河川沙塘鳢病原杀鲑气单胞菌致病性及感染后宿主免疫相关基因差异表达分析

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作者 李杰 刘国兴 +6 位作者 钱且奇 朱玉洁 陈圳 姜群 王骏 张晓君 高晓建 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2024年第1期45-56,共12页

为探明2021年3月常熟某养殖场河川沙塘鳢(Odontobutis potamophilus)疾病暴发的原因,本研究从患病鱼体内分离到优势菌株,通过形态观察、理化特性测定及gyrB基因同源性分析鉴定优势菌,同时通过人工感染试验、组织病理观察、毒力因子及毒... 为探明2021年3月常熟某养殖场河川沙塘鳢(Odontobutis potamophilus)疾病暴发的原因,本研究从患病鱼体内分离到优势菌株,通过形态观察、理化特性测定及gyrB基因同源性分析鉴定优势菌,同时通过人工感染试验、组织病理观察、毒力因子及毒力基因检测确定其致病性,并测定分离菌的耐药性和感染后河川沙塘鳢免疫相关基因表达变化。结果显示:引起河川沙塘鳢大量死亡的病原菌为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)。代表菌株G2-4-1对河川沙塘鳢的LD 50为1.8×106 CFU/mL;该病原菌感染可引起河川沙塘鳢肝脏、脾脏、肾脏和鳃组织出现明显的变性、坏死和炎性细胞浸润;该菌株携带aer、hly、exu等毒力基因,且具有蛋白酶、卵磷脂酶、淀粉酶、脂酶、明胶酶和溶血素活性,但不具有DNA酶活性;耐药性分析发现,分离菌G2-4-1对青霉素G、氨苄西林、苯唑西林等8种药物耐药,对克拉霉素和大观霉素2种药物中介,对恩诺沙星、氟苯尼考等24类药物敏感;免疫相关基因表达分析显示,在感染初期MHCⅡB、MyD88、TLR和SOD在鳃、脾脏和肾脏组织中都显著上调表达。 展开更多

关键词 河川沙塘鳢(Odontobutis potamophilus) 杀鲑气单胞菌(aeromonas salmonicida) 致病性 组织病理 免疫相关基因

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一例草鱼源杀鲑气单胞菌的检测分析

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作者 王惠 鲍胜华 +1 位作者 任慧梅 周阳 《科学养鱼》 2024年第3期61-62,共2页

2023年4月,大丰某草鱼养殖场暴发病情,草鱼出现了死亡现象,个体长度25厘米左右,部分濒死草鱼出现眼球突出、体表溃烂、鳍条基部充血等症状。从濒死的草鱼肝脏和肾脏中分离纯化获得一株优势菌株,并利用生理生化和分子生物学方法对该优势... 2023年4月,大丰某草鱼养殖场暴发病情,草鱼出现了死亡现象,个体长度25厘米左右,部分濒死草鱼出现眼球突出、体表溃烂、鳍条基部充血等症状。从濒死的草鱼肝脏和肾脏中分离纯化获得一株优势菌株,并利用生理生化和分子生物学方法对该优势菌进行鉴定分析和药敏试验,旨在为养殖生产中草鱼的疾病防治提供参考依据。 展开更多

关键词 鳍条基部 眼球突出 杀鲑气单胞菌 死亡现象 草鱼养殖 药敏试验 分子生物学方法 疾病防治

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大西洋鲑杀鲑气单胞菌的分离鉴定 被引量：20

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作者 曹成易 汪开毓 +1 位作者 王玲 黄小丽 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2009年第1期54-57,共4页

从皮肤溃烂的大西洋鲑(Salmon salar)肌肉、肝、肾分离到一致病性的菌株(AB080226),经人工感染实验证实其为该病的病原菌,研究了该菌的形态、生理生化特征并对其16SrDNA序列进行了在线Classifer和Blast分析。结果显示:该菌为革兰氏阴性... 从皮肤溃烂的大西洋鲑(Salmon salar)肌肉、肝、肾分离到一致病性的菌株(AB080226),经人工感染实验证实其为该病的病原菌,研究了该菌的形态、生理生化特征并对其16SrDNA序列进行了在线Classifer和Blast分析。结果显示:该菌为革兰氏阴性杆菌,葡萄糖氧化发酵阳性,氧化酶检测阳性,0%NaCl生长;能利用甘露醇,不具运动性,能发酵麦芽糖,葡萄糖产酸阳性,精氨酸双水解酶阳性,苯丙氨酸脱氨酶阴性;该菌属于气单胞菌属的细菌,在系统发育树上与杀鲑气单胞菌形成一个簇群,同源性高达99.9%以上。综合形态学、生理生化特征及16SrDNA序列鉴定其为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌(aeromonas salmonicida) 体表溃疡病 大西洋鲑(Salmon salar)

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患病细鳞鱼杀鲑气单胞菌的分离与鉴定 被引量：13

4

作者 刘宁 时晓 +3 位作者 杜迎春 周杰珑 刘建宏 何宏轩 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2015年第1期88-92,共5页

从患病细鳞鱼(Brachymystax lenok)的病变组织处分离到1株致病菌,经过分离培养,生化鉴定,16 S rRNA序列分析和人工感染实验确定该病原菌为杀鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp.achromogenes)。采用20种药物进行药敏分析,... 从患病细鳞鱼(Brachymystax lenok)的病变组织处分离到1株致病菌,经过分离培养,生化鉴定,16 S rRNA序列分析和人工感染实验确定该病原菌为杀鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp.achromogenes)。采用20种药物进行药敏分析,结果显示:分离菌株对阿米卡星、哌拉西林、恩诺沙星等9种抗生素敏感;对环丙沙星、诺氟沙星等4种抗生素中度敏感;对卡那霉素、青霉素、氨苄西林等7种抗生素耐药。 展开更多

关键词 细鳞鱼(Brachymystax lenok) 杀鲑气单胞菌(aeromonas salmonicida) 分离 鉴定

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半滑舌鳎溃疡病原杀鲑气单胞菌的分离鉴定与药敏试验 被引量：8

5

作者 周红霞 姚俊杰 +5 位作者 房文红 李新苍 赵姝 王元 吴俣学 周俊芳 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2017年第3期322-330,共9页

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)是广受我国消费者认可的名优鱼类,具有很高的营养价值和经济价值,然而,随着工厂化养殖模式的不断发展,疾病成为制约半滑舌鳎养殖业健康发展的关键因素,其中,体表溃疡病为其常见病症。从... 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)是广受我国消费者认可的名优鱼类,具有很高的营养价值和经济价值,然而,随着工厂化养殖模式的不断发展,疾病成为制约半滑舌鳎养殖业健康发展的关键因素,其中,体表溃疡病为其常见病症。从严重溃疡病半滑舌鳎体内分离到1株优势菌株HX0416,该菌可在TCBS培养基上生长,并可在绵羊血平板上形成清晰的β-溶血环;经过16S rRNA和rpo D基因序列同源性分析并结合生化特性鉴定为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)。健康半滑舌鳎幼鱼感染试验表明,该菌对半滑舌鳎具有较强致病性,感染72 h(1.04×106cfu·m L-1)对攻毒鱼的致死率达91.7%。药敏试验结果显示,该菌对环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星等喹诺酮类和头孢曲松、头孢吡肟等头孢菌素类药物比较敏感,而对硫酸新霉素、土霉素等氨基糖苷类和四环素类药物多重耐药,尤其是对磺胺甲噁唑、氨苄西林等磺胺类和β-内酰胺类药物严重耐药。 展开更多

关键词 半滑舌鳎 杀鲑气单胞菌 溃疡病 生化特征 药敏试验

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虹鳟杀鲑气单胞菌耐药性研究与盐酸多西环素给药方案制定 被引量：1

6

作者 刘博 张培 +4 位作者 彭嘉琪 程波 赵雅贤 穆迎春 孙慧武 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2023年第6期69-79,共11页

为科学制定虹鳟(Oncorhynchus mykiss)杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)病的给药方案,对3株分离自虹鳟的杀鲑气单胞菌采用纸片扩散法(K-B法)进行24种抗生素耐药性测定,并对其中4种敏感且批准使用的抗生素进行体外药效学实验,研究20... 为科学制定虹鳟(Oncorhynchus mykiss)杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)病的给药方案,对3株分离自虹鳟的杀鲑气单胞菌采用纸片扩散法(K-B法)进行24种抗生素耐药性测定,并对其中4种敏感且批准使用的抗生素进行体外药效学实验,研究20、30、40和60 mg/kg盐酸多西环素在染病虹鳟体内的药代动力学特征。结果显示:3株杀鲑气单胞菌对复方新诺明、磺胺异恶唑、青霉素、阿莫西林、头孢唑林耐药,对盐酸多西环素最敏感,其最小抑菌浓度(MIC)为0.5μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)在2~4μg/mL之间,防耐药突变浓度(MPC)为1μg/mL;恩诺沙星的MIC在0.25~1μg/mL之间,MBC为4μg/mL,MPC为1.5μg/mL;氟苯尼考的MIC为1μg/mL,MBC为8μg/mL,MPC为2μg/mL;硫酸新霉素MIC为4μg/mL,MBC为8μg/mL,MPC为12μg/mL。40 mg/kg剂量单次给药,盐酸多西环素在患病虹鳟血浆中的峰浓度为1.19μg/mL,达峰时间为4 h,且血药浓度维持在MIC以上16 h,可以满足虹鳟杀鲑气单胞菌病治疗需要。60 mg/kg剂量单次给药,盐酸多西环素在患病虹鳟血浆、肌肉、肾脏和肝脏中药物浓度维持在MIC以上的时间分别为23、18、23.5和23.5 h,在患病虹鳟血浆、肾脏和肝脏中药物浓度维持在MPC之上的时间分别为6、23.5和23.5 h,此使用剂量既能达到虹鳟杀鲑气单胞菌治疗作用,又能有效防止产生耐药性。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌(aeromonas salmonicida) 虹鳟(Oncorhynchus mykiss) 耐药 盐酸多西环素 给药方案

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鲤鱼杀鲑气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：19

7

作者 王海娟 王利 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第1期192-196,共5页

为探究鲤鱼病原菌的生物学特性及耐药状况,从患病鲤鱼中分离到菌株CS126,对其进行形态学观察、生理生化性质测定、16SrDNA序列分析及药敏性测定。结果显示,菌株CS126为革兰氏阴性菌,不产生吲哚、不具有动力性,分解半乳糖、甘露醇,VP试... 为探究鲤鱼病原菌的生物学特性及耐药状况,从患病鲤鱼中分离到菌株CS126,对其进行形态学观察、生理生化性质测定、16SrDNA序列分析及药敏性测定。结果显示,菌株CS126为革兰氏阴性菌,不产生吲哚、不具有动力性,分解半乳糖、甘露醇,VP试验、赖氨酸脱羧酶、氧化酶阴性,七叶苷阳性。16SrDNA序列长度为1 459bp,GenBank登录号为KJ942580,与GenBank中杀鲑气单胞菌的相似性高达100%,进化树显示与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种聚为一分支。这表明菌株CS126为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种。该菌株对菌必治、诺氟沙星、氟苯尼考等8种药物高度敏感,但对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、甲氧卞胺嘧啶和磺胺异恶唑等耐药。本试验结果为鱼类杀鲑气单胞菌的快速鉴定及鱼类疾病诊治提供参考依据。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌 16SrDNA 药敏试验 鲤鱼

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杀鲑气单胞菌的实时定量PCR检测方法的建立和应用 被引量：5

8

作者 刘宗晓 刘荭 +6 位作者 史秀杰 高隆英 岳志芹 吕建强 何俊强 江育林 谢从新 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2008年第5期83-88,共6页

选取杀鲑气单胞菌A层A蛋白(VapA)保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针。以ATCC标准株10倍系列稀释,通过血球计数板计数后进行实时定量PCR,制作标准曲线。通过SDS软件获得细菌数量(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.1574lgX+43.68... 选取杀鲑气单胞菌A层A蛋白(VapA)保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针。以ATCC标准株10倍系列稀释,通过血球计数板计数后进行实时定量PCR,制作标准曲线。通过SDS软件获得细菌数量(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.1574lgX+43.6841(相关系数R2=0.992)。实时定量PCR的检测限为6个细菌。建立的方法对杀鲑气单胞菌典型株和非典型株具有较好的特异性,与其他细菌没有交叉反应。杀鲑气单胞菌实时定量PCR方法的建立,对于快速口岸检疫、临床诊断和疫病监测具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌 实时定量PCR TAQMAN探针

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杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种胞外产物毒性及免疫原性分析 被引量：4

9

作者 杨嘉龙 周丽 战文斌 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期20-24,共5页

用玻璃纸平板法提取了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种Aeromonassal monicida masoucida的胞外产物(ECP)。毒性试验证实,ECP对剑尾鱼Xiphophorus helleri具有致死性,其半致死量(LD50)为4.72μg蛋白/g体重。SDS-PAGE表明,ECP由13条蛋白带组成... 用玻璃纸平板法提取了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种Aeromonassal monicida masoucida的胞外产物(ECP)。毒性试验证实,ECP对剑尾鱼Xiphophorus helleri具有致死性,其半致死量(LD50)为4.72μg蛋白/g体重。SDS-PAGE表明,ECP由13条蛋白带组成。利用大鼠抗ECP血清进行的Western-blot印迹显示,组成ECP的13条蛋白带中有7条具有免疫原性,能够引发机体的免疫应答反应产生抗体,其分子量分别为88、70、42、39、36、22和15kDa。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种 胞外产物 毒性 免疫原性

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杀鲑气单胞菌的快速检测 被引量：5

10

作者 童裳亮 王作芸 周建玲 《动物检疫》 1993年第5期7-8,共2页

杀蛙气单胞菌引起的鱼类疖疮病是进口动物检疫对象。该菌只能在疾病流行期从病鱼体内分离。在水和鱼卵中虽有此菌，也无法用常规细菌分离和培养法进行分离和鉴定。用ELISA技术快速检测水样中的该菌获得成功，为进口虹鳟鱼卵时检测该菌... 杀蛙气单胞菌引起的鱼类疖疮病是进口动物检疫对象。该菌只能在疾病流行期从病鱼体内分离。在水和鱼卵中虽有此菌，也无法用常规细菌分离和培养法进行分离和鉴定。用ELISA技术快速检测水样中的该菌获得成功，为进口虹鳟鱼卵时检测该菌提供了方法。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌 检测 检疫

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宽体金线蛭杀鲑气单胞菌的药物敏感性试验 被引量：1

11

作者 唐毅 袁渊 +2 位作者 王伟 刘炀 李红 《科学养鱼》 2020年第4期45-47,共3页

随着国内外制药公司以及临床医学等方面对宽体金线蛭需求的增加,其市场价格居高不下,在此背景下其人工养殖在国内一些地方迅速兴起,养殖的规模和集约化程度也逐年提高。但与此同时,多种疾病尤其是细菌性疾病的发生对宽体金线蛭的人工养... 随着国内外制药公司以及临床医学等方面对宽体金线蛭需求的增加,其市场价格居高不下,在此背景下其人工养殖在国内一些地方迅速兴起,养殖的规模和集约化程度也逐年提高。但与此同时,多种疾病尤其是细菌性疾病的发生对宽体金线蛭的人工养殖产生了较大影响。本试验采用12种常用渔药对从宽体金线蛭患病个体病灶分离鉴定的致病菌——杀鲑气单胞菌进行药敏试验,测定其体外抑菌效果,旨在为因杀鲑气单胞菌感染而导致的宽体金线蛭细菌性疾病的有效防治提供一定的科学依据。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌 细菌性疾病 宽体金线蛭 药物敏感性试验 人工养殖 药敏试验 体外抑菌效果 制药公司

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乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌群体感应及腐败活性的抑制作用 被引量：7

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作者 刘佳宜 李婷婷 +5 位作者 励建荣 谢晶 林洪 王轰 申照华 郭晓华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第17期27-33,共7页

本研究利用群体感应报告菌株紫色杆菌(Chromobacterium violaceum)026鉴定乙基麦芽酚的抗群体感应活性,通过气相色谱-质谱定量检测分析乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonida)分泌信号分子的影响。添加外源信号分子,以生物被膜... 本研究利用群体感应报告菌株紫色杆菌(Chromobacterium violaceum)026鉴定乙基麦芽酚的抗群体感应活性,通过气相色谱-质谱定量检测分析乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonida)分泌信号分子的影响。添加外源信号分子,以生物被膜形成量、胞外蛋白酶活力、细菌运动性(群集和泳动迁移直径)为指标,分析乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌群体感应及腐败活性的抑制作用。结果表明:乙基麦芽酚对紫色杆菌026以及杀鲑气单胞菌的最小抑菌浓度为0.1 mg/mL,在亚抑菌浓度下,乙基麦芽酚可降低紫色杆菌026产紫色杆菌素的能力;气相色谱-质谱定量检测结果显示,乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌所产群体感应信号分子C12-高丝氨酸内酯的分泌具有明显的抑制作用;且0.08 mg/mL乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌生物被膜形成、胞外蛋白酶活力和细菌运动性(群集和泳动)的抑制率分别为71.2%、69.1%、80.4%和82.1%,且抑制作用具有浓度依赖性。由此可见,乙基麦芽酚对杀鲑气单胞菌具有较强的群体感应抑制效果,有望作为群体感应抑制剂用于水产品保鲜。 展开更多

关键词 乙基麦芽酚 杀鲑气单胞菌 群体感应 抑制剂

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绿鳍马面鲀与许氏平鲉杀鲑气单胞菌病原的分离和鉴定 被引量：2

13

作者 晋怀远 刘耀宽 +5 位作者 高晔 夏苏东 陈四清 莫照兰 边力 李杰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第1期191-200,共10页

2018年和2019年,山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡,主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌,分别命名... 2018年和2019年,山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡,主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌,分别命名为2018TS-1和2019SS-1,分离菌株经16S rRNA测序、生理生化鉴定和vap A基因分析确定为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp. masoucida)。人工感染结果显示,2018TS-1和2019SS-1分别能引起绿鳍马面鲀和许氏平鲉的死亡,被感染鱼呈嘴部红肿症状,与自然发病症状一致,其半数致死量分别为1.78×10^(5)和0.89×10^(5) CFU/尾。本研究首次报道了国内工厂化养殖绿鳍马面鲀和许氏平鲉感染杀鲑气单胞菌的病例,是目前人工养殖绿鳍马面鲀的首个疾病报道,也是继大西洋鲑(Salmo salar)、大菱鲆(Scophthalmus maximus)和裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)等品种后,在山东省海水养殖鱼类中再次发现杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染。本研究结果丰富了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染宿主范围,也为绿鳍马面鲀和许氏平鲉养殖的病害防控提供依据。 展开更多

关键词 绿鳍马面鲀 许氏平鲉 细菌鉴定 杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种

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脱氢乙酸钠对杀鲑气单胞菌群体感应现象的抑制 被引量：3

14

作者 王俊淇 李婷婷 +3 位作者 刘佳宜 谢晶 林洪 励建荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期69-75,共7页

利用报告菌株紫色杆菌(Chromobacterium violaceum 026,CV026)来研究脱氢乙酸钠的群体感应抑制作用,并进一步研究其对杀鲑气单胞菌的群体感应作用效果。结果表明:当脱氢乙酸钠质量浓度为2 mg/mL时,CV026的生长不会受到抑制,且在亚抑菌... 利用报告菌株紫色杆菌(Chromobacterium violaceum 026,CV026)来研究脱氢乙酸钠的群体感应抑制作用,并进一步研究其对杀鲑气单胞菌的群体感应作用效果。结果表明:当脱氢乙酸钠质量浓度为2 mg/mL时,CV026的生长不会受到抑制,且在亚抑菌浓度条件下,脱氢乙酸钠可显著降低报告菌株CV026产生紫色杆菌素的能力;当脱氢乙酸钠质量浓度为1.6 mg/mL时,紫色菌素的产量下降63.39%。通过酶标法可以明显看出脱氢乙酸钠使杀鲑气单胞菌生物被膜的形成量降低,进一步利用扫描电镜观察,生物被膜相对形成率仅为31.78%;通过其他的群体感应现象如:群集和泳动能力分别下降了82.76%和73.41%,胞外蛋白酶活性下降了14.56%,进一步验证了脱氢乙酸钠的群体感应抑制活性,且呈现浓度依赖性。同时,通过气相色谱-质谱联用的检测证实了脱氢乙酸钠对杀鲑气单胞菌信号分子的产生具有抑制作用。由此可知,脱氢乙酸钠具有群体感应抑制性,能够作为新型的群体感应抑制剂。 展开更多

关键词 脱氢乙酸钠 群体感应 群体感应抑制剂 抑制效果 杀鲑气单胞菌

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一株山羊源杀鲑气单胞菌的分离、鉴定及药物敏感性检测 被引量：3

15

作者 王博 闫展燕 +4 位作者 孔令聪 贾博岩 魏星 刘树明 马红霞 《中国兽药杂志》 2018年第4期1-6,共6页

对患呼吸系统疾病的病羊进行病原的分离,并对分离菌进行形态观察、致病性试验、16Sr DNA基因序列的测定及药敏试验。结果显示,分离菌对健康Balb/c小鼠具有较强的致病性,其引发小鼠的病理变化与临床剖检患病山羊的病理变化相同,均为急性... 对患呼吸系统疾病的病羊进行病原的分离,并对分离菌进行形态观察、致病性试验、16Sr DNA基因序列的测定及药敏试验。结果显示,分离菌对健康Balb/c小鼠具有较强的致病性,其引发小鼠的病理变化与临床剖检患病山羊的病理变化相同,均为急性间质性肺炎。16Sr DNA基因序列测定结果表明其与杀鲑气单胞菌的16Sr DNA基因序列一致性为98%,该菌株仅对头孢噻肟、强力霉素等药物敏感,对氧氟沙星、氟苯尼考、庆大霉素、环丙沙星、恩诺沙星、丁胺卡那霉素、大观霉素、诺氟沙星、克林霉素、氨苄西林、阿莫西林等临床常用药物均呈不同程度的耐药性。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌 分离鉴定 耐药性

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杀鲑气单胞菌杀鲑亚种和杀日本鲑亚种PCR检测方法的建立 被引量：1

16

作者 刘静静 李贵阳 +3 位作者 晋怀远 高晔 王会林 李杰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第4期223-233,共11页

杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)是一种重要的鱼类致病菌,可以感染多种海淡水鱼类。杀鲑气单胞菌包括5个亚种,目前常用的生理生化特征和16S rDNA序列分析方法很难实现亚种的快速精确区分。为实现杀鲑气单胞菌亚种的快速鉴定和检测... 杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)是一种重要的鱼类致病菌,可以感染多种海淡水鱼类。杀鲑气单胞菌包括5个亚种,目前常用的生理生化特征和16S rDNA序列分析方法很难实现亚种的快速精确区分。为实现杀鲑气单胞菌亚种的快速鉴定和检测,针对我国常见的杀鲑气单胞菌杀鲑亚种(A.salmonicida subsp.salmonicida)和杀日本鲑亚种(A.salmonicida subsp.masoucida),本研究开发了其特异性的PCR检测方法。根据Gene Bank已公布的杀鲑气单胞菌基因组信息,选择杀鲑亚种phoB基因和杀日本鲑亚种LOC111476736基因作为目标基因,根据其序列设计特异性引物,进一步对PCR反应的退火温度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg^(2+)浓度和酶浓度5个方面进行了优化,并测试了该方法的特异性、敏感性和应用效果。结果显示,2对引物分别可以扩增出杀鲑气单胞菌杀鲑亚种522 bp的phoB特异性基因片段和杀日本鲑亚种515 bp的LOC111476736特异性基因片段。杀鲑亚种特异性引物最适退火温度为64℃,10μmol/L引物、2 mmol/L dNTPs、25 mmol/L MgSO4和1 U/μL KOD酶的最适添加量分别为1.5、2、1.5和0.5μL。杀日本鲑亚种特异性引物最适退火温度为64℃,10μmol/L引物、2 mmol/L dNTPs、25 mmol/L MgSO4和1 U/μL KOD酶的最适添加量分别为0.75、1、1.5和0.5μL。以鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)、杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)、杀鲑气单胞菌其他亚种等14种其他水产病原菌或常见环境菌为模板进行PCR检测,均无特异性条带。该方法对杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的检测灵敏度为12.8 CFU/反应(菌体)或17.6 fg/反应(DNA),对杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的检测灵敏度为23.8 CFU/反应(菌体)或27.2 fg/反应(DNA)。利用杀鲑气单胞菌杀鲑亚种和杀日本鲑亚种分别对大菱鲆(Scophthalmus maximus)进行人工感染实验,感染后取病鱼组织进行PCR检测,结果显示,本方法可以从感染后的大菱鲆中分别检测到相应病原。综上所述,本研究建立了杀鲑气单胞菌杀鲑亚种和杀日本鲑亚种的特异性PCR检测方法,该检测方法为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种和杀日本鲑亚种的流行病调查和快速诊断提供了支撑。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌杀鲑亚种 杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种 PCR 检测

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1,10癸二醇对杀鲑气单胞菌群体感应的抑制作用 被引量：5

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作者 牛慧超 李婷婷 +8 位作者 刘景云 孙晓佳 励建荣 谢晶 牟伟丽 沈琳 劳敏军 郭晓华 邓尚贵 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第4期65-70,共6页

本研究以1,10-癸二醇(1,10-decanediol)为研究对象,通过紫色杆菌CV026特征性紫色菌素的产生对1,10-癸二醇的抗群体感应活性进行验证,并在亚抑菌浓度条件下探究1,10-癸二醇对杀鲑气单胞菌群体感应现象及腐败特性的抑制作用。研究结果表明... 本研究以1,10-癸二醇(1,10-decanediol)为研究对象,通过紫色杆菌CV026特征性紫色菌素的产生对1,10-癸二醇的抗群体感应活性进行验证,并在亚抑菌浓度条件下探究1,10-癸二醇对杀鲑气单胞菌群体感应现象及腐败特性的抑制作用。研究结果表明,1,10-癸二醇对杀鲑气单胞菌的胞外蛋白酶活性、群集与泳动能力和生物被膜形成等相关腐败特性均具有较强的抑制作用,而且其抑制效果呈浓度依赖性增强。当1,10-癸二醇的质量浓度为0.4 mg/mL时,杀鲑气单胞菌的胞外蛋白酶活性明显减弱,运动能力也变得很弱,生物被膜的形成率降低了76.92%;通过扫描电镜观察生物被膜形态,发现随着1,10-癸二醇溶液浓度增大,生物被膜表面形成的裂缝会逐渐变多,直至完全龟裂,最终会使生物被膜的面积减小。由此可见,1,10-癸二醇具有较好的群体感应抑制效果,可以作为新型的群体感应抑制剂用于水产品保鲜。 展开更多

关键词 1 10-癸二醇 杀鲑气单胞菌 群体感应 抑制作用

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虹鳟致病性杀鲑气单胞菌的分离鉴定及其毒力因子的检测 被引量：17

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作者 刁菁 李乐 +6 位作者 王晓璐 樊英 于晓清 许拉 盖春蕾 王勇强 叶海斌 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期435-443,共9页

为研究虹鳟Oncorhynchus mykiss致病性杀鲑气单胞菌Aeromonas salmonicida的致病机理,利用微生物学及分子生物学方法,从患皮肤溃疡病的虹鳟病灶处分离纯化获得1株优势菌株RBWF-1,通过人工感染试验证实其具有较强的致病性。结果表明:菌株... 为研究虹鳟Oncorhynchus mykiss致病性杀鲑气单胞菌Aeromonas salmonicida的致病机理,利用微生物学及分子生物学方法,从患皮肤溃疡病的虹鳟病灶处分离纯化获得1株优势菌株RBWF-1,通过人工感染试验证实其具有较强的致病性。结果表明:菌株RBWF-1对虹鳟的半致死浓度(LD50)为5.5×10~6CFU/m L;通过对菌株RBWF-1 16S r DNA基因序列扩增、测序及Blast对比,发现其与杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种Asalmonicida subsp.masoucida菌株NBRC 13748及无色亚种A.salmonicida subsp.achromogens菌株NCIMB 1110的16S rDNA基因序列同源性最高,一致性均为99.6%;构建系统发育树显示,菌株RBWF-1与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种A.salmonicida subsp.salmonicida、杀日本鲑亚种、无色亚种和史氏亚种A.salmonicida subsp.smithia聚为一支;为进一步明确菌株的分类地位,利用Biolog微生物鉴定系统结合传统生理生化试验对菌株RBWF-1各项理化指标进行检测,经对比,与杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种吻合度最高,因而判断该分离株为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种;同时,对分离菌株的气溶素、溶血素、封闭带毒素、DNA酶、丝氨酸蛋白酶、磷脂酶、S层蛋白7个毒力相关基因进行了PCR检测,检测结果均呈阳性;酶活性检测结果显示,菌株RBWF-1胞外产物具有蛋白酶、淀粉酶、脂酶、DNA酶和溶血活性。本研究结果可为中国虹鳟养殖过程中杀鲑气单胞菌的感染特征、分类鉴定和疫苗研制提供必要的数据和参考。 展开更多

关键词 虹鳟 杀鲑气单胞菌 致病性 毒力因子 胞外产物

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一株新型杀鲑气单胞菌烈性类T4噬菌体Asfd-1的分离鉴定和生物学特性分析 被引量：1

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作者 周燕 袁盛建 +1 位作者 严庭玮 马迎飞 《集成技术》 2019年第3期10-18,共9页

噬菌体是自然界中最普遍的生物之一,其专一性裂解细菌的能力在针对耐药菌感染治疗方面具有很大的应用前景。杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicide)是水产养殖业中一种主要病原菌,其引发的疖疮病是一种常见的水产养殖动物疾病,具有高死亡... 噬菌体是自然界中最普遍的生物之一,其专一性裂解细菌的能力在针对耐药菌感染治疗方面具有很大的应用前景。杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicide)是水产养殖业中一种主要病原菌,其引发的疖疮病是一种常见的水产养殖动物疾病,具有高死亡率和高发病率,一旦爆发,将给水产养殖业带来重大的经济损失。该研究以杀鲑气单胞菌MF663675.1为宿主菌,从深圳海鲜市场的污水中,采用双层琼脂平板法分离纯化得到单个噬菌体,通过电镜对其表观形态特征进行观察,并运用生物信息的方法进一步确定其基因型特征及遗传分类地位。研究结果表明,分离出的烈性噬菌体命名为Asfd-1,噬菌斑呈圆形,轮廓分明、透明,直径约1mm。电镜观察显示,Asfd-1具有对称的二十面体头部,以及长度为51 nm的收缩尾部。基因组测序和基因对比分析表明,Asfd-1含双链脱氧核糖核酸(dsDNA),全基因组大小为168 962 bp,鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)所占的比例为41.53%,共编码263个开放阅读框和16个转移核糖核酸(tRNA)序列,Genbank登录号为MK577502。根据国际病毒分类委员会规定的病毒分类方法,与同源的Aeromonas phage 31 GCA_000862645.1和Aeromonas phiSA4GCA_002710125.1全基因组对比结果显示,Asfd-1是新型噬菌体。综合电镜观察结果及系统进化树分析,Asfd-1属于肌尾科下的T4噬菌体属、肌尾噬菌体科、有尾噬菌体目的新成员。该研究可为应用噬菌体治疗细菌感染提供进一步的参考。 展开更多

关键词 Asfd-1噬菌体 杀鲑气单胞菌 噬菌体治疗 生物信息

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杀鲑气单胞菌可视化重组酶聚合酶扩增检测技术的建立 被引量：1

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作者 谷庆花 李铭远 +1 位作者 司鑫鑫 高嵩 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2022年第1期52-57,共6页

本研究根据杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的铁载受体(fstA)基因的保守序列设计特异性引物和探针,建立了一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与侧向流试纸条(lateral flow strips,LFS)相结合的... 本研究根据杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的铁载受体(fstA)基因的保守序列设计特异性引物和探针,建立了一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与侧向流试纸条(lateral flow strips,LFS)相结合的可视化快速检测杀鲑气单胞菌的方法。结果显示:本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法在37℃孵育25 min即可完成,特异性良好,与其他致病菌无交叉反应;灵敏度实验结果显示,该菌的纯培养物和人工污染的鲤鱼组织中的最低检测限均为单次反应1 CFU(colony forming unit)。本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,检测结果可通过肉眼直接观察,操作简单,不依赖昂贵的仪器设备,适用于养殖业中杀鲑气单胞菌的现场检测。 展开更多

关键词 杀鲑气单胞菌(aeromonas salmonicida) 重组酶聚合酶扩增 侧向流试纸条 现场检测

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