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猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析被引量：7: 1; 作者汤智慧郭抗抗 +3 位作者张彦明王津津李宇立向华《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第4期7-13,18,共8页; 【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定 TCID50 陕西杨凌株; 在线阅读下载PDF 职称材料

柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验被引量：6: 2; 作者王卉林青 +1 位作者战美娜于三科《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第8期40-46,54,共8页; 【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株... 展开更多; 关键词 SO7基因柔嫩艾美耳球虫杨凌株克隆表达保护性试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究: 3; 作者彭维刚黄妮 +3 位作者林青胡冰张三东于三科《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第12期1-7,14,共8页; 【目的】对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达,检测表达产物的免疫保护性,为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定基础。【方法】以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因,测序... 展开更多; 关键词柔嫩艾美耳球虫杨凌株 RB1-a基因克隆表达免疫保护; 在线阅读下载PDF 职称材料

柔嫩艾美耳球虫杨陵株3-1E基因的克隆与序列分析被引量：2: 4; 作者战美娜林青 +1 位作者于三科宋军科《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期11-15,共5页; 根据GenBank发表的鸡柔嫩艾美耳球虫(Ei meriatenella)3-1E基因的ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从E.tenella杨陵(YL)株总RNA中扩增3-1E基因,并将扩增产物与pMD18-T easy载体进行连接并测序,用DNAstar 5.0软件对测序结果进行分析。结果表... 展开更多; 关键词艾美耳球虫杨凌株 3-1E基因遗传变异; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析被引量：7: 1; 作者汤智慧郭抗抗张彦明王津津李宇立向华; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第4期7-13,18,共8页; 基金陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项(2007ZDKG-13); 文摘【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、间接免疫荧光试验及电镜观察,对分离病毒进行鉴定;用免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA),测定分离毒株的TCID50,并对其全基因组序列进行测定与分析。【结果】分离得到1株猪圆环病毒2型毒株,分离株在PK-15细胞上的TCID50为10-4.75。全基因组序列同源性比对发现,分离株与一加拿大分离株(DQ200735)同源性最高(99.4%)。【结论】从陕西杨凌分离得到了1个猪圆环病毒2型分离株。; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定 TCID50 陕西杨凌株; Keywords porcine circovirus type 2 isolation and identification 50% tissue culture infective dose Yangling isolate; 分类号 S858.282.659.2 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验被引量：6: 2; 作者王卉林青战美娜于三科; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第8期40-46,54,共8页; 基金陕西省农业攻关项目(2008K02-06) 985工程科技创新平台项目"畜禽养殖与重大疾病防治"(Z101020001); 文摘【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的SO7基因,对其测序后进行序列分析。将SO7基因克隆到表达载体pET-32a中,构建pET-SO7重组质粒,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,评价其免疫效果。【结果】鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因序列的开放阅读框(ORF)为651个碱基,共编码217个氨基酸。E.tenella YL株SO7基因与E.tenella LS18株、E.tenella BJ株、E.tenella GD株SO7基因ORF区序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%,其氨基酸序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%。SDS-PAGE分析表明,表达产物成功地表达出了分子质量为45ku的融合蛋白。各种抗球虫指标的测定结果显示,该蛋白对球虫感染鸡体具有一定的保护性。【结论】SO7基因具有很强的保守性,各虫株之间差异不大;重组蛋白具有一定的保护效果,适合用来制备基因疫苗。; 关键词 SO7基因柔嫩艾美耳球虫杨凌株克隆表达保护性试验; Keywords SO7 gene Eimeria tenella YL strain cloning and expression protective experiment; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究: 3; 作者彭维刚黄妮林青胡冰张三东于三科; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第12期1-7,14,共8页; 基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金项目(SKLVEB2009KFKT7003); 文摘【目的】对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达,检测表达产物的免疫保护性,为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定基础。【方法】以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因,测序后进行序列分析。然后将RB1-a基因N端不含信号肽序列克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a-RB1-a重组质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,对其免疫效果进行评价。【结果】柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的开放阅读框(ORF)包含618个碱基,编码205个氨基酸,与GenBank报道的柔嫩艾美耳球虫PAPa46株ORF序列相似性为99.84%,两者推导的氨基酸序列相同。SDS-PAGE分析表明,重组质粒表达分子质量为42ku的融合蛋白。免疫效果测定结果显示,RB1-a免疫组和RB1-a+佐剂免疫组的相对增重率分别为64.2%和69.4%,卵囊减少率分别达37.22%和30.56%,抗球虫指数分别为146.2和150.4。【结论】RB1-a基因具有很强的保守性,种间差异不大;RB1-a重组蛋白具有一定的免疫保护效果。; 关键词柔嫩艾美耳球虫杨凌株 RB1-a基因克隆表达免疫保护; Keywords Eimeria tenella YL strain RB1-a gene cloning expression immune protection; 分类号 S852.723 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柔嫩艾美耳球虫杨陵株3-1E基因的克隆与序列分析被引量：2: 4; 作者战美娜林青于三科宋军科; 机构西北农林科技大学动物医学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期11-15,共5页; 基金陕西省农业攻关项目(2008K02-06) "985"工程科技创新平台项目"畜禽养殖与重大疾病防治"(Z101020001); 文摘根据GenBank发表的鸡柔嫩艾美耳球虫(Ei meriatenella)3-1E基因的ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从E.tenella杨陵(YL)株总RNA中扩增3-1E基因,并将扩增产物与pMD18-T easy载体进行连接并测序,用DNAstar 5.0软件对测序结果进行分析。结果表明,2009年分离的E.tenellaYL株3-1E基因与其他虫株相比,核苷酸有9个位点发生变化,其中7个位点的变化引起了相应氨基酸位点的改变,其他2个位点的变化未引起氨基酸的改变。对2006年和2009年分离的YL株3-1E基因的核苷酸进行了比对,结果发现,有两个核苷酸位点发生了变化。系统发育树分析表明,E.tenellaYL株3-1E基因同种间与E.tenella甘肃株遗传关系最近,同属间与E.acervulina法国株遗传关系最近。; 关键词艾美耳球虫杨凌株 3-1E基因遗传变异; Keywords Eimeria tenella YL strain 3-1E gene Genetic variation; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析	汤智慧郭抗抗张彦明王津津李宇立向华	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2011	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验	王卉林青战美娜于三科	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2010	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究	彭维刚黄妮林青胡冰张三东于三科	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	柔嫩艾美耳球虫杨陵株3-1E基因的克隆与序列分析	战美娜林青于三科宋军科	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料