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抗杀香鱼假单胞菌溶血素共调节蛋白单链抗体的制备及特性分析被引量：1: 1; 作者陈韵施慧 +2 位作者许文军汪玮谢建军《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2022年第6期769-779,共11页; 杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的主要致病菌,为制备能识别杀香鱼假单胞菌的特异性抗体,采用固相化抗原筛选方法,以杀香鱼假单胞菌重组溶血素共调节蛋白为抗原,从兔天然噬菌体scF... 展开更多; 关键词大黄鱼内脏白点病杀香鱼假单胞菌单链抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

大黄鱼人工感染杀香鱼假单胞菌的病理形态学及病原分布的初步研究被引量：5: 2; 作者陈卓施慧 +4 位作者谢建军汪玮王庚申何杰许文军《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第6期483-488,493,共7页; 为了研究杀香鱼假单胞菌在感染大黄鱼体内的分布状况及其所致各器官的病理损伤特点,通过人工回感试验,利用组织切片及免疫组化技术对感染大黄鱼的肝脏、脾脏、肾脏及鳃组织进行了组织病理切片,并进行HE染色和免疫组化分析。结果显示,人... 展开更多; 关键词杀香鱼假单胞菌人工回感实验免疫组化 H&E 染色; 在线阅读下载PDF 职称材料

大黄鱼源杀香鱼假单胞菌外膜蛋白OmpA的原核表达及免疫原性分析: 3; 作者汪浩汪玮 +4 位作者许文军施慧何杰谢建军王庚申《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第1期23-29,共7页; 外膜蛋白A(OmpA)是革兰氏阴性菌主要的外膜蛋白之一,在多种致病菌中表现出较强的免疫原性,是具有潜力的候选疫苗。为分析大黄鱼内脏白点病病原杀香鱼假单胞菌OmpA类外膜蛋白的免疫原性,本研究选取了杀香鱼假单胞菌基因组中存在的3个Omp... 展开更多; 关键词 OMPA 大黄鱼杀香鱼假单胞菌免疫原; 在线阅读下载PDF 职称材料

小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立: 4; 作者沈宁远韩明明 +6 位作者陈琳詹炜刘峰谢庆平徐万土陈黎明楼宝《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 2023年第2期109-119,共11页; 自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来,小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展,但病害防治形势依然十分严峻,其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防,建立了一种能高... 展开更多; 关键词杀香鱼假单胞菌荧光定量PCR 小黄鱼; 在线阅读下载PDF 职称材料

大黄鱼杀香鱼假单胞菌实地操作指南: 5; 作者孟庆珍陈恒贺洁《科学养鱼》 2019年第12期42-43,共2页; 据椒江区近年来对养殖大黄鱼的病害测报和监测,网箱养殖大黄鱼主要疾病有内脏白点病、寄生虫病、弧菌病、虹彩病毒病等,其中冬春季以内脏白点病为主。台州市椒江区水生动物防疫检疫站于2017年1月着手开展大黄鱼杀香鱼假单胞菌诊断与控... 展开更多; 关键词病害测报网箱养殖虹彩病毒大黄鱼内脏白点病弧菌病杀香鱼假单胞菌操作指南; 在线阅读下载PDF 职称材料

大黄鱼内脏白点病病原拮抗菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：4: 6; 作者李张婵施慧 +4 位作者许文军何杰谢建军王庚申汪玮《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期78-87,共10页; 为实现大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的生物防控,推进水产养殖用药减量,从健康大黄鱼肠道中筛选出对其内脏白点病病原菌——杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicid)有拮抗作用的益生菌。采用琼脂扩散法筛选菌株,通过生理... 展开更多; 关键词大黄鱼杀香鱼假单胞菌拮抗菌贝莱斯芽孢杆菌粪肠球菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗杀香鱼假单胞菌溶血素共调节蛋白单链抗体的制备及特性分析被引量：1: 1; 作者陈韵施慧许文军汪玮谢建军; 机构浙江海洋大学水产学院浙江省海洋水产研究所; 出处《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2022年第6期769-779,共11页; 基金浙江省基础公益研究计划(LGN21C190006) 浙江省农业农村厅协同创新项目(2020XTTGSC04) +1 种基金 2020年市级第二批现代渔业发展专项资金(编号:舟财农﹝2020﹞21号)。; 文摘杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的主要致病菌,为制备能识别杀香鱼假单胞菌的特异性抗体,采用固相化抗原筛选方法,以杀香鱼假单胞菌重组溶血素共调节蛋白为抗原,从兔天然噬菌体scFv文库中筛选出特异性的单链抗体(scFv);通过构建含有针对杀香鱼假单胞菌单链抗体(scFv)的重组质粒,对筛选出的scFv进行原核诱导表达。通过4轮淘选,共获得16株针对杀香鱼假单胞菌溶血素共调节蛋白的单链抗体(scFv),通过亲和力分析,最终筛选出7株特异性较高的单链抗体(scFv)进行原核表达;成功构建了含有抗杀香鱼假单胞菌溶血素共调节单链抗体(scFv)的重组质粒pET-30a-Hcp-scFv,转化到大肠杆菌表达菌株中,其中6个重组质粒可稳定表达,经过蛋白质可溶性分析和Western Blot鉴定,目的蛋白主要以包涵体的形式存在。研究结果为快速制备大量抗杀香鱼假单胞菌抗体提供了一种简便的方法,为今后大黄鱼内脏白点病的临床快速诊断奠定了基础。; 关键词大黄鱼内脏白点病杀香鱼假单胞菌单链抗体; Keywords Larimichthys crocea white-spots disease Pseudomonas plecoglossicida scFv; 分类号 S917.4 [农业科学—水产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大黄鱼人工感染杀香鱼假单胞菌的病理形态学及病原分布的初步研究被引量：5: 2; 作者陈卓施慧谢建军汪玮王庚申何杰许文军; 机构浙江海洋大学海洋与渔业研究所; 出处《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第6期483-488,493,共7页; 基金浙江省自然科学基金( LY15C190008 ) 浙江省科技厅院所专项( 2017F50016 +1 种基金 2017F30039 ) 浙江省科技厅公共服务项目( 304004-2018-1057 ).; 文摘为了研究杀香鱼假单胞菌在感染大黄鱼体内的分布状况及其所致各器官的病理损伤特点,通过人工回感试验,利用组织切片及免疫组化技术对感染大黄鱼的肝脏、脾脏、肾脏及鳃组织进行了组织病理切片,并进行HE染色和免疫组化分析。结果显示,人工感染发病大黄鱼临床症状与自然感染发病症状一致,病鱼体表无明显病症,但肝、脾、肾等内脏有大量白色结节;组织病理显示,病鱼肝脏、脾脏和肾脏是感染损伤的主要靶器官,内脏组织发生变性、坏死以及出现特征性的病理性结节;免疫组化检测特异性阳性信号出现在病鱼内脏组织器官的血窦或血管以及巨噬细胞内。研究表明,杀香鱼假单胞菌侵入鱼体后,主要分布在机体的血液中并大量增殖,通过血液循环到达鱼体各内脏器官;杀香鱼假单胞菌在鱼组织内的分布与其所致病理损伤之间呈正相关。; 关键词杀香鱼假单胞菌人工回感实验免疫组化 H&E 染色; Keywords Pseudomonas plecoglossicida artificial infection histopathology immunohistochemistry H&E staining method; 分类号 S941.42 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大黄鱼源杀香鱼假单胞菌外膜蛋白OmpA的原核表达及免疫原性分析: 3; 作者汪浩汪玮许文军施慧何杰谢建军王庚申; 机构浙江海洋大学海洋与渔业研究所浙江省海洋水产研究所浙江省海水增养殖重点实验室; 出处《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第1期23-29,共7页; 基金浙江省科技厅科研院所扶持经费项目(2017F30039) 浙江海洋大学博士启动基金(Q1432) 舟山市科技局公益类项目(2016C31057); 文摘外膜蛋白A(OmpA)是革兰氏阴性菌主要的外膜蛋白之一,在多种致病菌中表现出较强的免疫原性,是具有潜力的候选疫苗。为分析大黄鱼内脏白点病病原杀香鱼假单胞菌OmpA类外膜蛋白的免疫原性,本研究选取了杀香鱼假单胞菌基因组中存在的3个OmpA类重组蛋白(依次命名为P1,P2,P5,Genbank收录号分别为EPB94769.1,EPB94930.1,EPB95835.1),通过构建pET30a-OmpA表达载体、转化BL21诱导表达、His标签纯化等技术,获得3个纯化的OmpA类重组蛋白,分子量大小依次为25 kD(P1),32 kD(P2),35 kD(P5)。用制备的新西兰兔抗杀香鱼假单胞菌多克隆抗体,对获得的纯蛋白进行免疫原性Western Blot检测,结果表明:重组蛋白P1,P2,P5均能与兔抗发生特异结合,结合强度P5>P2>P1。本研究首次获得了杀香鱼假单胞菌OmpA重组蛋白并初步鉴定了其免疫原性,为杀香鱼假单胞菌的疫苗设计和筛选提供了有益参考。; 关键词 OMPA 大黄鱼杀香鱼假单胞菌免疫原; Keywords OmpA Larimichthys crocea Pseudomonas plecoglossicida immunogen; 分类号 S942.5 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立: 4; 作者沈宁远韩明明陈琳詹炜刘峰谢庆平徐万土陈黎明楼宝; 机构浙江海洋大学水产学院浙江省农业科学院水生生物研究所宁波市象山县水产技术推广站象山港湾水产苗种有限公司; 出处《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 2023年第2期109-119,共11页; 基金宁波市科技计划项目(2021S053,2021Z081) 浙江省重点研发计划(2021C02055)。; 文摘自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来,小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展,但病害防治形势依然十分严峻,其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防,建立了一种能高效、定量检测杀香鱼假单胞菌的方法。通过在小黄鱼鱼体内分离鉴定获得杀香鱼假单胞菌菌株,将其DNA回旋酶B亚基基因(gyrB)中一特异片段与pClone007 Blunt Vector载体重组得到重组质粒,后者经过转染大肠杆菌感受态细胞、LB-氨苄西林(ampicillin,AMP)选择性培养和测序鉴定,获得能表达gyrB特异片段的阳性质粒的菌落,进一步将阳性菌落进行扩大培养、质粒提取及纯化得到质粒标准品。利用设计合成的特异引物及逐级稀释的质粒标准品建立杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测标准曲线和反应体系。通过验证,运用该技术灵敏度达到10 copies·μL^(-1),并且组内和组间变异系数均小于0.82%。建立的方法实现了对小黄鱼中杀香鱼假单胞菌的快速定量检测,能够精确反映该菌在养殖水体及鱼体内的季节性变化并确立其流行规律,为小黄鱼内脏白点病的早期诊断提供了准确有效工具,同时为建立小黄鱼病害预警系统提供了良好的技术支撑。; 关键词杀香鱼假单胞菌荧光定量PCR 小黄鱼; Keywords Pseudomonas plecoglossicida fluorescence quantitative PCR Larimichthys polyactis; 分类号 S941.429 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大黄鱼杀香鱼假单胞菌实地操作指南: 5; 作者孟庆珍陈恒贺洁; 机构江苏无锡市锡山区农业农村局浙江台州市椒江区农业农村和水利局台州市水产技术推广总站; 出处《科学养鱼》 2019年第12期42-43,共2页; 文摘据椒江区近年来对养殖大黄鱼的病害测报和监测,网箱养殖大黄鱼主要疾病有内脏白点病、寄生虫病、弧菌病、虹彩病毒病等,其中冬春季以内脏白点病为主。台州市椒江区水生动物防疫检疫站于2017年1月着手开展大黄鱼杀香鱼假单胞菌诊断与控制技术研究,现将大黄鱼杀香鱼假单胞菌实地操作汇总如下。; 关键词病害测报网箱养殖虹彩病毒大黄鱼内脏白点病弧菌病杀香鱼假单胞菌操作指南; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大黄鱼内脏白点病病原拮抗菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：4: 6; 作者李张婵施慧许文军何杰谢建军王庚申汪玮; 机构浙江海洋大学水产学院浙江省海洋水产研究所/浙江省海水增养殖重点实验室; 出处《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期78-87,共10页; 基金浙江省基础公益研究计划项目(LGN21C190006) 浙江省农业农村厅协同创新项目(2020XTTGSC04) +1 种基金 2020年市级第二批现代渔业发展专项资金(舟财农[2020]21号)。; 文摘为实现大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的生物防控,推进水产养殖用药减量,从健康大黄鱼肠道中筛选出对其内脏白点病病原菌——杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicid)有拮抗作用的益生菌。采用琼脂扩散法筛选菌株,通过生理生化特征以及分子生物学分析,对菌株进行鉴定,并评价其溶血性、药敏性、安全性、产酶能力及抗菌广谱性。从健康大黄鱼肠道中初步分离出37株潜在益生菌,通过拮抗试验筛选出3株具有拮抗效果的菌株,分别命名为P1-17、P2-33和P3-11。通过生理生化特性及16S rRNA测序分析,菌株P1-17和P2-33鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),菌株P3-11鉴定为粪肠球菌(Enterococcus faecalis);溶血性试验和药敏试验结果表明3株菌均无显著溶血圈,且所含耐药因子较少,不具备潜在致病性;人工回感试验证实,3株拮抗菌对健康大黄鱼无致病性;抗菌谱测定结果表明,2株芽孢杆菌对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)等多种水产病原菌具有拮抗效果,同时2株芽孢杆菌具有产淀粉酶和蛋白酶的能力;而该株粪肠球菌只对杀香鱼假单胞菌有拮抗作用。研究结果可为后续大黄鱼肠道益生菌的筛选和应用提供科学依据。; 关键词大黄鱼杀香鱼假单胞菌拮抗菌贝莱斯芽孢杆菌粪肠球菌; Keywords Larimichthys crocea Pseudomonas plecoglossicida Antagonistic bacteria Bacillus velezensis Enterococcus faecalis; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗杀香鱼假单胞菌溶血素共调节蛋白单链抗体的制备及特性分析	陈韵施慧许文军汪玮谢建军	《海洋渔业》 CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大黄鱼人工感染杀香鱼假单胞菌的病理形态学及病原分布的初步研究	陈卓施慧谢建军汪玮王庚申何杰许文军	《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2018	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	大黄鱼源杀香鱼假单胞菌外膜蛋白OmpA的原核表达及免疫原性分析	汪浩汪玮许文军施慧何杰谢建军王庚申	《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立	沈宁远韩明明陈琳詹炜刘峰谢庆平徐万土陈黎明楼宝	《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	大黄鱼杀香鱼假单胞菌实地操作指南	孟庆珍陈恒贺洁	《科学养鱼》	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	大黄鱼内脏白点病病原拮抗菌的分离鉴定及生物学特性研究	李张婵施慧许文军何杰谢建军王庚申汪玮	《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心	2023	4	在线阅读下载PDF 职称材料