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小反刍兽疫病毒非结构蛋白C单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 李菊 毕冬琳 +5 位作者 杨晓莉 杨东亮 张潇文 刘方程 李琼毅 柏家林 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1047-1054,共8页
为制备小反刍兽疫病毒(PPRV)非结构蛋白C单克隆抗体,根据PPRV C基因编码多肽链氨基酸序列抗原性分析,设计合成一条含20个氨基酸的抗原肽(CRSGKPRGETPGPLLPEIMQ)和一条含21个氨基酸的筛选抗原多肽(PLRAGERGLAPQAVQHRTLIK),将它们分别与... 为制备小反刍兽疫病毒(PPRV)非结构蛋白C单克隆抗体,根据PPRV C基因编码多肽链氨基酸序列抗原性分析,设计合成一条含20个氨基酸的抗原肽(CRSGKPRGETPGPLLPEIMQ)和一条含21个氨基酸的筛选抗原多肽(PLRAGERGLAPQAVQHRTLIK),将它们分别与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin, KLH)和生物素羧基蛋白(biotin carboxyl carrier protein, Biotin)交联,制备获得免疫原和筛选抗原。用免疫原肌肉注射5只8~12周龄、体重约20 g的无特定病原体(specific pathogen free, SPF)级BALB/c雌性小鼠,第1次免疫后分别间隔7 d进行第2次免疫和第3次免疫,三免后21 d进行冲击免疫,冲击免疫后第3天采集血液分离血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)测得1只免疫小鼠血清抗体效价为1∶312 500,2只为1∶62 500。取3只小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0经聚乙二醇(PEG)融合制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA筛选出26株阳性淋巴杂交瘤细胞,进一步经克隆化培养筛选出46株单克隆细胞株。通过Western blot(WB)筛选获得2株能稳定分泌特异性抗PPRV C蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,WB、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)鉴定显示,制备的单克隆抗体具有较好的灵敏性和病毒反应性。研究结果为进一步阐明C蛋白在PPRV生命周期中的作用奠定了基础,也为小反刍兽疫(PPR)诊断提供了有效的诊断试剂。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 非结构蛋白C 杂交瘤细胞技术 单克隆抗体
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血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究 被引量:1
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作者 钱江龙 郭秋萍 +2 位作者 张晶 玉慧贞 严和平 《单克隆抗体通讯》 CAS CSCD 1989年第4期37-38,共2页
本文报告应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了抗人血红蛋白单克隆抗体(Hb-McAb)。经实验证明,Hb—McAb局有特异性强,效价高、使用简便,安全等优点,可作为大肠癌早期诊断的初筛指标。
关键词 单克隆抗体 特性研究 制备 淋巴细胞杂交瘤技术 大肠癌早期诊断 人血红蛋白 McAb 特异性
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抗人ILT-4单克隆抗体制备及初步鉴定
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作者 王春艳 李德敏 +3 位作者 宋朝君 李娜 王东琳 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期238-239,共2页
目的:制备抗人ILT4分子单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备小鼠源性抗人ILT4 mAb。用间接ELISA法测定腹水mAb的效价。以Western blot测定mAb的抗原结合活性。通过流式细胞术(FCM)对mAb结合转染细胞表面... 目的:制备抗人ILT4分子单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备小鼠源性抗人ILT4 mAb。用间接ELISA法测定腹水mAb的效价。以Western blot测定mAb的抗原结合活性。通过流式细胞术(FCM)对mAb结合转染细胞表面及天然细胞表面ILT4分子的活性进行鉴定。结果:获得7株分泌抗ILT4 mAb的杂交瘤细胞株。ELISA法测定腹水mAb的效价均达1×10-6,7株mAb均为IgG1(κ)。Western blot结果显示,3株mAb与人ILT4有良好的结合活性。用转染细胞及U937细胞做FCM分析发现另外4株mAb可结合真核表达的及天然的ILT4分子。结论:获得7株能特异性识别ILT4分子的mAb,为研究ILT4分子的组织分布和功能研究提供了可靠的实验手段。 展开更多
关键词 ILT4 淋巴细胞杂交瘤技术 单克隆抗体
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抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的研制
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作者 段薇 张健 +2 位作者 郑剑玲 苏丹 王美慧 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期102-102,共1页
关键词 淋巴细胞杂交瘤技术 呼吸道合胞病毒 单克隆抗体 生物学活性
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鼻气管鸟杆菌单克隆抗体的防治效果 被引量:2
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作者 周花艳 王安妮 +4 位作者 黄亚奇 周淑婷 姜勇 魏若瑶 徐建生 《中国家禽》 北大核心 2019年第11期58-61,共4页
利用单克隆制备技术制备了两株稳定分泌针对鼻气管鸟杆菌外膜蛋白OMA87的单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并对其进行株特异性鉴定、效价鉴定、Western-blot、中和试验及防治效果鉴定,选择其中2株高沉淀效价及中和效价的单克隆抗体(2C4和5G9)... 利用单克隆制备技术制备了两株稳定分泌针对鼻气管鸟杆菌外膜蛋白OMA87的单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并对其进行株特异性鉴定、效价鉴定、Western-blot、中和试验及防治效果鉴定,选择其中2株高沉淀效价及中和效价的单克隆抗体(2C4和5G9)进行了鼻气管鸟杆菌引起的呼吸道疾病防治试验,抗体治愈率分别达到95%和80%,具有良好的防治效果,在临床应用上具有较高的实用价值。 展开更多
关键词 鼻气管鸟杆菌 淋巴细胞杂交瘤技术 单克隆抗体 存活率
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评单克隆抗体
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作者 谢蜀生 《医学与哲学(A)》 1983年第1期11-13,55,共4页
淋巴细胞杂交瘤技术,是近年来生物科学领域内的一项具有突破性的新技术。它是细胞水平的遗传工程,技术上的要求比基因工程相对少得多,而其产生的单克隆抗体,在生物学、医学领域内具有广泛的使用潜力,因此对单克隆抗体的研究正成为生物... 淋巴细胞杂交瘤技术,是近年来生物科学领域内的一项具有突破性的新技术。它是细胞水平的遗传工程,技术上的要求比基因工程相对少得多,而其产生的单克隆抗体,在生物学、医学领域内具有广泛的使用潜力,因此对单克隆抗体的研究正成为生物学与医学领域中一个非常热门的课题。本文拟对淋巴细胞杂交瘤技术的建立、单克隆抗体的应用及其存在的问题作一简单的评论,以求救于国内同道。 展开更多
关键词 单克隆抗体 淋巴细胞杂交瘤技术 免疫学家
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鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究
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作者 崔利兵 张志飞 +7 位作者 石晓娜 许榜丰 闫大为 滕巧泱 刘芹防 李泽君 焦培荣 苑纯秀 《中国动物传染病学报》 2025年第4期177-183,共7页
为了制备识别鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白的单克隆抗体,本研究以ILTV作为免疫原,采用杂交瘤技术制备融合细胞,再用酶联免疫吸附(ELISA)与间接免疫荧光(IFA)技术筛选能分泌特异性识别ILTV gD蛋白抗体的杂交瘤细胞,并对所分泌的单... 为了制备识别鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白的单克隆抗体,本研究以ILTV作为免疫原,采用杂交瘤技术制备融合细胞,再用酶联免疫吸附(ELISA)与间接免疫荧光(IFA)技术筛选能分泌特异性识别ILTV gD蛋白抗体的杂交瘤细胞,并对所分泌的单克隆抗体进行特性研究。间接ELISA与IFA试验结果表明,本研究成功筛选到2株能分泌识别ILTV gD蛋白的杂交瘤细胞。细胞微量中和试验结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体均能中和ILTV。抗体亚型鉴定均为IgG1,轻链为κ链。ILTV gD蛋白单克隆抗体的制备与特性研究为ILTV gD中和表位的筛选与ILTV血清抗体检测方法的建立提供了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 杂交瘤细胞技术 单克隆抗体 gD蛋白
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