将杂优-2平菇菌丝进行液体培养,发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)-Sepharose fast flow层析和Superdex-200 prep grade层析等方法纯化,获得了电泳纯的杂优-2平菇漆酶,并对纯化的漆酶进行了部分酶学性质研究。结果显示,...将杂优-2平菇菌丝进行液体培养,发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)-Sepharose fast flow层析和Superdex-200 prep grade层析等方法纯化,获得了电泳纯的杂优-2平菇漆酶,并对纯化的漆酶进行了部分酶学性质研究。结果显示,杂优-2平菇漆酶比活力为115 U/mg,分子质量约为244.0 k D,亚基分子质量约为85.6 k D。最适反应p H值和最适反应温度分别为5.0和55℃,在p H 6.0~8.0及40~55℃范围内稳定性较好;最适条件下,以2,2’-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)为底物的Km值为2.1 mmol/L,最大反应速率(vmax)为0.117μmol/(min·L)。Fe^(2+)、抗坏血酸对该酶活性具有完全抑制作用,乙二胺四乙酸、Ag^+、Mg^(2+)、Li^+对该酶活性影响较小;草酸、甲醇、正丁醇、K^+、Ca^(2+)、Ba^(2+)、Zn^(2+)、Cd^(2+)、Pb^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)对该酶活性有不同程度的抑制作用;Cu^(2+)激活作用不明显;尿素、乙醇、异丙醇对该酶活性具有激活作用。展开更多
文摘将杂优-2平菇菌丝进行液体培养,发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)-Sepharose fast flow层析和Superdex-200 prep grade层析等方法纯化,获得了电泳纯的杂优-2平菇漆酶,并对纯化的漆酶进行了部分酶学性质研究。结果显示,杂优-2平菇漆酶比活力为115 U/mg,分子质量约为244.0 k D,亚基分子质量约为85.6 k D。最适反应p H值和最适反应温度分别为5.0和55℃,在p H 6.0~8.0及40~55℃范围内稳定性较好;最适条件下,以2,2’-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)为底物的Km值为2.1 mmol/L,最大反应速率(vmax)为0.117μmol/(min·L)。Fe^(2+)、抗坏血酸对该酶活性具有完全抑制作用,乙二胺四乙酸、Ag^+、Mg^(2+)、Li^+对该酶活性影响较小;草酸、甲醇、正丁醇、K^+、Ca^(2+)、Ba^(2+)、Zn^(2+)、Cd^(2+)、Pb^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)对该酶活性有不同程度的抑制作用;Cu^(2+)激活作用不明显;尿素、乙醇、异丙醇对该酶活性具有激活作用。
