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骨形成蛋白4条件性RNA干扰小鼠的建立
被引量：
3
1
作者
李福兵
杜晓兰
+3 位作者
余瑛
赵玲
何启芬
陈林
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期341-346,共6页
为研究骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)在骨骼发育中的作用,我们以含有LoxPneo的pBSK/U6载体为骨架,构建小鼠BMP4条件性RNAi(conditional RNA interference),CRNA;载体(BMP4CRNAi),经KpnⅠ和AflⅢ双酶切获取针对bmp4并...
为研究骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)在骨骼发育中的作用,我们以含有LoxPneo的pBSK/U6载体为骨架,构建小鼠BMP4条件性RNAi(conditional RNA interference),CRNA;载体(BMP4CRNAi),经KpnⅠ和AflⅢ双酶切获取针对bmp4并含neo基因的目的干扰片段,纯化后的目的片段显微注射入0.5d的FVB/NJ小鼠受精卵,并植入同期发情的假孕母鼠中,获取G0代转基因小鼠;利用PCR对G0代转基因小鼠基因型进行鉴定,PCR阳性的小鼠与FVB/NJ小鼠交配,最终获取稳定传代的BMP4CRNAi小鼠。稳定传代的BMP4CRNAi小鼠与成骨和软骨前体细胞表达Cre的转基因小鼠(Col2a1-Cre)交配,获取BMP4Col2a1-CRNAi小鼠。分离BMP4Col2a1-CRNAi小鼠原代软骨细胞,提取总RNA,利用半定量RT-PCR检测RNA干扰效率。小鼠基因型鉴定结果表明:成功获得条件性RNAi转基因小鼠;BMP4干扰效率检测结果表明:在软骨细胞中BMP4的干扰效率为81%。以上结果表明,我们成功制备了BMP4CRNAi小鼠和BMP4Col2a1-CRNAi小鼠,BMP4CRNAi小鼠与不同Cre转基因小鼠交配,可以研究BMP4在不同细胞、组织和器官的功能,BMP4Col2a1-CRNAi小鼠的获得为研究BMP4在软骨发育中的作用提供了合适的动物模型。
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关键词
骨形成蛋白4
条件性
RNA干扰
条件性敲低
转基因
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职称材料
胎盘糖皮质激素受体低表达对孕期抑郁模型雌性子代的影响
2
作者
潘淑敏
曹雄
王志坚
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第12期1480-1485,共6页
目的探索糖皮质激素受体(GR)对孕期抑郁小鼠子代抑郁倾向的影响。方法利用普通小鼠进行孕期抑郁(PND)造模,并用Western blot检测不同性别胎盘绒毛中GR表达情况;利用转基因工具鼠获得胎盘GR敲低小鼠,共20只。Western blot检测胎盘GR敲低...
目的探索糖皮质激素受体(GR)对孕期抑郁小鼠子代抑郁倾向的影响。方法利用普通小鼠进行孕期抑郁(PND)造模,并用Western blot检测不同性别胎盘绒毛中GR表达情况;利用转基因工具鼠获得胎盘GR敲低小鼠,共20只。Western blot检测胎盘GR敲低效果并分析胎盘组织学改变;对胎盘GR敲低小鼠进行孕期抑郁造模,比较GR敲低组抑郁孕鼠的仔鼠(KD)与GR非敲低组仔鼠(N-KD)生长发育情况;动物行为实验检测仔鼠运动能力和抑郁倾向。结果PND小鼠雌性仔鼠胎盘绒毛GR表达显著升高(P<0.05);胎盘GR敲低小鼠的胎盘GR表达显著降低(P<0.05);KD组仔鼠胎盘形态未见异常(P>0.05);KD组仔鼠生长发育未见异常(P>0.05);KD组仔鼠成年后运动能力未见异常(P>0.05);KD组雌性仔鼠在成年后更有抑郁倾向(P<0.05)。结论敲低胎盘GR可能增加孕期抑郁小鼠雌性子代抑郁倾向。
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关键词
糖皮质激素受体
孕期抑郁
条件性敲低
转基因小鼠
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职称材料
题名
骨形成蛋白4条件性RNA干扰小鼠的建立
被引量：
3
1
作者
李福兵
杜晓兰
余瑛
赵玲
何启芬
陈林
机构
第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军创伤中心 创伤、烧伤、复合伤国家重点实验室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期341-346,共6页
基金
国家重点基础研究发展规划资助项目(973项目)(编号:2005CB522604)
国家自然基金杰出青年基金(编号:30425023)
国家自然基金重点项目(编号:30530410)资助~~
文摘
为研究骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)在骨骼发育中的作用,我们以含有LoxPneo的pBSK/U6载体为骨架,构建小鼠BMP4条件性RNAi(conditional RNA interference),CRNA;载体(BMP4CRNAi),经KpnⅠ和AflⅢ双酶切获取针对bmp4并含neo基因的目的干扰片段,纯化后的目的片段显微注射入0.5d的FVB/NJ小鼠受精卵,并植入同期发情的假孕母鼠中,获取G0代转基因小鼠;利用PCR对G0代转基因小鼠基因型进行鉴定,PCR阳性的小鼠与FVB/NJ小鼠交配,最终获取稳定传代的BMP4CRNAi小鼠。稳定传代的BMP4CRNAi小鼠与成骨和软骨前体细胞表达Cre的转基因小鼠(Col2a1-Cre)交配,获取BMP4Col2a1-CRNAi小鼠。分离BMP4Col2a1-CRNAi小鼠原代软骨细胞,提取总RNA,利用半定量RT-PCR检测RNA干扰效率。小鼠基因型鉴定结果表明:成功获得条件性RNAi转基因小鼠;BMP4干扰效率检测结果表明:在软骨细胞中BMP4的干扰效率为81%。以上结果表明,我们成功制备了BMP4CRNAi小鼠和BMP4Col2a1-CRNAi小鼠,BMP4CRNAi小鼠与不同Cre转基因小鼠交配,可以研究BMP4在不同细胞、组织和器官的功能,BMP4Col2a1-CRNAi小鼠的获得为研究BMP4在软骨发育中的作用提供了合适的动物模型。
关键词
骨形成蛋白4
条件性
RNA干扰
条件性敲低
转基因
Keywords
bone morphogenetic protein 4
conditional RNAi
conditional knockdown
transgenic
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
胎盘糖皮质激素受体低表达对孕期抑郁模型雌性子代的影响
2
作者
潘淑敏
曹雄
王志坚
机构
南方医科大学南方医院妇产科
教育部精神健康研究重点实验室
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022年第12期1480-1485,共6页
基金
广东省自然科学基金(编号:201904020039)。
文摘
目的探索糖皮质激素受体(GR)对孕期抑郁小鼠子代抑郁倾向的影响。方法利用普通小鼠进行孕期抑郁(PND)造模,并用Western blot检测不同性别胎盘绒毛中GR表达情况;利用转基因工具鼠获得胎盘GR敲低小鼠,共20只。Western blot检测胎盘GR敲低效果并分析胎盘组织学改变;对胎盘GR敲低小鼠进行孕期抑郁造模,比较GR敲低组抑郁孕鼠的仔鼠(KD)与GR非敲低组仔鼠(N-KD)生长发育情况;动物行为实验检测仔鼠运动能力和抑郁倾向。结果PND小鼠雌性仔鼠胎盘绒毛GR表达显著升高(P<0.05);胎盘GR敲低小鼠的胎盘GR表达显著降低(P<0.05);KD组仔鼠胎盘形态未见异常(P>0.05);KD组仔鼠生长发育未见异常(P>0.05);KD组仔鼠成年后运动能力未见异常(P>0.05);KD组雌性仔鼠在成年后更有抑郁倾向(P<0.05)。结论敲低胎盘GR可能增加孕期抑郁小鼠雌性子代抑郁倾向。
关键词
糖皮质激素受体
孕期抑郁
条件性敲低
转基因小鼠
Keywords
GR
perinatal depression
conditional gene knockdown
transgenic mice
分类号
R715.5 [医药卫生—妇产科学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
骨形成蛋白4条件性RNA干扰小鼠的建立
李福兵
杜晓兰
余瑛
赵玲
何启芬
陈林
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
胎盘糖皮质激素受体低表达对孕期抑郁模型雌性子代的影响
潘淑敏
曹雄
王志坚
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2022
0
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职称材料
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