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A型产气荚膜梭菌Fba重组干酪乳杆菌的构建与表达: 1; 作者杨启尧范佳霖 +5 位作者秦达曲艺王嘉彬余丽芸史同瑞侯喜林《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第6期36-42,71,共8页; 为了构建重组乳酸菌,以A型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出Fba基因并将其连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,鉴定正确后,用1.0 mmol·L-1 IPTG诱导表达,最佳诱导表达时间为5 h。表达的目的蛋白纯化后与弗氏佐剂乳... 展开更多; 关键词 A型产气荚膜梭菌 Fba基因干酪乳杆菌构建与表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

稻瘟病抗性基因Pi36酵母表达载体的构建与表达: 2; 作者王玲张丹 +1 位作者张向明刘新琼《湖北农业科学》北大核心 2010年第7期1544-1546,共3页; 稻瘟病抗性基因Pi36编码卷曲螺旋核苷酸结合位点-富亮氨酸重复序列(CC-NBS-LRR)结构的抗病蛋白。为了深入研究该基因的结构和功能,试验利用双酶切构建了Pi36基因CC结构域的酵母表达载体,通过菌落PCR鉴定和测序验证阳性克隆。然后分别收... 展开更多; 关键词稻瘟病抗性基因Pi36 酵母表达载体构建与表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组猪源IFN-λ1植物乳杆菌的构建与表达验证: 3; 作者付婷婷马彬尧 +6 位作者王茂鹏韩继成许汪陈竞姜宇航金宁一李昌《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期35-39,43,共6页; 为构建猪源3型干扰素(pIFN-λ1)的重组植物乳杆菌并进行验证。通过PCR方法扩增含有植物乳杆菌锚定信号肽的猪源IFN-λ1基因(pIFN-λ1),插入到pSIP411表达载体电转入到中间克隆宿主菌NZ3900中,获得重组质粒pSIP-pIFN-λ1;再次电转入到表... 展开更多; 关键词 3型干扰素植物乳酸菌构建与表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组猫IFN-α的质粒构建、真核表达及体外抗病毒活性分析: 4; 作者李沛恒邹万成 +5 位作者陈竞张国庆崔春梅蒋嵘金宁一李昌《中国动物传染病学报》北大核心 2024年第6期17-24,共8页; 本文为探究猫IFN-α(FeIFN-α)在体外MDCK、F81细胞中的抗病毒效果,为后续体内实验提供参考。根据猫IFN-α(GenBank登录号:NP_001027000.1)序列并添加6×His标签,合成后通过pUC57载体进行克隆,然后亚克隆至pcDNA3.1载体,获得含有目... 展开更多; 关键词猫IFN-α 构建与表达抗病毒活性干扰素刺激基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗卵巢癌单链免疫细胞因子真核表达载体的构建及表达被引量：4: 5; 作者张辛燕冯捷 +4 位作者叶雪姚煜程洪艳成夜霞付天云《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期484-490,共7页; 为将细胞因子IL 2靶向卵巢癌局部 ,提高肿瘤局部细胞因子的浓度 ,构建并表达了抗卵巢癌单链免疫细胞因子IL 2 1 83B2scFv .通过基因工程将两段基因IL 2和 1 83B2scFv开放读码框架的编码序列克隆在一起 ,在CHO细胞内人巨细胞病毒启动子... 展开更多; 关键词卵巢癌单链抗体 IL-2 质粒构建与表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究: 6; 作者杜婉嘉陈香利 +3 位作者毛雪马银鹏孔祥辉林火松《食药用菌》 2024年第3期176-181,共6页; 金针菇免疫调节蛋白FIP-fve是隶属于真菌免疫调节蛋白家族的小分子功能蛋白质,在生物医学研究和功能食品应用中有重要价值,但天然蛋白产量较低。本文构建了真核表达载体pPIC9K-FIP-fve后转入毕赤酵母GS115。结果:甲醇诱导获得高效分泌... 展开更多; 关键词金针菇免疫调节蛋白真核重组载体构建与表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名A型产气荚膜梭菌Fba重组干酪乳杆菌的构建与表达: 1; 作者杨启尧范佳霖秦达曲艺王嘉彬余丽芸史同瑞侯喜林; 机构黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院; 出处《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第6期36-42,71,共8页; 基金 “三纵”科研团队(自然)TDJH201904动物肠道菌群与免疫学研究创新团队。; 文摘为了构建重组乳酸菌,以A型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出Fba基因并将其连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,鉴定正确后,用1.0 mmol·L-1 IPTG诱导表达,最佳诱导表达时间为5 h。表达的目的蛋白纯化后与弗氏佐剂乳化制备抗血清,Western blot分析表明,目的蛋白能与制备的抗血清特异结合,具有很好的反应原性。将正确的Fba基因与pLA乳酸菌载体构建成重组质粒并电转至干酪乳杆菌中,Western blot结果显示,重组的干酪乳杆菌表达的蛋白与抗血清具有良好的反应原性。间接免疫荧光、流式细胞仪检测结果表明,目的蛋白能够展示表达到菌体表面。; 关键词 A型产气荚膜梭菌 Fba基因干酪乳杆菌构建与表达; Keywords Clostridium perfringens type A Fba gene Lactobacillus casei construction and expression; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稻瘟病抗性基因Pi36酵母表达载体的构建与表达: 2; 作者王玲张丹张向明刘新琼; 机构华南农业大学资源环境学院中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室; 出处《湖北农业科学》北大核心 2010年第7期1544-1546,共3页; 基金国家转基因生物新品种培育重大专项"建立高通量克隆稻瘟病抗性基因技术体系"(2009ZX08009-023B) 国家自然科学基金青年项目(30600400); 文摘稻瘟病抗性基因Pi36编码卷曲螺旋核苷酸结合位点-富亮氨酸重复序列(CC-NBS-LRR)结构的抗病蛋白。为了深入研究该基因的结构和功能,试验利用双酶切构建了Pi36基因CC结构域的酵母表达载体,通过菌落PCR鉴定和测序验证阳性克隆。然后分别收集培养至不同OD值的酵母细胞提取蛋白,利用Western blotting检测目的蛋白的表达情况。结果表明,目的蛋白成功表达,并且在OD值为1.0的酵母细胞中表达量最大。; 关键词稻瘟病抗性基因Pi36 酵母表达载体构建与表达; Keywords Magnaporthe oryzae resistance gene Pi36 yeast expression vector construction and expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S435.114.41 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组猪源IFN-λ1植物乳杆菌的构建与表达验证: 3; 作者付婷婷马彬尧王茂鹏韩继成许汪陈竞姜宇航金宁一李昌; 机构扬州大学兽医学院军事医学研究院军事兽医研究所温州大学病毒学研究所; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期35-39,43,共6页; 基金国家重点研发计划(2017YFD0501002) 国家自然科学基金(31802224); 文摘为构建猪源3型干扰素(pIFN-λ1)的重组植物乳杆菌并进行验证。通过PCR方法扩增含有植物乳杆菌锚定信号肽的猪源IFN-λ1基因(pIFN-λ1),插入到pSIP411表达载体电转入到中间克隆宿主菌NZ3900中,获得重组质粒pSIP-pIFN-λ1;再次电转入到表达宿主植物乳杆菌Lp18获得重组植物乳杆菌;制备重组植物乳杆菌并验证其表达。结果显示,成功扩增出650bp目的条带,电转入植物乳杆菌Lp18中成功构建重组Lp18:pSIP-pIFN-λ1。WesternBlot、免疫荧光和流式细胞分析等方法验证重组蛋白pIFN-λ1的表达,获得阳性结果,阳性率为22.96%,且进一步证明其展示并锚定在植物乳杆菌表面。本试验成功构建了1株能稳定表达猪源IFN-λ1蛋白的重组植物乳杆菌,为猪源IFN-λ1的开发应用研究提供理论基础。; 关键词 3型干扰素植物乳酸菌构建与表达; Keywords IFN-λs Lactobacillus plantarum construction and expression; 分类号 TQ929 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组猫IFN-α的质粒构建、真核表达及体外抗病毒活性分析: 4; 作者李沛恒邹万成陈竞张国庆崔春梅蒋嵘金宁一李昌; 机构吉林农业大学动物医学院中国农业科学院长春兽医研究所; 出处《中国动物传染病学报》北大核心 2024年第6期17-24,共8页; 基金中国医学科学院与健康科技创新工程项目(2020-I2M-5-001)。; 文摘本文为探究猫IFN-α(FeIFN-α)在体外MDCK、F81细胞中的抗病毒效果,为后续体内实验提供参考。根据猫IFN-α(GenBank登录号:NP_001027000.1)序列并添加6×His标签,合成后通过pUC57载体进行克隆,然后亚克隆至pcDNA3.1载体,获得含有目的基因的真核表达质粒,转染293T细胞,通过Western blot检测FeIFN-α的表达情况。通过重组绿色荧光蛋白水疱性口炎病毒(VSV-GFP)感染细胞实验,利用结晶紫染色法进行FeIFN-α抗病毒活性初步分析并确定最佳稀释倍数,通过荧光观察法、流式细胞术检测其抗病毒活性,最后通过相对荧光定量qPCR技术检测猫IFN-α对干扰素刺激基因(ISG15、MX1、OAS1)的调控作用。结果表明,成功表达FeIFN-α并具有生物学活性,且可以明显抑制VSV-GFP病毒侵染F81、MDCK细胞,qPCR结果分析表明猫IFN-α在F81、MDCK细胞中均可有效诱导ISG15、MX1、OAS1基因上调。本研究结果为后续犬猫体内抗病毒实验提供参考依据。; 关键词猫IFN-α 构建与表达抗病毒活性干扰素刺激基因; Keywords FelFN-α construction and expression antiviral activity interferon stimulating gene; 分类号 S859.7 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗卵巢癌单链免疫细胞因子真核表达载体的构建及表达被引量：4: 5; 作者张辛燕冯捷叶雪姚煜程洪艳成夜霞付天云; 机构北京大学人民医院妇科肿瘤中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期484-490,共7页; 文摘为将细胞因子IL 2靶向卵巢癌局部 ,提高肿瘤局部细胞因子的浓度 ,构建并表达了抗卵巢癌单链免疫细胞因子IL 2 1 83B2scFv .通过基因工程将两段基因IL 2和 1 83B2scFv开放读码框架的编码序列克隆在一起 ,在CHO细胞内人巨细胞病毒启动子的作用下表达可溶性融合蛋白 .酶联免疫吸附法检测其免疫学活性 ,并检测其促淋巴细胞增殖活性 .构建成功的抗体细胞因子融合蛋白能够在哺乳动物细胞内表达并能分泌到细胞外 ,且融合蛋白既能与卵巢癌相关抗原OC1 83B2很好地结合 ,又能刺激IL 2依赖细胞株的增殖。; 关键词卵巢癌单链抗体 IL-2 质粒构建与表达; Keywords ovarian carcinoma, single-chain Fv, interleukin 2, plasmid construction and expression; 分类号 R737.31 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究: 6; 作者杜婉嘉陈香利毛雪马银鹏孔祥辉林火松; 机构黑龙江省科学院微生物研究所龙泉市农业农村局经济作物服务站; 出处《食药用菌》 2024年第3期176-181,共6页; 基金黑龙江省科学院院长基金项目(YZ2023sw01)。; 文摘金针菇免疫调节蛋白FIP-fve是隶属于真菌免疫调节蛋白家族的小分子功能蛋白质,在生物医学研究和功能食品应用中有重要价值,但天然蛋白产量较低。本文构建了真核表达载体pPIC9K-FIP-fve后转入毕赤酵母GS115。结果:甲醇诱导获得高效分泌表达的可溶性蛋白,表达率40%以上,经纯化,蛋白产率为121.6 mg/L。本研究为FIP-fve重组蛋白应用奠定了基础。; 关键词金针菇免疫调节蛋白真核重组载体构建与表达纯化; Keywords Flammulina velutipes immunomodulatory protein construction and expression purification; 分类号 S646 [农业科学—蔬菜学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	A型产气荚膜梭菌Fba重组干酪乳杆菌的构建与表达	杨启尧范佳霖秦达曲艺王嘉彬余丽芸史同瑞侯喜林	《黑龙江八一农垦大学学报》	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	稻瘟病抗性基因Pi36酵母表达载体的构建与表达	王玲张丹张向明刘新琼	《湖北农业科学》北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组猪源IFN-λ1植物乳杆菌的构建与表达验证	付婷婷马彬尧王茂鹏韩继成许汪陈竞姜宇航金宁一李昌	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组猫IFN-α的质粒构建、真核表达及体外抗病毒活性分析	李沛恒邹万成陈竞张国庆崔春梅蒋嵘金宁一李昌	《中国动物传染病学报》北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	抗卵巢癌单链免疫细胞因子真核表达载体的构建及表达	张辛燕冯捷叶雪姚煜程洪艳成夜霞付天云	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	金针菇免疫调节蛋白FIP-fve在毕赤酵母中的表达研究	杜婉嘉陈香利毛雪马银鹏孔祥辉林火松	《食药用菌》	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料