多个作用底物,并与虫体的运动及毒力相关。本文对已发现的弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的结构及性能作一综述。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 类枯草杆菌蛋白酶 蛋白结构 蛋白酶解加工

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前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9及其抑制剂对中枢神经系统影响的研究进展 被引量：3

10

作者 袁琳瑛 董威辰 +1 位作者 罗源非 朱武生 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期712-717,共6页

前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)在调控血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)中扮演着重要角色,其抑制剂可将血清LDL-C降低至较低水平,目前逐渐被应用于缺血性卒中的二级预防。但PCSK9及其抑制剂对中枢神经系统的作用不止于此,PCSK9可能... 前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)在调控血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)中扮演着重要角色,其抑制剂可将血清LDL-C降低至较低水平,目前逐渐被应用于缺血性卒中的二级预防。但PCSK9及其抑制剂对中枢神经系统的作用不止于此,PCSK9可能参与多种神经系统疾病的病理生理过程,并涉及炎性反应、血小板活化等机制,PCSK9抑制剂也具有多效性。该文对PCSK9进行介绍,并对PCSK9及其抑制剂对中枢神经系统的影响进行综述。 展开更多

关键词 胆固醇 LDL 中枢神经系统 前蛋白转化酶 枯草杆菌蛋白酶-Kexin型9 前蛋白转化酶 枯草杆菌蛋白酶-Kexin型9抑制剂 综述

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枯草杆菌蛋白酶与茜素氨羧络合剂作用研究

11

作者 王兴明 董发勤 +2 位作者 丁立生 杨定明 石荣铭 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1471-1474,共4页

应用UV光谱法研究在pH4.20的酸性溶液中,枯草杆菌蛋白酶(BSP)与茜素氨羧络合剂(ALC)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为510nm,与试剂相比红移85nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定,结果表明,表观摩尔吸光系数εB=... 应用UV光谱法研究在pH4.20的酸性溶液中,枯草杆菌蛋白酶(BSP)与茜素氨羧络合剂(ALC)的相互作用。测得生成的缔合物的最大吸收峰为510nm,与试剂相比红移85nm。应用平衡透析法、摩尔比法和双波长法进行测定,结果表明,表观摩尔吸光系数εB=6.68×103L·mol-1·cm-1,表观结合常数K=7.25×106L·mol-1,平均结合数n=10,与BSP的活性部位基本吻合。研究发现,该反应基本符合Scatchard模型,认为是BSP与ALC之间以电荷力为主、疏水力为辅综合作用的结果。 展开更多

关键词 枯草杆菌蛋白酶 茜素氨羧络合剂 作用机理 UV光谱法 透析法

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柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

12

作者 吴天利 李菊 +6 位作者 张永艳 胡敏伦 闫化学 姜波 谢丹 袁超力 钟广炎 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期59-66,共8页

以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥... 以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥、蓖麻、番茄、毛果杨、大豆、挪威云杉、欧洲桤木、百合等18个物种的同源蛋白具有相同的4个保守区域,属于枯草杆菌蛋白酶.通过构建该基因的超表达载体并以沙田柚为材料进行遗传转化,获得了该基因的9个转基因沙田柚株系.实时定量PCR结果表明,4个用于检测的株系中有3株的表达量明显高于对照. 展开更多

关键词 丝氨酸蛋白酶 枯草杆菌蛋白酶 基因克隆 序列分析 遗传转化

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蝉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆及其序列和蛋白质分析

13

作者 陈官菊 柴一秋 +3 位作者 厉晓腊 方鸣 刘又高 金轶伟 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期1663-1670,共8页

蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治。本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR... 蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治。本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,从蝉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶(subtilisin-likeprotease)cDNA基因序列。cDNA全序列为2031bp,该序列5′-端和3′-端的非编码序列长度分别为170bp和262bp,开放阅读框为1599bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为18个氨基酸,前肽长度为133个氨基酸。该基因编码的蛋白序列与虫草棒束孢(Isariafarinosa)、球孢白僵菌(Beauveriabassiana)、蛹虫草(Cordycepsmilitaris)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)类枯草杆菌蛋白酶有较高的同源性,同源性分别为88%、88%、89%和71%。成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,4个潜在的N-糖基化位点,位于细胞的液泡中与分泌途径相关,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主。 展开更多

关键词 虫生真菌 蝉拟青霉 类枯草杆菌蛋白酶基因 克隆

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非水相体系中枯草杆菌蛋白酶-表面活性剂离子对的形成条件

14

作者 王树根 谷家栋 +1 位作者 张颖 范雪荣 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1798-1802,1807,共6页

枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率的影... 枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率的影响。采用120r/min磁力搅拌使两相混合能得到较好的酶转移率,作用时间为6h。水相初始pH值5.0有利于离子对的形成及酶蛋白的转移。水相中CaCl2的加入有利于消除两相混合过程中的乳化;但是过高的CaCl2浓度会减弱酶分子与AOT间的静电引力,不利于酶分子与AOT的结合。水相中酶浓度不变,随着有机相中AOT初始浓度的增加,酶的转移率呈现增长趋势。固定异辛烷中AOT浓度,随着水相中初始酶浓度的增加,转移至有机相中酶量先增加后减少。进入异辛烷的酶分子仍旧保持活性,能催化转酯化反应的进行,但随着反应时间的延长,酶的催化效率出现下降。 展开更多

关键词 疏水性离子对 枯草杆菌蛋白酶 非水相 表面活性剂

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杀虫球孢白僵菌菌株筛选及类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆 被引量：2

15

作者 贺小红 曾智 +4 位作者 付祖姣 丁学知 胡胜标 孙运军 夏立秋 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期100-103,共4页

在水稻叶蝉僵虫中分离出一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),根据GenBank上球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因序列同源性设计引物,采用RT-PCR法得到一个球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因的cD-NA片段.利用表达载体pET28 a(+),在大肠... 在水稻叶蝉僵虫中分离出一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),根据GenBank上球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因序列同源性设计引物,采用RT-PCR法得到一个球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因的cD-NA片段.利用表达载体pET28 a(+),在大肠杆菌中表达了CDEP2蛋白. 展开更多

关键词 RT-PCR 球孢白僵菌 类枯草杆菌蛋白酶

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枯草杆菌蛋白酶突变体的纯化和晶体生长 被引量：1

16

作者 林峥 朱榴琴 +1 位作者 马建华 毕汝昌 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第5期608-612,共5页

应用基因工程手段，获得了枯草杆菌蛋白酶Ｅ的双突变体基因（Ｍ２２２Ａ，Ｎ１１８Ｓ），此基因在枯草芽孢杆菌中表达得到了既抗氧又耐高温的碱性蛋白酶，含Ｍ２２２，Ｎ１１８Ｓ碱性蛋白酶基因的枯草杆菌发酵液经过硫酸铵分级沉淀和Ｄ... 应用基因工程手段，获得了枯草杆菌蛋白酶Ｅ的双突变体基因（Ｍ２２２Ａ，Ｎ１１８Ｓ），此基因在枯草芽孢杆菌中表达得到了既抗氧又耐高温的碱性蛋白酶，含Ｍ２２２，Ｎ１１８Ｓ碱性蛋白酶基因的枯草杆菌发酵液经过硫酸铵分级沉淀和ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５阴离子交换层析柱，再在ＦＰＬＣ层析系统上用Ｈｉｌｏａｄ２６／１０ＳＳｅｐｈａｒｏｓｅＨＰ阳离子交换柱分离得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳纯的蛋白酶样品。突变体酶的等电点为ｐＨ８．９，分子量为２７４００，用四肽底物测得的动力学参数也有较大的变化。对该突变体酶进行了晶体生长研究，获得了较大的单晶体。 展开更多

关键词 枯草杆菌 枯草杆菌蛋白酶 突变体 晶体

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木薯枯草杆菌蛋白酶家族鉴定及MeSDD1的功能分析 被引量：1

17

作者 肖亮 鲍茹雪 +5 位作者 曹升 陆柳英 尚小红 曾文丹 聂宣红 严华兵 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1308-1317,共10页

枯草杆菌蛋白酶基因家族(SBT)是控制植物生长发育和响应环境胁迫的重要基因家族。为进一步了解木薯SBT基因家族的数量、基本特征、功能域和进化关系等,在全基因组水平通过生物信息学方法对SBT基因家族进行了鉴定和分析,并对其中一个成... 枯草杆菌蛋白酶基因家族(SBT)是控制植物生长发育和响应环境胁迫的重要基因家族。为进一步了解木薯SBT基因家族的数量、基本特征、功能域和进化关系等,在全基因组水平通过生物信息学方法对SBT基因家族进行了鉴定和分析,并对其中一个成员的功能进行了分析。进化树分析结果表明,在木薯基因组中共鉴定到69个SBT成员,其中Manes.18G044300与拟南芥抗旱基因SDD1亲缘关系最近,因此将该成员命名为MeSDD1;22个成员无内含子,69个成员的蛋白携带5个高度保守的结构域,一部分SBT成员在染色体上呈紧密的串联分布,启动子存在干旱响应元件。用qRT-PCR检测筛选出表达量高的2个纯合株系用于后续研究。相关生理指标检测结果表明,2个转基因株系叶片的相对含水量均显著高于野生型;转基因株系离体叶片失水率小于野生型;转基因株系的气孔密度显著小于野生型;断水处理14 d,转基因株系的萎焉程度轻于野生型,表明MeSDD1增强了拟南芥植株的抗旱性。本研究结果为木薯抗旱育种提供了基因资源,并为后续研究MeSDD1介导的抗旱分子机制奠定了理论基础。 展开更多

关键词 木薯 枯草杆菌蛋白酶家族 转基因拟南芥 抗旱性 功能分析

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枯草杆菌蛋白酶水解牛乳酪蛋白的条件研究 被引量：2

18

作者 孔芳 衣杰荣 丁勇 《湖南农业科学》 2009年第6期9-11,共3页

根据pH-stat法,用正交试验优选出水解所需的底物浓度、pH值、温度、加酶量等试验条件,对枯草杆菌蛋白酶水解牛乳酪蛋白的水解条件进行研究。结果表明水解条件为:底物浓度3%、pH 8.5、温度55℃、加酶量为20μl,在此条件下酪蛋白的水解度... 根据pH-stat法,用正交试验优选出水解所需的底物浓度、pH值、温度、加酶量等试验条件,对枯草杆菌蛋白酶水解牛乳酪蛋白的水解条件进行研究。结果表明水解条件为:底物浓度3%、pH 8.5、温度55℃、加酶量为20μl,在此条件下酪蛋白的水解度达到27.05%。试验结果为进一步开发酪蛋白水解产物作为人类的功能食品打下基础。 展开更多

关键词 枯草杆菌碱性蛋白酶 水解 牛乳酪蛋白

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猪链球菌2型枯草杆菌素样蛋白酶的截短表达及其免疫保护作用研究 被引量：4

19

作者 吴立志 沈志强 +5 位作者 张松林 肖跃强 夏小静 扈俊波 李振伟 伍晓雄 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期507-509,共3页

为研究猪链球菌2型(SS2)截短表达枯草杆菌素样蛋白酶(C5a-1)的免疫保护特性,本研究选择其B细胞线性表位优势区(aa 91～aa 323)进行PCR扩增,克隆至pET32a载体中进行原核表达,并接种小鼠鉴定其免疫保护性。W estern blot鉴定结果显示,截... 为研究猪链球菌2型(SS2)截短表达枯草杆菌素样蛋白酶(C5a-1)的免疫保护特性,本研究选择其B细胞线性表位优势区(aa 91～aa 323)进行PCR扩增,克隆至pET32a载体中进行原核表达,并接种小鼠鉴定其免疫保护性。W estern blot鉴定结果显示,截短表达的sspA重组蛋白分子量约45.6 ku,能够与SS2阳性血清反应,具有良好的反应原性。将纯化的重组蛋白经3次免疫CD-1小鼠,攻毒试验结果表明重组蛋白对小鼠的免疫保护率仅为菌体免疫所提供保护率的15%。本研究为利用该蛋白作为动物免疫制剂提供了实验数据。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 枯草杆菌素样蛋白酶 原核表达 免疫保护

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棉粕蛋白及其枯草蛋白酶酶解产物的组分分析 被引量：7

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作者 刘文斌 尹君 王恬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期105-108,共4页

通过常规测定、凝胶层析、高效液相色谱等3种方法，测定和分析了棉粕蛋白及其枯草蛋白酶酶解产物的组份，并进行比较研究。结果表明，棉粕经过枯草杆菌蛋白酶酶解之后，可溶性蛋白比例比原来增加了1倍，游离氨基酸的含量增加了2.9倍；... 通过常规测定、凝胶层析、高效液相色谱等3种方法，测定和分析了棉粕蛋白及其枯草蛋白酶酶解产物的组份，并进行比较研究。结果表明，棉粕经过枯草杆菌蛋白酶酶解之后，可溶性蛋白比例比原来增加了1倍，游离氨基酸的含量增加了2.9倍；棉粕原料和酶解后的蛋白质产物经过SephadexG-50凝胶层析分离后均得到2个主要蛋白峰，并且它们相对分子质量分别为16300u和7950u左右，而酶解物2个峰的蛋白质含量比棉粕原料中的少；通过高效液相色谱分析，棉粕蛋白含有较多大分子蛋白，酶解之后大分子蛋白含量下降了7.71％，小分子肽的种类与含量明显增加，含量由16.36％增加至63.27％，游离氨基酸的含量由4.9％增加至19.4％。 展开更多

关键词 枯草杆菌蛋白酶 棉粕蛋白 酶解产物 凝胶层析 高效液相色谱

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