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杞精明目汤药物血清对结膜松弛症患者球结膜成纤维细胞中基质金属蛋白酶表达的影响 被引量:7
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作者 项敏泓 李轶捷 +3 位作者 张兴儒 李青松 韩竹梅 张隆 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期940-943,共4页
背景 结膜松弛症患者球结膜成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的平衡失调,因此寻求一种药物以调节MMPs/TIMPs的平衡对于结膜松弛症的预防和治疗具有重要意义. 目的 研究杞精明目汤药物血清对体外培养... 背景 结膜松弛症患者球结膜成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的平衡失调,因此寻求一种药物以调节MMPs/TIMPs的平衡对于结膜松弛症的预防和治疗具有重要意义. 目的 研究杞精明目汤药物血清对体外培养的结膜松弛症患者球结膜成纤维细胞中MMPs和TIMPs表达的影响,探讨结膜松弛症的发病机制及杞精明目汤的作用. 方法 24只SD大鼠用杞精明目汤药物灌胃后3d收集腹主动脉血,制备含杞精明目汤药物的血清,以生理盐水灌胃的大鼠血清作为对照.收集接受结膜松弛症切除术患者的球结膜标本,用含质量分数10%胎牛血清的DMEM培养,分别将质量分数20%、15%、10%、5%的药物血清及8 ml/L表皮生长因子(EGF)加入细胞悬液中作用24 h,未加任何药物的结膜成纤维细胞组作为对照组.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测结膜成纤维细胞中MMP1、MMP3、TIMP1和TIMP3的表达(A值). 结果 培养的细胞呈长梭形,对波形蛋白表达呈阳性.不同质量分数药物血清作用后,人结膜成纤维细胞中MMP1的表达值明显下降,对照组、20%、15%、10%、5%药物血清组及EGF西药组结膜成纤维细胞中MMP1表达值的总体差异有统计学意义(F=466.664,P<0.05),其中10%药物血清组MMP1的质量浓度为(9.92±0.14) mg/L,20%药物血清组为(11.87±0.11)mg/L,均明显低于对照组的(16.31±0.10) mg/L,差异均有统计学意义(t=99.974、87.394,P<0.05);不同质量浓度药物血清组、EGF西药组和对照组问结膜成纤维细胞中MMP3表达值的总体差异有统计学意义(F=158.168,P<0.05),其中20%药物血清组MMP3质量浓度最低,为(3.50±0.03) mg/L,明显低于对照组的(4.44±0.11) mg/L,差异有统计学意义(t=21.991,P<0.05).不同质量浓度药物血清组、对照组和EGF西药组间结膜成纤维细胞中TIMP1的表达值差异有统计学意义(F=183.508,P<0.05),其中15%药物血清组TIMP1的表达量最低,为(1.88±0.06) mg/L,明显低于对照组的(3.20±0.32) mg/L,差异有统计学意义(t=10.353,P<0.05);不同质量浓度药物血清组、对照组和EGF西药组间结膜成纤维细胞中TIMP3的表达值差异有统计学意义(F=54.503,P<0.05),其中20%药物血清组结膜成纤维细胞中TIMP3的表达量为(1.74±0.06) mg/L,高于对照组的(1.54±0.05) mg/L,差异有统计学意义(t=5.046,P=0.004),而15%、10%、5%药物血清组结膜成纤维细胞中TIMP3的表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 用含有20%杞精明目汤药物血清的培养基培养人眼结膜松弛症患者的球结膜成纤维细胞可下调细胞中MMP1、MMP3和TIMP1的表达量,并显著上调TIMP3的表达量,从而对结膜松弛症起到预防及治疗作用. 展开更多
关键词 结膜松弛症 成纤维细胞 中医药 杞精明目汤 基质金属蛋白酶
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杞精明目汤颗粒剂对肿瘤坏死因子-α刺激下结膜松弛症成纤维细胞MAPK信号通路的影响 被引量:6
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作者 贾元玲 项敏泓 +4 位作者 文杭 李青松 詹月萍 黄丽 刘晓静 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第4期319-323,共5页
目的观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,杞精明目汤颗粒剂对结膜松弛症(conjunctivochalasis,CCH)结膜成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的影响,探讨CCH的发病机制及... 目的观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,杞精明目汤颗粒剂对结膜松弛症(conjunctivochalasis,CCH)结膜成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的影响,探讨CCH的发病机制及有效治疗策略。方法体外培养CCH结膜成纤维细胞,分为CCH组、CCH+TNF-α组及CCH+TNF-α+杞精明目汤组。CCK-8确定杞精明目汤颗粒剂有效浓度,用含10^(-2)mg·L^(-1)的TNF-α刺激培养的成纤维细胞,加入杞精明目汤颗粒剂干预48 h,分别采用ELISA、Western Blot和RT-PCR检测MAPK信号通路相关蛋白及mRNA的表达,并行统计学分析。结果 CCK-8确定杞精明目汤颗粒剂有效浓度为1.61 g·L^(-1)。三组MAPK信号通路相关分子细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)、c-jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase JNK)、p38 MAPK及其磷酸化水平的吸光度(A_(450))值总体差异均有统计学意义(均为P<0.05),且TNF-α可明显上调CCH表达ERK1/2、JNK1/2、p-JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK(均为P<0.05),而杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞表达ERK1/2、p-ERK1/2、JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK(均为P<0.05)。三组p-ERK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白总体差异均有统计学意义(均为P<0.05),且TNF-α可明显上调CCH成纤维细胞p-ERK1/2、p-JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白的表达(均为P<0.05),杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞表达p-ERK1/2、p38 MAPK(均为P<0.05)。三组ERK1/2、p38 MAPK mRNA表达总体差异均有统计学意义(均为P<0.05),且TNF-α可明显上调CCH成纤维细胞ERK1/2、p38 MAPK mRNA的表达(均为P<0.05),杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞p38 MAPK mRNA表达(P<0.05)。结论 TNF-α可上调CCH成纤维细胞MAPK信号通路的表达,导致CCH的发生发展,而杞精明目汤颗粒剂在一定程度上可下调MAPK信号通路的表达从而发挥治疗作用。 展开更多
关键词 结膜松弛症 成纤维细胞 肿瘤坏死因子α 丝裂原活化蛋白激酶 杞精明目汤颗粒剂
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