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指压式机械刺激诱导TRPV1脱敏减轻KOA成纤维样滑膜细胞炎性反应的机制研究
1
作者 张力 张华 +3 位作者 李平 高嵩 柯广娟 屈留新 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第9期72-81,共10页
目的构建背根神经节(DRG)与成纤维样滑膜细胞(FLSs)共培养的膝骨关节炎(KOA)离体模型,研究棘突旁指压式机械刺激诱导感觉神经元瞬时感受器电位离子通道V1(TRPV1)脱敏及其减轻FLSs炎性反应的效应机制。方法免疫荧光法鉴定DRG神经元细胞;... 目的构建背根神经节(DRG)与成纤维样滑膜细胞(FLSs)共培养的膝骨关节炎(KOA)离体模型,研究棘突旁指压式机械刺激诱导感觉神经元瞬时感受器电位离子通道V1(TRPV1)脱敏及其减轻FLSs炎性反应的效应机制。方法免疫荧光法鉴定DRG神经元细胞;通过FX⁃6000 T细胞应力系统实现对DRG神经元细胞的牵张应力加载,CCK⁃8法测定不同强度的机械应力对DRG神经元细胞活性的影响;流式细胞术研究各组DRG神经元细胞的Ca^(2+)离子通量;运用Transwell小室与FLSs建立共培养体系,ELISA测定细胞上清液中促炎因子IL⁃1β、TNF⁃α,促纤维化标记物TGF⁃β的含量;RT⁃qPCR、Western blot分别检测DRG神经元细胞中TRPV1及其脱敏负调控蛋白PP2B、CaM,以及FLSs中IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β、α⁃SMA的基因和蛋白表达水平。结果炎性环境下DRG神经元中Ca^(2+)离子通量增加,低强度(正弦波,2%,1 Hz,6 h)指压式机械刺激未能引起Ca^(2+)离子通量变化(P>0.05),中强度(正弦波,4%,1 Hz,6 h)和高强度(正弦波,8%,1 Hz,6 h)指压式机械刺激均使Ca^(2+)离子通量进一步增加(P<0.05),但高强度刺激不再进一步增加中强度的Ca^(2+)离子通量(P>0.05);低强度指压式机械刺激对DRG神经元细胞中TRPV1、PP2B、CaM的基因和蛋白表达,共培养细胞上清液中IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β的含量,以及FLSs中IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β、α⁃SMA的基因和蛋白表达均无干预作用(P>0.05);中、高强度指压式机械刺激上调炎性组DRG神经元细胞的TRPV1基因和蛋白表达(P<0.05),但下调PP2B、CaM的基因和蛋白表达(P<0.05);中、高强度的指压式机械刺激减少了共培养细胞上清液中IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β的含量(P<0.05),下调FLSs中IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β、α⁃SMA的基因和蛋白表达(P<0.05)。结论中、高强度指压式机械刺激诱导大鼠感觉神经元TRPV1脱敏,减少疼痛介质释放,并通过下调IL⁃1β、TNF⁃α、TGF⁃β的分泌抑制FLSs的炎性反应。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 滑膜炎症 瞬时感受器电位离子通道V1 机械刺激/中医整脊 细胞间通讯
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